补肾温阳化瘀方对实验性子宫内膜异位症TRPV1及其致敏因子NGF的影响

目的研究补肾温阳化瘀方对实验性子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)简称内异症,瞬时受体电位辣椒素亚型Ⅰ(transientreceptor potential vanilloid receptor 1,TRPV1)及致敏因子神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的影响,以探讨补肾温阳化瘀方治疗EMT疼痛的作用机制。方法将近交系BALB/c雌性小鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、孕三烯酮组,每组15只。观察各组扭体反应,并采用酶联免疫法(ELISA)检测血清NGF的含量,采用免疫组化SP法及Western blot法检测子宫和异位灶NGF、TRPV1蛋白的表达,采用Real-time PCR方法检测子宫和异位灶NGF、TRPV1 mRNA的表达。结果模型组血清NGF含量显著高于假手术组(P0.01),且与小鼠扭体次数呈正相关(r=0.574,P0.01);与模型组比较,中药高、低剂量组、孕三烯酮组血清NGF含量显著下降(P0.05);模型组子宫NGF、TRPV1蛋白及NGF、TRPV1 mRNA表达均高于假手术组(P0.01)。与模型组比较,中药高、低剂量组、孕三烯酮组子宫和异位灶NGF、TRPV1蛋白表达均显著降低(P0.01),NGF、TRPV1 mRNA以中药高剂量组下降最为明显(P0.01)。子宫及异位灶NGF与TRPV1蛋白及mRNA表达均呈正相关(P0.01)。结论 TRPV1及致敏因子NGF共同参与了EMT疼痛的发生;补肾温阳化瘀方可通过降低NGF对TRPV1的上调作用从而发挥抑制EMT疼痛的作用。     

BALB/c小鼠子宫内膜异位症痛经模型的建立

目的 建立近交系BALB/c小鼠子宫内膜异位症痛经模型。方法 采用自体移植法将小鼠自体子宫组织块移植到腹膜,复制子宫内膜异位症模型,将术后的小鼠随机分为4组,手术+雌激素+缩宫素组、手术+雌激素组、手术+缩宫素组、手术组,并设假手术组和雌激素+缩宫素组,术后1～12 d采用不同方案诱发小鼠扭体反应,记录扭体潜伏期及扭体次数,并取异位灶行HE染色和病理组织学观察,筛选建立内异症痛经模型的最佳方案。结果 除假手术组、雌激素+缩宫素组外,各组小鼠移植物均生长良好,镜下可见子宫内膜腺体及间质细胞,证实内异症造模成功,与手术+缩宫素组、手术组相比,手术+雌激素+缩宫素组、手术+雌激素组移植物体积明显增大,差异有显著性（P<0.01）;手术+雌激素+缩宫素组扭体发生率100%,雌激素+缩宫素组扭体发生率80%,手术+缩宫素组扭体发生率50%,其余组未出现扭体反应,组间差异有显著性（P<0.01）;与手术+缩宫素组、雌激素+缩宫素组相比,手术+雌激素+缩宫素组扭体潜伏期明显缩短（P<0.01,P<0.05）,扭体次数明显增多（P<0.01,P<0.05）,差异有显著性。结论 手术+雌激素+缩宫素组为建立内异症痛经模型的最佳方案,方法简单易行,可用于内异症痛经发病机制及药物治疗研究。     

血清CCL4水平和绝经后骨质疏松症严重程度相关性研究

目的探讨血清CCL4水平与绝经后骨质疏松症(PMOP)严重程度的关系。方法对66名PMOP女性,68名绝经后非骨质疏松女性和67名健康育龄妇女进行研究。用双能X射线吸收测定法扫描评估骨密度。Oswestry残疾指数和视觉模拟量表用于量化症状的活动功能和严重程度。用定量夹心酶联免疫吸附测定血清CCL4水平。结果发现CCL4血清水平与骨密度呈显著负相关。此外,血清CCL4水平与视觉模拟评分和Oswestry残疾指数评分显著相关。结论血清CCL4是评估PMOP女性疾病严重程度的潜在生物标志物。     

滋肾育胎丸对手机辐射大鼠卵巢功能和ATM蛋白表达的影响

【目的】观察滋肾育胎丸对900 MHz拟手机辐射雌性大鼠卵巢功能和卵巢ATM蛋白表达的影响。【方法】选用30只SD雌性大鼠随机分为正常组、辐射组、滋肾育胎丸组,正常组不接受辐射,辐射组和滋肾育胎丸组每天暴露于自制900 MHz手机辐射源4 h,连续30 d,滋肾育胎丸组每天灌胃滋肾育胎丸悬液,另外2组灌胃等容积生理盐水,阴道涂片选动情期处死大鼠。采用放射免疫法检测各组大鼠血清睾酮(T)、雌二醇(E2)含量,苏木精—伊红(HE)染色观察卵巢组织形态学变化,免疫组织化学法检测大鼠卵巢ATM蛋白表达。【结果】与正常组比较,辐射组大鼠血清E2水平显著降低(P0.05),血清T含量无显著变化(P0.05);辐射组卵巢颗粒细胞层数减少(P0.05),颗粒细胞核ATM蛋白表达减弱;与辐射组大鼠比较,滋肾育胎丸组大鼠血清E2水平显著升高,卵巢颗粒细胞层数增多,ATM蛋白表达显著增强(均P0.05)。【结论】拟手机辐射对大鼠卵巢功能有不良影响,可能与影响卵巢ATM蛋白表达有关;滋肾育胎丸对手机辐射大鼠卵巢损伤具有保护作用。     

补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症模型小鼠BK/BKB1R、PGF2α水平的影响

目的探讨补肾温阳化瘀方干预子宫内膜异位症痛经的作用机制。方法将75只BALB/c雌性小鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组与西药组,每组15只。除假手术组外,其余各组小鼠均采用手术移植法复制子宫内膜异位症痛经模型。造模同时中药高、低剂量组分别每日予补肾温阳化瘀方61.67、15.42g/kg和戊酸雌二醇0.5 mg/kg,西药组每周2次予孕三烯酮0.4 mg/kg和戊酸雌二醇0.5mg/kg。于造模12天腹腔注射缩宫素后观察各组小鼠扭体反应,测量异位灶体积,检测小鼠血清血管舒缓激肽(BK)、前列腺素F2α(PGF2α)含量,免疫组化法和western blotting法检测子宫和异位灶缓激肽B1受体(BKB1R)蛋白表达,RT-PCR法检测子宫和异位灶BKB1R mRNA的表达。结果造模第12天,除假手术组外,其余各组小鼠均成功诱发扭体反应并见异位灶。与模型组比较,中药高剂量组、中药低剂量组与西药组扭体潜伏期均明显延长、扭体次数显著减少、异位灶体积减小(P0.05或P0.01)。与模型组比较,中药高剂量组、中药低剂量组、西药组血清BK、PGF2α含量显著下降,子宫及异位灶BKB1R蛋白及其mRNA表达显著降低(P0.01),且中药高剂量组子宫内膜异位灶BKB1R mRNA明显低于西药组(P0.01)。结论补肾温阳化瘀方能有效防治子宫内膜异位症,其机制可能与降低血清BK及PGF2α含量、抑制BKB1R蛋白及其mRNA的表达有关。     

补佳乐联合缩宫素建立小鼠原发性痛经模型

摘要　目的　建立小鼠原发性痛经模型。方法　不同剂量补佳乐给近交系BALB/c小鼠连续灌胃,末次给药后腹腔注射缩宫素,诱发扭体反应,记录扭体潜伏期和扭体次数,筛选最佳条件。结果　补佳乐最佳剂量为0.5 mg?kg-1;催产素最佳剂量为2U/只;补佳乐灌胃后1个小时为观察扭体反应的最佳时间,用药周期第3天时扭体次数开始增多;从第4天开始维持在高水平。结论　补佳乐联合缩宫素可以成功建立小鼠原发性痛经模型。