疏风通络方对哮喘小鼠模型Eotaxin、CCR3蛋白表达及ERK磷酸化的影响

目的 初步探讨疏风通络方通过影响哮喘小鼠模型血清嗜酸细胞活化趋化因子（Eotaxin）及肺组织CC类趋化因子受体3（CCR3）、细胞外信号调节激酶（ERK）磷酸化的表达水平进而抑制哮喘气道炎症的机制。方法 将70只C57BL/6小鼠随机分成正常组、哮喘模型组、疏风通络方低、中、高剂量组（7.75、15.5、30 g·kg^-1）、百日咳素（PTX）组、CCR3抑制剂（SB328437）组、磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂（LY294002）组、p38蛋白激酶拮抗剂抑制剂（SB203580）组、ERK抑制剂（PD98059）组。采用卵清蛋白（OVA）、氢氧化铝［Al（OH）₃］腹腔注射+OVA雾化建立小鼠哮喘模型（均为0.2 mL）。造模成功后，应用苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠各组肺组织炎症浸润情况、酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组小鼠血清中的Eotaxin［CC类趋化因子11（CCL11）、CC类趋化因子24（CCL24）］的水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肺组织ERK磷酸化水平及CCR3含量。结果 与正常组比较，模型小鼠支气管明显收缩，管腔狭窄，肺泡结构破坏，肺组织中可见大量炎性细胞浸润，支气管内可见黏液栓，气管黏膜下组织水肿，皱襞增多等表现，小鼠血清中CCL11、CCL24的含量显著增加（P<0.01），肺组织中CCR3蛋白的表达量明显增高（P<0.05），模型组、PTX组肺组织中的ERK水平明显升高（P<0.05），模型组、疏风通络方低剂量组肺组织中磷酸化（p）-ERK的水平明显升高（P<0.05）；与模型组比较，病理显示疏风通络方高剂量组肺组织病变明显减轻；疏风通络方高剂量组、SB328437组CCL11含量明显降低（P<0.05），疏风通络方低、高剂量组、PTX组、SB203580组、PD98059组、SB328437组小鼠肺组织中CCR3蛋白的表达明显降低（P<0.05）；疏风通络方高剂量组、PD98059组p-ERK的水平明显降低（P<0.05）；PD98059组的ERK水平明显降低（P<0.05）。结论 疏风通络方可以抑制哮喘气道炎症，其机制可能与其通过下调CCR3蛋白、CCL11的表达及ERK磷酸化抑制嗜酸性粒细胞活化有关。     

重度吸烟者肺部振动反应成像动态图像特征初探

目的 探讨肺功能正常重度吸烟者的振动反应成像(vibration vesponse vmaging,VRI)动态图像特征.方法 观察60例健康非吸烟者(对照组)和67例肺功能正常的重度吸烟者(重度吸烟组)VRI图像.首先采集两组受试者的临床资料(病史、体格检查、胸部X线),然后进行肺功能测定和VRI检查,比较两组之间V...     

支气管哮喘患者穴位贴敷治疗中皮肤反应与临床疗效的相关性研究

[目的]观察穴位贴敷法治疗支气管哮喘的临床疗效,探讨穴位贴敷治疗中皮肤反应程度与临床疗效的相关性。[方法]根据323例哮喘患者贴敷后的皮肤反应程度分为无反应组、轻度反应组、中度反应组和重度反应组,分析各组在不同时间点主要症状积分,次要症状积分,哮喘控制测试(ACT)评分,第一秒用力呼气容积(FEV1)及冬季发病次数的变化规律。[结果]各组主要症状积分,次要症状积分、ACT评分治疗前与治疗后各时间点,治疗后与6个月后相比均有统计学意义(P0.05)。FEV1治疗前与治疗6个月后相比有统计学意义(P=0.001)。各组治疗前与治疗后冬季发作次数的差值具有统计学意义(P0.05)。主要症状积分、ACT评分在治疗后各时间点中,无反应组与轻、中、重各组相比均有统计学意义(P0.05)。次要症状积分、FEV1在6个月后,无反应组分别与轻、中、重各组比较,有统计学意义(P0.01)。主要症状积分、ACT评分、次要症状评分、FEV1在治疗6个月后,轻、中度反应组与重度反应组之间有统计学意义(P0.05)。[结论]穴位贴敷疗法治疗哮喘临床疗效确切,同时具有近期疗效及远期疗效。贴敷治疗中皮肤反应程度与临床疗效具有相关性,有皮肤反应各组在近期疗效、远期疗效上均优于无反应组,轻、中、重各反应组在近期疗效上无统计学意义,但远期疗效上轻、中度皮肤反应优于重度皮肤反应。     

疏风通络方对哮喘大鼠不同时相外周血和肺泡灌洗液嗜酸细胞数量变化的影响

目的：探讨疏风通络方对哮喘大鼠血液和肺泡灌洗液（BALF）嗜酸细胞（EOS）数量变化的影响。方法：选择SPF级雄性Wistar大鼠为研究对象,随机分为正常组、模型组、氟美松组、DPI组、中药低、中、高剂量组,共7组,每组大鼠36只。第1d致敏：正常组给予生理盐水1mL代替抗原腹腔注射致敏,而其他6组给予1mL造模液（含Ⅴ级卵清蛋白100mg,氢氧化铝100mg和灭活百日咳杆菌6×10^9个）腹腔注射致敏;第15d开始激发：将各组大鼠分别置于相同大小的雾化箱内,正常组给予生理盐水6mL雾化激发,其他6组给予5％的Ⅴ级卵清蛋白（OVA）溶液6mL雾化激发,每次激发前2h正常组给予生理盐水1mL灌胃,而其他6组给予相应的药物灌胃。各组每天激发1次,每次激发30min,连续激发10d。距首次激发后的0h、6h、12h、24h、72h、10d各时点分别麻醉下每组取6只大鼠心脏采血和肺泡灌洗（取材结束后大鼠失血死亡）,然后迅速对血液和BALF标本进行EOS数量检测。结果：血中EOS数量变化：在不同时点模型组均高于正常组（P〈0．001）;各治疗组与模型组相比,氟美松组在0h、6h、12h、10d时点处于最低（P〈0．01或P〈0．001）,DPI组在24h、72h时点处于最低,但二者之间比较没有显著差异（P〉0．05）;其他治疗组之间相比,0—72h各时点DPI组处于最低（P〈0．001）,在10d时点中药高剂量组处于最低,且优于DPI组（P〈0．01）。BALF中EOS数量：在0h时点各组之间没有显著变化（P〉0．05）;在6h时除中药高剂量组外,模型组与其他治疗组和正常组之间均没有差异（P〉0．05）;在12h时点除模型组较正常组显著上升（P〈0．05）,各治疗组与模型组之间及各治疗组之间均没有差异（P〉0．05）;在24h时点,模型组显著高于正常组（P〈0．01）,各治疗组与模型组比较,只有氟美松有显著差异（P〈0．01）;在72h、10d时点模型组均显著高于正常组（P〈0．001）,DPI组和中药低剂量组与模型组比较均没有差异（P〉0．05）,氟美松组、中药中、高剂量组均与模型组比较有显著差异（P〈0．05或P〈0．01或P〈0．001）,三者比较,氟美松组EOS数值最低,中药中、高剂量组之间比较没有显著差异（P〉0．05）。结论：氟美松对哮喘大鼠血和BALF中EOS数量的影响最大,能显著降低血和BALF中EOS数量,而中药疏风通络方起效、显效慢,效果始终不及氟美松。     

中药治疗特发性肺纤维化103例生存预后的回顾性分析

目的分析中药治疗对特发性肺纤维化IPF生存预后的影响。方法回顾性分析中药治疗IPF患者的生存资料,对103例特发性肺纤维化患者依治疗分为A组(百令胶囊)、B组(血府逐瘀胶囊)和C组(血府逐瘀胶囊+百令胶囊),每3个月随诊,评价3/5累积生存率、中位生存时间和死亡风险因素。结果 3年生存率比较,B组(63.6%)、C组(65.7%)均高于A组(40.0%),差异均有统计学意义(P<0.05);5年生存率比较,B组(48.5%)、C组(48.6%)均高于A组(28.6%),差异均有统计学意义(P<0.05);中位生存时间比较,B组(43个月)、C组(49个月)均优于A组(30个月),差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Cox比例风险回归分析,中药治疗(HR 0.520,95%CI0.309,0.876)可使死亡风险降低92%。结论以活血化瘀类中药为基础的治疗可提高IPF患者3/5生存率、延长生存时间,联合补肾类中药有协同作用,但未能进一步改善生存预后。     

浸润性肺腺癌组织上调表达基因的筛选及验证

目的筛选及验证浸润性肺腺癌组织上调表达基因,寻找肺腺癌诊断和预后评估的新型分子标记物。方法收集经手术病理证实的浸润性肺腺癌患者6例,制作癌组织及相应癌旁组织基因表达谱芯片,进一步通过Geneontology、Pathway分析、标记物预测分析和基因网络关系分析方法对芯片数据进行处理,结合TheLungCancer数据库检索与肺癌发生相关的mRNA信息,筛选出浸润性肺腺癌组织上调表达基因。另收集经手术病理证实的浸润性肺腺癌患者97例,抽提癌组织及相应癌旁组织RNA,逆转录,设计芯片筛选出的上调表达目的基因引物,实时荧光定量PCR技术（qPCR）扩增目的基因,以PUM1为内参基因,获得各样本组织ΔCt值,与癌旁组织对比,分析103例癌组织目的基因表达情况。结果基因芯片数据结合数据库,初步筛选出浸润性肺腺癌组织14个上调表达基因,分别为SPINK1、ITGA11、TOX3、SPP1、MCM10、MMP12、COL11A1、SIX1、FOXA1、CLIC6、TMEM45B、GDF15、CEACAM1、ESR1。qPCR验证结果表明,与相应癌旁组织相比,SPINK1mRNA、TOX3mRNA、MMP12mRNA、CLIC6mRNA、TMEM45BmRNA在浸润性肺腺癌组织上调表达,差异均有统计学意义（P＜0.05或0.01）,而ITGA11mRNA、SPP1mRNA、MCM10mRNA、COL11A1mRNA、SIX1mRNA、FOXA1mRNA、GDF15mRNA、CEACAM1mRNA、ESR1mRNA在肺腺癌组织表达未见上调,差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论本研究成功筛选及验证SPINK1、TOX3、MMP12、CLIC6、TMEM45BmRNA水平在浸润性肺腺癌组织上调表达,提示可作为肺腺癌诊断和预后评估的新型分子标记物。     

吸烟对振动反应成像能量振动曲线变化的影响

目的探讨肺功能正常重度吸烟者的振动反应成像（VRI）能量振动曲线特征。方法纳入健康非吸烟者60例,肺功能正常重度吸烟者67例,慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者60例。对3组受试者进行病史询问、临床资料收集、肺功能测定、胸部X线和VRI检查,分析并比较3组能量振动曲线的差异。结果肺功能正常重度吸烟者VRI振动能量曲线呼气相低平43.3%、平台16.4%、凹陷16.4%、单峰14.9%。健康非吸烟者呼气相低平6.7%、平台3.3%,凹陷、单峰均未出现,这些征象与重度吸烟者有显著差异（P〈0.05）。COPD组呼气相低平60%、平台33.3%、凹陷18.3%、单峰16.7%,这些征象与重度吸烟者相比呼气相低平、平台有显著差异（P〈0.05）,凹陷、单峰无显著差异（P〉0.05）。呼气相/吸气相能量峰值比：重度吸烟组为0.56,健康非吸烟组为0.74,COPD组为0.54,重度吸烟者与健康吸烟者相比有显著差异（P〈0.05）,但与COPD组无显著差异（P〉0.05）。结论肺功能正常重度吸烟者与健康非吸烟者相比VRI能量振动曲线特征为振动能量曲线的呼气相低平、平台、凹陷和单峰的发生率显著增高,呼气相/吸气相能量峰值比较低,但与COPD组相比无显著差异。     

疏风通络方对哮喘大鼠嗜酸细胞跨膜迁移 相关因子VCAM-1/PI3K/Rac-1/NOX2/ NOX4/SHP-2表达影响的研究

[目的]探讨疏风通络方对哮喘大鼠嗜酸细胞跨膜迁移的影响。[方法]选择SPF级雄性Wistar大鼠70只为研究对象,随机分为正常组、模型组、地塞米松组、DPI组、中药低、中、高剂量组,共7组,每组大鼠10只。第1天致敏:正常组给予生理盐水1 mL腹腔注射致敏,而其他6组给予1 mL造模液(含V级卵清蛋白100 mg,氢氧化铝100 mg和灭活百日咳杆菌6×109个)腹腔注射致敏;第15天开始激发:将各组大鼠分别置于相同大小的雾化箱内,正常组给予生理盐水6 mL雾化激发,其他6组给予5%的V级卵清蛋白溶液6 mL雾化激发,每次激发前2 h正常组给予生理盐水1 mL灌胃,而其他6组给予相应的药物灌胃。各组每天激发1次,每次激发30 min,连续激发10 d后处死大鼠,并采集相应标本,并进一步检测影响嗜酸细胞跨膜迁移的相关指标。[结果]模型组肺组织嗜酸细胞跨膜迁移相关调节因子血管内皮黏附分子-1(VCAM-1)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、Rac-1、NADPH氧化酶2(NOX2)、NADPH氧化酶4(NOX4)、酪氨酸磷酸酶(SHP-2)出现高表达,高于正常组(P<0.001);各治疗组与模型组相比,地塞米松组抑制上述因子表达的效果最好(P<0.001),中药高剂量组的抑制效果略差于地塞米松组,但两者差异无统计学意义(P>0.05),氯化二联苯碘(DPI)组、中药低、中剂量组抑制效果一般。[结论]疏风通络方对哮喘大鼠嗜酸细胞跨膜迁移有一定的阻抑作用,这可能是其平喘作用机制之一。     

疏风通络方对哮喘大鼠嗜酸细胞跨膜迁移相关因子VCAM-1/PI3K/Rac-1/NOX2/NOX4/SHP-2表达影响的研究

[目的]探讨疏风通络方对哮喘大鼠嗜酸细胞跨膜迁移的影响。[方法]选择SPF级雄性Wistar大鼠70只为研究对象,随机分为正常组、模型组、地塞米松组、DPI组、中药低、中、高剂量组,共7组,每组大鼠10只。第1天致敏:正常组给予生理盐水1 mL腹腔注射致敏,而其他6组给予1 mL造模液(含V级卵清蛋白100 mg,氢氧化铝100 mg和灭活百日咳杆菌6×109个)腹腔注射致敏;第15天开始激发:将各组大鼠分别置于相同大小的雾化箱内,正常组给予生理盐水6 mL雾化激发,其他6组给予5%的V级卵清蛋白溶液6 mL雾化激发,每次激发前2 h正常组给予生理盐水1 mL灌胃,而其他6组给予相应的药物灌胃。各组每天激发1次,每次激发30 min,连续激发10 d后处死大鼠,并采集相应标本,并进一步检测影响嗜酸细胞跨膜迁移的相关指标。[结果]模型组肺组织嗜酸细胞跨膜迁移相关调节因子血管内皮黏附分子-1(VCAM-1)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、Rac-1、NADPH氧化酶2(NOX2)、NADPH氧化酶4(NOX4)、酪氨酸磷酸酶(SHP-2)出现高表达,高于正常组(P<0.001);各治疗组与模型组相比,地塞米松组抑制上述因子表达的效果最好(P<0.001),中药高剂量组的抑制效果略差于地塞米松组,但两者差异无统计学意义(P>0.05),氯化二联苯碘(DPI)组、中药低、中剂量组抑制效果一般。[结论]疏风通络方对哮喘大鼠嗜酸细胞跨膜迁移有一定的阻抑作用,这可能是其平喘作用机制之一。     

基于诠释学循环的《伤寒论》桂枝汤“发汗”研究

桂枝汤"发汗"问题是方剂学、伤寒学研究领域的热点问题,应用诠释学理论与方法,对《伤寒论》文本进行研究,发现桂枝汤在《伤寒论》的发汗作用必须通过"啜粥温覆"调护方法,并且《伤寒论》霍乱后期桂枝汤应用不是以发汗为治法及目的。另外依据诠释学理论,争议原因主要是由研究范围不明确造成的。