细胞因子诱导的杀伤细胞与肿瘤浸润淋巴细胞体外细胞毒活性比较

目的比较用多种细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)与癌性胸水中肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的细胞毒活性,为临床应用提供依据.方法用不同的细胞因子分别诱导培养CIK和癌性胸水TIL,按常规法计数细胞增殖量,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测其细胞毒活性.结果诱导培养14 d后,CIK细胞毒活性为(76.65±16.78)%,增殖倍数为520±102;TIL细胞毒活性为(55.31±11.02)%,增殖倍数为182±78.结论CIK细胞对K562细胞的细胞毒活性在14 d时达峰值,而TIL细胞在2l d时才达峰值,且CIK细胞毒活性明显高于TIL细胞,增殖细胞数量也比TIL细胞高.CIK可替代TIL细胞进行胸腔注射治疗癌性胸水.     

E-Learning在高职高专生理学教学中的应用研究

E-Learning是基于网络进行的一种全新的学习模式,它强调以学习者为中心,通过在交互式学习环境中为学习者提供网络课程、多媒体素材、多媒体课件、题库、案例等内容,从而有效促进学习者知识与能力的发展。具有交互性、智能性、时效性、协作性等特点。在生理学教学中,该方法较传统教学手段具有提升学习效率,有利于开展交互式教学,促进师生之间的情感交流,以及提高教师的教学水平和专业水平的优势。     

CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在CIK细胞诱导中的表达及其功能

目的探讨肿瘤患者自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)诱导过程中CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的变化及其功能。方法应用血细胞分离机采集22例肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC),诱导培养CIK细胞,用流式细胞仪动态监测其CD4~+CD25~+Foxp3~+表型,并分析Tregs细胞负性调控分子转化生长因子-β1(TGF-β1)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)和IL-10的表达水平,采用细胞增殖抑制试验测定Tregs细胞免疫学功能。结果诱导的CIK细胞中存在CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs,其表达量分别为第1天(0.30±0.15)%、第3天(4.48±1.72)%、第5天(3.83±2.12)%、第9天(2.37±1.17)%、第11天(1.65±0.99)%、第14天(1.04±0.76)%。诱导第14天时的Tregs细胞免疫调控负性分子TGF-β1的表达水平为(97.2±2.1)%、CTLA-4为(96.2±3.5)%、IL-10为(4.2±2.3)%。细胞增殖抑制试验中空白对照组、条件对照组以及实验组的增殖细胞表达量分别为(8.55±2.38)%、(42.66±7.32)%、(57.04±7.49)%。结论 CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs细胞可作为潜在的CIK细胞质量评价指标。     

协同刺激分子B7-H3与B7-H4联合效应对胃癌患者预后的影响

目的 探讨胃癌组织中协同刺激分子B7-H3和B7-H4的表达水平对胃癌患者预后的影响及其与临床病理特征的关系.方法 采用回顾性研究随访调查157例胃癌患者的相关临床资料;应用免疫组织化学染色法检测相关病理指标及胃癌患者手术标本中B7-H3、B7-H4的表达;胃癌患者不同临床特征与B7-H3、B7-H4表达水平的相关性采用x2检验,不同临床特征患者的无进展生存期(PFS)及总生存期(OS)的比较采用Kaplan-Meier法及Log-rank检验,拟合多因素Cox模型,用风险比(HR)及95％可信区间(CI)估计不同临床指标与复发和死亡结局的联系强度.结果 B7-H3、B7-H4表达水平与不同临床特征之间无明显相关;单因素生存分析显示年龄较大(＞60岁)、分期较晚、肿瘤较大(＞5 cm)、浸润较深(侵及深肌层)、远处转移及协同刺激分子B7-H4高表达等显著减少PFS及OS(P ＜0.05);多因素Cox模型分析提示,与Ⅰ期[5.58(95％ CI:1.27 ～24.58)]比较,Ⅳ期胃癌患者复发和死亡的HR分别为6.20(95％ CI:1.31 ～29.34);与肿瘤直径≤5 cm的患者[1.95(95％ CI:1.20 ～3.18)]比较,肿瘤直径＞5 cm的患者其为1.97(95％CI:1.19 ～3.25);相对于其他表达组,B7-H3低表达且B7-H4高表达的胃癌患者复发和死亡的HR分别为1.92(95％ CI:1.20 ～ 3.10),1.93(95％CI:1.19 ～3.10).结论 B7-H3、B7-H4不同表达水平对胃癌患者PFS和OS有显著影响.     

星状神经节阻滞治疗脑梗死36例疗效观察

目的观察星状神经节阻滞治疗脑梗死的疗效。方法36例脑梗死患者随机分为治疗组和对照组，每组18例。对照组给予神经内科护脑、脱水、降压、抗凝、抗感染以及改善微循环等药物治疗，治疗组在对照组治疗基础上加用星状神经节阻滞。结果与治疗前比较，治疗20d时两组患者的神经功能缺损程度（NFD）评分明显降低（P〈0．01），但治疗组的评分明显低于对照组（P〈0．01）；两组患者的Fugl-Meyer运动功能评定（FMA）和Barthel指数（BD明显提高（P〈0．01），但治疗组的评分明显高于对照组（P〈0．01）。结论星状神经节阻滞治疗可改善脑梗死患者的神经功能，提高患者的生活质量。     

美满霉素对阿尔茨海默病大鼠海马自噬和突触重塑的影响

目的 探讨美满霉素对阿尔茨海默病（Alzheimer's Disease, AD）大鼠自噬通路和突触重塑的作用。方法 36只雄性Sprague - Dawley大鼠随机分成对照组、模型组、美满霉素组。侧脑室注射Aβ25 - 35制作AD大鼠模型。造模结束后立即腹腔给药,美满霉素组给予美满霉素50 mg/kg,对照组和模型组同一时间点给予相同剂量的生理盐水,1次/d,连续给药2周。新物体识别实验检测大鼠物体辨别指数;水迷宫实验检测大鼠逃避潜伏期、游泳距离和穿环次数;Western blot法检测大鼠自噬通路相关蛋白微管相关蛋白l轻链3（LC3）、Beclin1蛋白表达水平变化;免疫荧光法检测突触重塑相关蛋白突触素（Syn）和脑源性神经营养因子（BDNF）表达变化。结果 与对照组比较,模型组大鼠物体辨别指数明显降低,逃避潜伏期和游泳距离明显延长,穿环次数明显减少,LC3、Beclin1、Syn和BDNF水平显著降低。与模型组比较,美满霉素组大鼠物体辨别指数明显升高,逃避潜伏期和游泳距离明显缩短,穿环次数明显增多,LC3、Beclin1、Syn和BDNF水平显著增加。结论 美满霉素可以改善Aβ25 - 35所致的AD大鼠学习记忆能力损伤,其机制可能与美满霉素上调自噬水平、调节突触重塑有关。     

毛蕊花糖苷对CUMS大鼠学习记忆能力及突触可塑性的影响

目的 观察毛蕊花糖苷（acteoside）对慢性温和不可预知应激（chronic unpredictable mild stress,CUMS）大鼠学习记忆及突触可塑性的影响。方法 采用CUMS结合孤养的方式制备抑郁模型大鼠。成模后随机分为模型组、氟西汀（20mg/kg）组、毛蕊花糖苷低（30mg/kg）剂量组和高剂量（60mg/kg）组,每组12只,另取12只正常大鼠作为对照组。连续灌胃给药3周。糖水偏好实验和强迫游泳实验检测大鼠抑郁样行为;Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力;在体电生理实验记录大鼠海马长时程增强（long-term potentiation,LTP）;免疫组织化学和免疫蛋白印迹法检测海马突触结合蛋白-1(synaptotagmin-1,Syt1) 的表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠糖水消耗率明显降低,强迫游泳不动时间明显延长,逃避潜伏期明显延长,海马LTP幅值明显降低,海马Syt1表达明显减少（P均＜0.05）;模型大鼠经毛蕊花糖苷灌胃3 w后,上述各项指标均得到有效逆转。结论 毛蕊花糖苷可能通过增加海马突触可塑性和Syt1的表达改善CUMS大鼠的学习记忆能力。     

美满霉素对阿尔茨海默病大鼠前额叶皮层CRMP-2和Caspase-3表达的影响

目的探讨美满霉素对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力及前额叶皮层脑衰反应调节蛋白(CRMP)-2和半胱天冬酶(Caspase)-3表达的影响及其对AD大鼠脑保护作用的机制。方法侧脑室注射Aβ25～35建立AD大鼠模型。48只健康雄性SD大鼠随机分成对照组、模型组和美满霉素(50 mg/kg)组,每组16只。Morris水迷宫实验检测学习记忆能力的变化,免疫组织化学方法检测前额叶皮层CRMP-2和Caspase-3的表达情况,Western印迹检测前额叶皮层CRMP-2和磷酸化(p)-CRMP-2的表达情况。结果 Morris水迷宫实验结果显示,美满霉素干预后,AD大鼠学习记忆能力明显改善;免疫组织化学法和Western印迹检测结果显示,与对照组比较,模型组前额叶皮层p-CRMP-2和Caspase-3表达明显升高,CRMP-2表达明显降低(P0.01),与模型组比较,美满霉素组前额叶皮层p-CRMP-2和Caspase-3表达明显降低,CRMP-2表达明显升高(P0.01)。结论美满霉素可能通过下调pCRMP-2和Caspase-3的表达、增加CRMP-2表达,抑制AD大鼠神经细胞凋亡,从而改善AD大鼠学习记忆能力。     

AFP-IgM复合物在肝癌中的表达与临床关系

目的 分析甲胎蛋白-IgM免疫复合物(AFP-IgM)在肝细胞癌(HCC)中的含量,探讨AFP-IgM对诊断肝癌的临床意义.方法 采用酶联免疫吸附法与电化学发光法,对103名正常人、74例肝癌、43例肝硬化和58例脂肪肝病人血清AFP-IgM与甲胎蛋白(AFP)含量检测,并分析其与临床病理特点之间的关系.结果 应用ROC曲线确定AFP-IgM和AFP的最佳切割值分别为300 Au/ml和10μg/L作为诊断学意义的临界值.在此切割值下,肝癌组AFP-IgM和AFP血清水平均高于脂肪肝组和健康体检组(P<0.05).对早期(Ⅰ与Ⅱ期)肝癌诊断时,AFP-IgM的ROC曲线下面积大于AFP(0.91 vs 0.82);当肿瘤直径≤3 cm时,AFP-IgM为(1090.4±571.8)Au/ml,而当直径>3 cm时,AFP-IgM为(604.9±749.9)Au/ml,两者比较P<0.05.且AFP-IgM在诊断小肝癌时ROC曲线下面积大于AFP(0.92 vs 0.78);AFP-IgM对性别、年龄、乙型肝炎表面抗原、肿瘤数量、包膜的相关性无统计学意义(P>0.05),而与肿块大小和分期密切相关.结论 AFP-IgM对早期(Ⅰ与Ⅱ期)肝癌和小肝癌(≤3 cm)诊断具有重要作用,且对判断肝癌的肿瘤大小与分期等具有一定的临床意义.