HPLC同时测定复方金银花颗粒中绿原酸、连翘苷、黄芩苷、汉黄芩素、芹菜素的含量

目的:建立同时测定复方金银花颗粒中5种化学成分(绿原酸、连翘苷、黄芩苷、汉黄芩素、芹菜素)的高效液相色谱法。方法:采用Agilent-Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)。以甲醇(A)-0.2%磷酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱(0~10 min,25%~53%A;10~16 min,53%~78%A),检测波长278 nm,流速1 mL·min-1,进样量为20μL,柱温25℃。结果:绿原酸、连翘苷、黄芩苷、汉黄芩素、芹菜素5种成分在25 min内基本分离。峰面积(Y)对进样量(X)的标准曲线分别为绿原酸Y=2 350.4X-137.27,r=0.999 6;连翘苷Y=1 161.7X+18.474,r=0.999 6;黄芩苷Y=3 204.2X-423.45,r=0.998 8;汉黄芩苷Y=4 792.7X-93.15,r=0.998 5;芹菜素Y=1 434.1X-8.4132,r=0.999 3;加样回收率分别为:绿原酸99.47%(RSD 0.8%);连翘苷98.26%(RSD 0.9%);黄芩苷100.4%(RSD 1.9%);汉黄芩素99.29%(RSD 1.1%);芹菜素98.79%(RSD 1.1%)。结论:该方法操作简便,重复性好,分离效果好,可以作为复方金银花颗粒的质量控制。     

山银花黄酮粗提物对急性心肌缺血氧化损伤大鼠的保护作用

目的研究山银花黄酮粗提物对急性心肌缺血氧化损伤大鼠的保护作用。方法盐酸异丙肾上腺素皮下注射制备大鼠急性心肌缺血氧化损伤模型。连续灌胃不同浓度山银花黄酮粗提物7天,动态心电记录大鼠左心室压、心电图变化,硝基四氮唑蓝法观测心肌缺血面积百分率,酶联免疫吸附法检测血清中蛋白酶的活性或产物的量。结果以山银花黄酮粗提物喂养的急性心肌缺血大鼠,心电图因异丙肾上腺素引起的ST段上抬、T波升高有明显的缓解,QT间期时程缩短,心肌缺血面积百分率降低,心率、舒张压、左心室收缩压和平均压均有回升;且其血清丙二醛含量减少,肌酸激酶和乳酸脱氢酶活性降低,超氧化物歧化酶活性回升。结论山银花黄酮粗提物具有改善异丙肾上腺素所致大鼠急性心肌缺血氧化损伤的作用。     

HPLC法测定大鼠血浆中木蝴蝶槲皮素成分及药代动力学研究

目的:建立大鼠血浆中木蝴蝶提取物槲皮素含量的分析方法及药代动力学参数。方法:大鼠灌胃给药10 mg/kg后,于不同时间点眼眶取血;采用HPLC法XDB-C18色谱柱,流动相:乙腈-0.1%冰醋酸水溶液进行梯度冼脱,流速:1.00 mL/min,柱温:30℃,检测波长为:278 nm。分析大鼠血浆样品中槲皮素的含量并计算其药动学参数。结果:槲皮素在0.5~22.5μg/mL范围线性关系良好,r=0.9969,提取回收率83.9%~88.5%。日内日间精密度RSD10.0%。10 mg/kg木蝴蝶提取物槲皮素的tmax为(15.60±4.65)min,Cmax为(0.75±0.12)μg/mL,t1/2为(215.5±102.3)min。结论:该法灵敏度高,操作简便、准确,可用于木蝴蝶提取物大鼠灌胃给药后黄酮类成分的测定及药代动力学研究。     

山银花黄酮粗提物抗氧化活性的体外观察

目的提取山银花中黄酮类化合物,并体外观察其抗氧化活性。方法以70%乙醇作为提取溶剂,超声提取山银花中黄酮化合物;用邻苯三酚自氧化法、Fenton反应和DPPH反应测定粗提物对不同自由基的清除能力;用MTT法检测粗提物对H2O2诱导的氧化损伤内皮细胞和心肌细胞的保护作用。结果山银花中黄酮粗提物的提取率为5.65%;粗提取物中含黄酮16.35%。山银花黄酮粗提物质量浓度为250μg/mL时对超氧阴离子自由基(O-2·)、羟自由基(·OH)、DPPH自由基(DPPH·)的清除率分别为42.40%、64.99%和28.90%。内皮细胞和心肌细胞与浓度1.0 mmol/L的H2O2共同孵育12 h后,其存活率分别下降到49.21%和61.32%,山银花黄酮粗提物预处理30 min,细胞存活率分别提高到60.45%和69.98%。结论山银花中黄酮提取物对O-2·、·OH、DPPH·有较强的清除能力,并具有明显的抗H2O2氧化损伤、恢复细胞活性作用。