影响轮状病毒半数细胞感染剂量法滴定的因素分析

目的:确定影响轮状病毒感染增殖过程的因素,以提高滴度检测结果的重复性和可靠性。方法:采用半数细胞感染剂量法(CCID50)结合ELISA(CCID50-ELISA)判断病毒在细胞上有无复制来检测病毒滴度。结果:不同细胞代次、接种浓度、培养时间、培养液种类和接种细胞孔数均会对病毒滴定结果造成显著影响。结论:轮状病毒滴度检测的线性和准确性与细胞状态与培养环境相关。CCID50-ELISA法检测轮状病毒滴度有良好的重复性和耐用性。     

口服轮状病毒活疫苗病毒感染滴度测定的影响因素

[目的]对影响轮状病毒活疫苗病毒滴度测定的因素进行研究。[方法]用细胞微量病变滴定法（CCID50）结合酶联免疫吸附试验（ELISA）检测口服轮状病毒活疫苗病毒感染滴度。[结果]在疫苗滴度检测中处理疫苗所用的胰酶量，胰酶37℃处理疫苗时闻，及感染细胞培养收冻时闻均对疫苗的感染滴度产生影响。病毒滴度均随着胰酶量、温度和培养时间的增加均有先增高后降低的现象（P〈0．001），用15～20μg／ml胰酶、37℃处理疫苗50～60min，4～5d收冻为较佳试验条件。[结论]胰酶量、温度和培养时闻对口服轮状病毒活疫苗病毒感染滴度的测定结果均有不同程度的影响，在检测中要选择合适的条件，使检测结果更具有真实性，实际工作中采用20μg/ml胰酶、37℃处理疫苗50min、收冻时间为5d的组合条件进行试验。     

牛肾细胞基质牛源病毒的控制和检测

目的:检测和控制牛肾细胞基质中可能存在的外源病毒,提高细胞基质的安全性,保证轮状病毒疫苗的质量。方法:用ELISA法检测牛肾供体新生小牛血清中的病毒抗体。用细胞培养法检测供体血清和牛肾细胞中的外源病毒,免疫荧光抗体法检测供体血清和牛肾细胞中的特殊牛源病毒。结果:81份禁食禁水的新生小牛血样7种病原抗体检测均为阴性;血吸附病毒检测均为阴性,直接免疫荧光检出1例BVDV阳性。65份牛肾细胞特殊牛源病毒检测均为阴性。结论:通过对牛肾供体小牛进行病原筛选可有效降低牛肾细胞携带外源病毒的风险,也是提高疫苗安全性行之有效的策略。