造血干细胞移植后HLA-G表达与移植物抗宿主反应的相关性研究

背景 长期以来,许多研究者花费大量精力致力于研究移植排斥与存活相关的机制,但对造血干细胞移植、器官移植的了解依然缺乏.自从上世纪90年代发现HLA-G在诱导母亲与胎儿耐受起着重要的生理作用以来,研究HLA-G作用于异体移植的观点已经得到有力支持.一些研究报道已经证实,同种移植中HLA-G的出现以及可溶性sHLA-G的血清/血浆水平的增加与更好的移植耐受,并增加移植物的存活都有相关性.目的 本研究确定造血干细胞移植后血浆sHLA-G水平和单个核细胞(mononuclear cells)膜HLA-G表达与移植物抗宿主反应的关系.方法 225名首次造血干细胞移植患者依据移植物抗宿主反应的活性,分为急性移植物抗宿主反应组(acute GVHR)和慢性移植物抗宿主反应组( chronic GVHR),分别为96名和129名.健康献血者95名作为对照组.流式细胞法分析单核白细胞膜HLA-G(mHLA-G)表达.ELISA法检测血浆中可溶性HLA-G(sHLA-G)含量.ROC曲线评价sHLA的临界值与预判GVHR活性的相关性.RT-PCR和Western印迹分别分析HLA-G mRNA表达和蛋白一致性.免疫组化染色检测12名移植患者皮肤组织HLA-G表达状态.结果 外周血单个核白细胞在acute GVHR组和chronic GVHR组都有低表达.急性组外周血中单核细胞CD14+ mHLA-G1+细胞占(45.53±17.32)％,而慢性组中只有(10.22％±5.78)％,两者比较差异有统计学意义.sHLA-G5表达水平在急性组有显著性增加.sHLA-G5预判急性GVHR的最佳临界值是253.9 μg/L,有很高的诊断准确度.12名acute GVHR患者中10名皮肤组织HLA-G表达阳性.RT PCR和Western印迹分析显示急性GVHR组的血浆sHLA-G5水平显著高于慢性组.结论 ROC曲线分析得出血浆sHLA-G5水平的临界值253.9μg/L可用于预测造血干细胞移植后移植物对宿主的急性排除反应.单核细胞CD14+ HLA-DR- HLA-G+细胞具有干细胞特征,该细胞将可能用于移植排除反应的预防和治疗.     

电针刺激水沟、百会穴后对缺血再灌注大鼠脑内小胶质细胞的活化

背景:小胶质细胞是中枢神经系统的免疫效应细胞,正常情况下在脑内处于静息状态,一旦被激活,将释放一系列的神经毒性因子和炎性因子,对神经元产生致死性损害。目的:观察局灶性脑缺血再灌注对大鼠脑内小胶质细胞活化的影响以及电针刺激水沟、百会穴的调节作用。设计:随机对照动物实验。单位:解放军第四五八医院理疗科;上海同济大学附属东方医院;华中科技大学同济医学院组胚教研室。材料:实验于2002-03在华中科技大学同济医学院组织胚胎学教研室完成。取80只Wistar大鼠随机分为8组,每组10只。方法:①正常对照组:不干预,次日处死。②假手术组:仅分离动脉,不插线栓,次日处死。③再灌注6,12,24h组:线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血30min后分别再灌注6,12,24h处死。④再灌注6h 电针组:同前造模,在栓线插入大脑中动脉造模成功后立即进行针刺(水沟、百会),加电刺激(疏密波,频率4Hz/16Hz,刺激强度从1V起,每10min增加1V,终强度为3V,每次持续刺激30min),缺血30min后再灌注6h处死。⑤再灌注12h 电针组:造模后立即针刺,隔8h后再针刺1次,参数同前。缺血30min后再灌注12h处死。再灌注24h 电针组:造模后立即针刺1次,每隔8h针刺1次,缺血30min后再灌注24h处死。主要观察指标:各组大鼠在相应时间点灌注固定处死取脑,采用免疫组化法以蓖麻凝集素标记小胶质细胞,计算小胶质细胞数量,观察其形态变化。结果:67只大鼠进入结果分析。正常对照组和假手术组未见显色,再灌注6,12,24h组在缺血灶边缘可见大量小胶质细胞活化,数量增加,再灌注12h达高峰,分别为(35.38±1.77),(54.25±1.67),(49.29±2.21)个/200倍视野;经电针治疗后,再灌注6,12,24h 电针组均低于同时段模型组[(32.11±2.80),(50.88±2.64),(45.45±3.95)个/200倍视野,P<0.05]。结论:脑缺血再灌注后脑内小胶质细胞被活化,对神经元产生毒性作用。电针治疗可减少小胶质细胞活化,从而对神经元发挥保护作用。     

新装修商场空气质量调查分析

目的了解新装修商场空气质量状况及其与装修时间的关系,为制定商场空气质量防控对策提供科学依据。方法采用分层抽样方法,抽取深圳市光明新区新装修商场共17家,设置监测点174个,采用现场监测仪器对CO、CO2、甲醛、总挥发性有机物（TVOC）、可吸人性颗粒物（IP）、噪声、照度7项指标进行检测。结果①甲醛最大值为0．482mg／m2,超出国家标准3．02倍,TVOC最大值为2．302mg／m2,超标2．84倍,IP最大值为0．542mg／m2,超标2．61倍。②7项指标总合格率仅79．15％,且以噪声和IP合格率为低,分别为53．45％和74．14％。③甲醛含量与装修时间（周）存在统计学相关（r=-0．485,回归系数B=-0．375）。结论新装修商场空气污染较为严重,同时装修时间也是重要影响因素,应引起高度重视。     

老龄大鼠脑室管膜周围血管加压素神经元免疫细胞化学研究

为观察老龄大鼠室管膜周围血管加压素（Vasopressin,VP)能神经元的分布和VP表达的变化，应用免疫细胞化学方法，对青年组织和老龄组大鼠下丘脑VP能神经元进行免疫细胞化学反应，结果显示，老龄组大鼠第三脑室，侧脑室和穹窿下器的脑室管膜周围可见较多环脑室分布,VP免疫反应增强的VP能神经元和神经纤维，而正常青年组大鼠第三脑室，侧脑室和穹窿下器的脑室管膜周围则极少见类似分布的VP免疫反应阳性神经元，上述部位VP免疫反应神经元的增加和VP表达增强可能与机体老龄化过程有关，并可能对老年时期脑血管的调节产生重要影响。     

小鼠出生前后胃肠胰D细胞免疫组化研究

本文报导了用免疫细胞化学PAP方法,对小鼠三个时期(胎期、新生期、成熟期)的胃、十二指肠、胰腺中D细胞进行的初步观察。结果发现在三个不同时期上述器官中D细胞在数量及分布上都有一定的差别。胎期胃幽门中一般未见D细胞,但十二指肠和胰腺中已可见。出生后胃幽门D细胞逐渐增多,而十二指肠D细胞相对略有减少     

深圳市光明新区公共场所空气质量现状分析

目的 了解深圳市光明新区主要公共场所空气质量现状,为制定新区公共场所空气质量防控政策提供科学依据.方法 采用分层抽样方法,抽取深圳市光明新区商场、饭店、宾馆和歌舞厅4种公共场所51家,设置监测点458个,采用现场监测仪器对CO、CO2、甲醛、TVOC、IP、噪声、照度7项指标进行检测.结果 甲醛最大值为0.905 mg/m3,超出国家标准6.51倍,TVOC最大值4.38 m-g/m3,超标6.30倍,IP最大值0.894 mg/m3,超标2.58倍.4种公共场所在IP、噪声和照度3项指标合格率方面差异有统计学意义(P<0.001),其中IP指标合格率以旅馆最低,仅为23.53%,噪声指标合格率以商场最低,为28.81%,照度指标合格率以旅馆最低,为17.65%.结论 光明新区公共场所空气污染情况较为严重,应引起高度重视并迅速采取有效控制措施.     

培养细胞的免疫细胞化学操作体会

对培养的细胞进行免疫细胞化学反应 ,可以在培养皿内直接进行 ,亦可经树脂包埋后 ,在半薄切片上进行。本实验应用上述二种方法 ,对培养的大鼠内耳血管纹的组织细胞进行了免疫细胞化学显示。组织细胞处理 :1 )平皿培养和盖玻片上培养的大鼠内耳血管纹处组织细胞 ,经Bouin固定液固定 4h,0 .0 1 Mol/L PBS浸洗 ,0 .1 %的 Triton x- 1 0 0处理 2 0 min;2 )平皿培养的细胞经酶处理 ,离心收集 ,2 %戊二醛固定液固定 4h,经丙酮脱水与锇酸固定( - 2 0℃ )、树脂包埋、半薄切片。免疫细胞化学反应 :上述处理的细胞或切片进行免疫细胞化学反应 ,其…     

Expressions of connexin and par-3 in the distal margin of rectal cancer after ultra-low anterior resection

This study examined the expression of connexin and protease-activated receptor 3 （par-3） in the distal resection margin of rectal cancer and the correlation of the expression of the two proteins with tumor relapse. A total of 40 patients with rectal cancer underwent ultra-low anterior resection with curved cutter stapler. The pathological specimens were divided into 3 groups in terms of sampling sites： tumor group, 2.0-cm group （in which the tissues were harvested 2.0 cm distal to the tumor tissues）, 3.0-cm group （in which the tissues were taken 3.0 cm away from the tumor tissues）. All the samples were pathologically observed and then measured for the expression of connexin and par-3 by employing immunohistochemistry and Western blotting. The operations in this series went uneventfully. No anastomotic stoma bleeding, stenosis and death occurred postoperatively. Histopathologically, in the tumor group, epithelial cells lost normal pattern of arrangement and polarity, and were loosely connected and even detached. In the 3.0-cm group, the epithelia had normal appearance, obvious cell polarity and essentially intact cell junction. Immunohistochemistry and Western blotting indicated that the 3.0-cm group had the strongest expression of connexin and par-3, and the expression in the 2.0-cm group and the tumor group was relatively weak. There existed significant difference in the expression of the two proteins among the three groups （P〈0.05 for all）. It was concluded that the down-regulated connexin and par-3 in the distal margin of rectal cancer tissues may indicate the progression of the disease and high likelihood of recurrence and metastasis. Although no tumor cells were found in the sections of the 2.0cm group, the decreased expression of connexin and par-3 may suggest the development of anaplasia and the increased odds of tumor relapse. Therefore, we are led to speculate that tumor resection only including 2.0 cm of unaffected rectum could not completely avoid the distant metastasis and local relapse.     

电针预处理对血管性痴呆大鼠海马组织病理形态学的影响

目的 观察电针预处理对血管性痴呆(VD)大鼠海马组织病理形态学的影响.方法 SD大鼠随机分为电针预处理组、模型组、正常组、假手术组.采用改良线栓法制备VD模型,观察电针百会、肾俞、后三里后VD大鼠海马组织病理学形态.结果 电针预处理组海马神经元排列比较整齐,数目较多.结论 电针对VD大鼠海马神经元细胞有保护作用;电针预...     

人红细胞老化过程中麦芽凝集素受体电镜细胞化学定量研究

选用青年人和老年人周围血红细胞,经聚庶糖密度梯度离心,分别将两组人血红细胞分层并获取早期红细胞和老化红细胞。应用胶体金标记的麦芽凝集素（ＷＧＡｇ）分别对青年人和老年人的两类红细胞进行细胞化学标记、电镜观察,每组所获电镜照片进行计算机图像分析处理。结果显示,青年人老化红细胞膜上ＷＧＡｇ颗粒明显低于早期红细胞。老年人老化红细胞膜上ＷＧＡｇ颗粒也有明显降低,但将老年人与青年人进行比较,同期的红细胞膜上ＷＧＡｇ颗粒密度差异不明显。推测红细胞老化过程中ＷＧＡｇ受体细胞化学的变化可能与老化细胞处理机制有关。