人牙胚体外16 d培养模型的建立

目的建立人牙胚体外较长时间（16 d）的培养模型。方法将处于分泌前期人牙胚采用Trowell型支架培养法,应用BGJb培养基（含L-抗坏血酸200 mg/L,维甲酸1×10^-7mol/L）,37℃,5%CO2＋95%空气条件下进行培养。体外培养4、8、12、16 d后随机抽取牙胚进行常规包埋、切片染色,组织学观察。结果在培养过程中牙胚发育良好,形成明显的牙尖形态,造釉器分化为4层,在培养第16天牙尖部内釉上皮细胞出现核碎裂,牙乳头细胞之间出现裂隙。结论应用此方法能够将处于分泌前期的人牙胚在体外培养16 d。     

外科手术治疗连枷胸的临床研究

目的探讨连枷胸病例外科手术治疗的适应证、治疗时机以及治疗效果。方法选择连枷胸病例47例,其中伴复合损伤的手术组(甲组)8例、伴复合损伤的保守治疗组(乙组)10例、单纯连枷胸手术组(丙组)13例、单纯连枷胸保守治疗组(丁组)16例,比较手术治疗组与非手术治疗组的呼吸机机械通气的时间、ICU入住天数、治疗后3d疼痛指数、拔管时间、肺炎发生率、病死率等指标。结果 47例患者经7~13月(平均10.2月)随访,甲组与乙组比较,病死率两组差异无统计学意义(P>0.05),其它各指标甲组优于乙组(P<0.05);甲组与丙组比较各组指标差异均无统计学意义(P>0.05);丙组各指标优于乙组(P<0.05)。结论在伴有严重复合伤的连枷胸治疗上手术治疗效果优于同类保守治疗。在采用相同手术方法处理伴复合伤和单纯连枷胸的治疗效果无明显差别,伴复合伤的连枷胸病例在适当、有效地围手术期处理的基础上尽早安排手术治疗,疗效更佳。     

Quercetin对人气道平滑肌细胞增殖和迁移的影响及机制

目的 体外培养人气道平滑肌细胞(human airway smooth muscle cells,HASMCs),探讨槲皮素(Quercetin,Que)对血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)刺激的HASMCs增殖和迁移的影响及其机制.方法体外培养HASMCs,分为六组；对照组、PdGF-BB组、Que与PDGF-BB联合干预组、Que组、U0126组、U0126与PDGF-BB联合干预组.四甲基偶氮唑蓝(MTT)微量比色法测定HASMCs增殖,transwell法观察细胞迁移,Western blot法检测ERK的磷酸化及Cyclin D1表达水平.结果 与对照组相比,PDGF-BB(20μg/L)显著诱导HASMCs增殖和迁移(P＜0.05),Que(20～80μmol/L)呈浓度依赖性抑制PDGF-BB诱导的HASMCs的增殖和迁移(P＜0.05).PDGF-BB组ERK磷酸化及Cyclin D1 表达水平较对照组明显增高(P＜0.05).Que(80μmol/L)及PDGF-BB干预组其表达量低于PDGF-BB组,此抑制作用与ERK特异性拮抗剂U0126作用相当(P＞0.05).结论 Que抑制PDGF-BB诱导的HASMCs的增殖和迁移,可能是通过调节ERK/Cyelin D1通路起作用.     

门静脉回流的胰肾联合移植大鼠模型制备

目的 探索建立大鼠胰肾联合移植(SPK)模型的手术技巧.方法 以雄性健康近交封闭群SD大鼠作为供体,Wistar 大鼠作为受体,行整块胰肾十二指肠移植.采用供体腹主动脉和受体腹主动脉端侧吻合,供体门静脉和受体肠系膜上静脉端吻合,供体肾静脉和受体肾静脉袖套式吻合,供体输尿管膀胱瓣与受体膀胱吻合,最后将十二指肠近端结扎,远端腹壁造瘘.结果 共正式实验40例,手术成功率为85%.供体肾、胰体入受体后立即恢复良好的血液循环,移植后24h血糖、肌酐降为正常,术后移植胰腺具有内分泌功能.结论此模型切实可行,手术成功率高,术后并发症少,可用于SPK基础方面的研究.     

阿托品提高阵发性室上速电生理检查成功率(摘要)

本文观察静注阿托品能否提高 PSVT 诱发成功率并探讨其机理。对象及方法既往有典型 PSVT 临床发作吏或曾有发作时 ECG 记录的患者12例。男7例,女5例,年龄27-60(平均44.8)岁,PSVT病史4月-13年(平均4.8年)。除1例早期肺心病外,余均无任何器质性心脏病的其它症状、体征及实验室检查异常结果。12例均为近期作     

H2型松弛素对慢性支气管哮喘小鼠气道重塑与肺组织细胞周期蛋白D1表达的影响

目的 研究H2型松弛素(H2Relaxin)对慢性支气管哮喘(简称哮喘)模型小鼠气道重塑及肺组织细胞周期蛋白D1 (cyclin D1)表达的影响,探素松弛素在哮喘治疗中的可能作用.方法 将40只BALB/c小鼠按随机数字表法分为健康对照组、哮喘组、阴性对照组(vehicle)、松弛素组4组,每组10只;卵清白蛋白(OVA)致敏、激发建立慢性哮喘小鼠模型;vehicle组和松弛素组每日分别给予生理盐水和松弛素(0.25 mg·kg-1 ·d-1)皮下注射.HE和马森(Masson)染色观察各组小鼠气道炎症及胶原沉积情况;采用免疫组织化学半定量法测定气道壁α-平滑肌肌动蛋白( α-SMA)的表达;酶联免疫吸附测定( ELISA)法检测肺组织羟脯氨酸含量;用逆转录-PCR(RT-PCR)及免疫印迹法(Western blot)分别测定各组小鼠肺组织中cyclin D1mRNA和蛋白表达水平.结果 哮喘组、vehicle 组与健康对照组相比,嗜酸粒细胞浸润增多,气道管腔狭窄,平滑肌层增厚,胶原纤维增生,而松弛素组上述改变较此2组轻.与健康对照组相比,哮喘组、vehicle组小鼠支气管α-SMA阳性染色面积/支气管基底膜周径显著增加(均P ＜0.05),松弛素组小鼠支气管α-SMA阳性染色面积/支气管基底膜周径低于哮喘组和vehicle组(均P＜0.05);哮喘组和vehicle组小鼠羟脯氨酸含量[每克肺组织中分别为(0.68±0.10)mg、(0.67±0.10) mg]高于健康对照组的(0.26±0.05)mg(q值分别为16.61和16.01,均P＜0.01),松弛素组小鼠羟脯氨酸含量为(0.40±0.06)mg,低于哮喘组和vehicle组(q值分别为10.88和10.26,均P＜0.05);Western blot检测结果显示,cyclin D1在哮喘组、vehicle组和松弛素组的表达(分别为1.38±0.18、1.50±0.10和0.72±0.13)高于健康对照组的0.38±0.10(q值分别为13.00、14.65和4.49,均P＜0.05),而松弛素组表达量低于哮喘组与vehicle组(q值分别为8.51和10.16,均P＜0.05).哮喘组与vehicle组各项检测指标间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 松弛素可以显著减轻慢性哮喘小鼠气道炎症反应和平滑肌层的增厚,延缓哮喘小鼠气道重塑进程,该作用可能部分与其下调cyclin D1表达有关.     

Sunitinib对支气管哮喘气道重塑小鼠模型Erk通路和cyclin D1表达的影响

目的 探讨sunitinib对支气管哮喘(简称哮喘)气道重塑的干预作用及可能的作用机制.方法 18只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组以及sunitinib组,每组6只;以卵清蛋白(OVA)致敏、激发,建立慢性哮喘气道重塑模型.Sunitinib组每次雾化吸人前半小时给予sunitinib(40 mg/kg)灌胃给药.OVA末次激发结束后24 h处死小鼠,HE染色观察气道炎症及形态学改变,采用ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-13和血清总IgE的表达,免疫组织化学法观察肺组织增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、α平滑肌肌动蛋白(a smooth muscle actin,α SMA)表达水平.蛋白印记法(Western blot)测定细胞外信号调节蛋白激酶(extraeellular signal-regulated kinase,Erk)蛋白磷酸化水平及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达.结果 HE染色示哮喘组小鼠黏膜下层和平滑肌层增厚,管腔狭窄,大量炎性细胞浸润,sunitinib组上述改变较哮喘组为轻;sunitinib干预后哮喘小鼠BALF中Th2细胞因子IL4、IL-13和血清总IgE以及肺组织羟脯氨酸含量显著降低(P＜0.01).哮喘组小鼠气道PCNA阳性细胞百分比、α-SMA表达及肺组织Erk磷酸化水平、cyclin D1蛋白表达较对照组明显升高(P＜0.01),sunitinib干预后其表达均降低(P＜0.01).结论 Sunitinib可能通过抑制Erk途径影响cyclin D1的表达,抑制了慢性哮喘模型中气道平滑肌的增殖,发挥抗气道重塑作用.     

孕鼠肥胖对子代雄鼠早期肝脏脂肪代谢的影响和机制研究

目的探讨肥胖母鼠对子代雄鼠早期肝脏脂肪代谢的影响以及自噬所起的作用。方法采用随机数字表法将20只雌鼠分为肥胖母鼠（OM）组和普通母鼠（CM）组,每组10只。OM组雌鼠接受高脂饲料（含60%脂肪）喂养,CM组雌鼠接受普通饲料（含4%脂肪）喂养。它们的后代雄鼠被定义为OM子代鼠（OM-O）组、CM子代鼠（CM-O）组。采用油红O染色法观察两组子代雄鼠肝脏形态学的改变,ELISA法检测两组子代雄鼠血清TC、TG、HDL、LDL水平。并进一步采用RT-PCR法和Westernblot法检测肝脏组织中自噬相关基因Beclin-1、自噬相关基因3（ATG3）、自噬相关基因5（ATG5）、自噬相关基因12（ATG12）、p62及轻链3B（LC3B）的变化,免疫组化染色法检测肝脏组织中LC3B的含量。结果与CM-O组比较,OM-O组肝脏切片中脂滴形成不明显,肝脏脂滴沉积较轻;两组子代雄鼠血清TC、TG、HDL、LDL水平比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）;与CM-O组比较,OM-O组Beclin-1、LC3BmRNA表达水平均上调,p62mRNA表达水平下调,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;与CM-O组比较,OM-O组Beclin-1、ATG12、LC3B蛋白表达水平均上调,p62表达水平下调,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;OM-O组肝脏组织中LC3B的积分光密度值为2.43±1.02,高于CM-O组的0.70±0.20,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论与CM-O组比较,OM-O组早期肝脏变化相对较轻,这种母代肥胖对其子代肝脏脂肪代谢影响可能与自噬在其中发挥了一定的积极作用有关。     

不同起搏方式在高龄患者中的临床应用

目的　探讨心脏永久起搏器在高龄患者中的应用 ,并对生理性及非生理性两种起搏方式进行对比研究。方法　为 4 7例年龄≥ 75岁的高龄患者安置VVI型起搏器 2 5例 ,VDD型起搏器 3例 ,DDD型起搏器 19例。术后随访平均 3个月至 2年 ,了解患者自觉症状、生活质量、运动耐量、起搏器功能情况及测定左室射血分数 (EF)。结果　全组病例自觉症状、活动能力及生活质量均明显改善 ,起搏功能良好 ,患者平均心室率由术前的 (4 4± 11)次 /min提高到 (6 9± 16 )次 /min。生理性起搏组EF由 (5 1.7± 16 .8) %提高到 (6 2 .1± 15 .2 ) % (P <0 .0 1) ,1例发生房颤 ;非生理起搏组EF由 (4 8.5± 14 .8) %提高到 (6 0 .1± 16 .9) % (P <0 .0 1) ,2例发生房颤 ,3例出现起搏器综合征。结论　两种起搏方式均可改善高龄患者的生活质量 ,提高心室率 ,改善心功能 ,但生理性起搏可减少起搏器综合征及房颤的发生。