人Notch1受体胞内段重组腺病毒构建及转染

目的构建人Notch1受体胞内段重组腺病毒并转染人肝癌细胞株HepG2,为Notch信号对肝癌侵袭转移的影响研究奠定实验基础。方法构建Notch1受体胞内段(notch intracellular domain,NICD)基因的重组质粒pDC316-CMV-EGFP-CMV-Notch1-Myc,采用AdMax腺病毒包装系统将重组质粒与骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre共转染293细胞,同源重组产生重组腺病毒Ad-EGFP-NICD-Myc,RTPCR鉴定重组腺病毒EGFP及NICD基因表达。重组腺病毒转染人肝癌细胞株HepG2,荧光显微镜观察EGFP及NICD蛋白的表达。结果重组腺病毒Ad-EGFP-NICD-Myc经鉴定基因表达正确,此病毒转染人肝癌细胞株HepG2后阳性表达EGFP及NICD蛋白。结论人Notch1受体胞内段重组腺病毒成功构建,为进一步Notch信号对肝癌侵袭转移的影响研究奠定了实验基础。     

全髋关节置换前后不同方法评价髋关节活动能力的研究

目的探讨髋关节置换前后不同方法评价髋关节活动能力。方法实施人工全髋关节置换术患者31例,所有患者施行全髋关节置换,随访16个月,使用不同的评分表评价髋关节置换前后的得分,进行疗效评价。结果2种评价方法都显示髋关节置换术对患者具有良好的疗效。使用Harris评分评价：置换术后优26例（83．9％）,良1例（3．2％）,尚可4例（12．9％）。使用国内评分进行评价：置换术后优26例（83．9％）,良4例（12．9％）,尚可1例（3．2％）。结论在现有的医疗环境下,Harris评分更加适合国内的情况。     

脐带血间充质干细胞研究进展

随着骨髓间充质干细胞研究的不断深入,人们对间充质干细胞的生物学特性及分化能力有了进一步认识。近年来,很多学者从脐带血中分离出间充质干细胞,并且作了大量相关研究。本文总结了近年来国内外关于脐带血间充质干细胞的研究情况,对脐带血间充质干细胞的分离培养,生物学特性以及分化能力作简要综述。     

手臂和呼吸运动对上臂完全植入式输液港导管尖端位置的影响

【摘要】 目的 探讨手臂和呼吸运动对上臂完全植入式输液港（TIAP）导管尖端位置的影响。方法 DSA下超声导引穿刺上臂静脉植入TIAP。术中、术后分别将患者手臂置于不同位置,深吸气下透视确认导管尖端位置,测量X线胸片上导管尖端至上腔静脉与右心房连接处（CAJ）距离。通过不同手臂运动和呼吸状态下导管尖端位置与固定解剖学标志间长度差判断导管尖端位置是否移动。结果 83例恶性肿瘤患者成功植入上臂TIAP。76例（91.6%）手臂由外展90°转为内收位时导管尖端移位至足侧,移位长度（17.01±10.59） mm;60例（72.3%）由外展90°转为上举位时导管尖端移位至头侧,移位长度（13.47±11.49） mm;83例（100%）由外展位转为最大内收位时导管尖端均移位至足侧,移位长度（40.41±18.73） mm。外展位深吸气状态下74例（89.2%）导管尖端移位至头侧,移位长度（17.08±12.74） mm;内收位深吸气状态下79例（95.2%）导管尖端移位至头侧,移位长度（19.41±11.82） mm。配对t检验表明,手臂由外展90°转为内收位时导管尖端有向足侧移位趋势,外展90°转为上举位时有向头侧移位趋势,深吸气时有向头侧移位倾向,差异有统计学意义（均P＜0.01）。导管尖端移位程度与性别、年龄、身高、体质量/体质量指数（BMI）间差异无统计学意义（均P＞0.05）。结论 不同手臂运动和呼吸状态下,上臂植入TIAP导管尖端位置是动态可变的。手臂由外展转向内收时,导管尖端易向足侧移位,而深吸气或手臂上举位时,导管尖端易向头侧移位。手臂由外展位转为最大内收位时,导管尖端均向足侧移位。     

慢病毒介导的microRNA-21-siRNA对肝癌细胞系HepG2生物学行为的影响

目的 通过构建慢病毒介导( lentivirus,LV)的microRNA-21-siRNA,探讨下调microRNA-21对肝癌细胞系HepG2生物学行为的影响.方法 针对目标序列合成特异性siRNA干扰片段并克隆入慢病毒载体pGCSIL-GFP,将重组microRNA-21-RNAi-LV转染肝细胞癌HepG2.体外设为干扰组(microRNA-21 -siRNA,SI组)、阴性对照组(negative control,NC组)和正常组(normal,N组);分别采用聚合酶链反应方法检测microRNA-21目的基因的表达的情况;用噻唑蓝比色法检测增殖情况、transwell小室迁移实验检测迁移情况、Hochest33258凋亡实验检测凋亡情况.体内实验设为SI组和NC组,观察反义microRNA-21对裸鼠移植瘤生长的影响.结果 (1)micmRNA-21 -RNAi-LV可显著降低microRNA-21的表达.(2) MTT实验96h后SI组增殖能力显著低于NC组和N组(P=0.0031,P＜0.05).(3)迁移能力减弱(P =0.0004,P＜0.05).(4)SI组细胞凋亡明显增加,促凋亡基因caspase3基因表达上调(P =0.0002,P＜0.05).(5)各组裸鼠皮下肿瘤生长比较差异无统计学意义(P=0.0624,P＞0.05).结论 microRNA-21 -siRNA通过抑制microRNA-21的表达抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,降低其迁移能力.     

同种异体骨髓间充质干细胞保护大鼠肝脏热缺血再灌注损伤的研究

目的探讨同种异体骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)对大鼠肝脏热缺血再灌注损伤的保护作用。方法取10只健康Wistar大鼠骨髓,体外分离、培养间充质干细胞,对其进行生物学鉴定,并对门静脉途径移植入肝脏的间充质干细胞行4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)染色示踪。建立大鼠70%肝脏缺血再灌注损伤模型,将32只雄性Wistar大鼠随机分成假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、维生素C治疗组(VC组)及BM-MSCs组,每组8只,分别于再灌注24 h后取材,检测血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,肝脏组织总超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量,并对肝脏组织行HE染色观察病理学改变,TUNEL法检测肝脏凋亡指数(AI)。结果体外分离的BM-MSCs生长稳定,增殖旺盛,表达CD29及CD44,不表达CD34及CD45;大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型稳定,在肝脏组织切片内见间充质干细胞定植,多位于肝小叶中央静脉周围。VC组和BM-MSCs组的AST、ALT、MDA和AI均较I/R组低(P<0.05),SOD均较I/R组高(P<0.05);BM-MSCs组的AST、ALT、MDA和AI均低于VC组(P<0.05),SOD高于VC组(P<0.05)。结论 BM-MSCs可通过减轻氧化应激损伤和抑制肝细胞凋亡,来保护大鼠肝脏热缺血再灌注损伤。     

骨髓间充质干细胞移植修复大鼠肝缺血再灌注损伤最佳剂量的研究

目的探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植修复大鼠肝缺血再灌注损伤的最佳剂量,为细胞移植修复肝缺血再灌注损伤提供前期的实验依据。方法采用全骨髓直接贴壁法分离培养BMSCs,取第4代细胞进行移植。将30只健康雄性Wistar大鼠建立肝缺血再灌注损伤模型后,随机分成空白对照组、5×10^5个组、1×10^6个组、2×10^6个组及3×10^6个组5组,每组6只。后4组大鼠均在建立肝缺血再灌注损伤模型后,立即抽取200μL细胞悬液（数量分别为5×10^5、1×10^6、2×10^6及3×10^6个）,通过门静脉注射;空白对照组大鼠注射等体积的PBS溶液。于移植术后24h采血检测血清天门冬氨酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平;取肝脏组织检测阿二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性及核因子-κB（NF-κB）p65蛋白的表达,并行HE染色。结果1×10^6个组和2×10^6个组与空白对照组、5×10^5个组及3×10^6个组比较,其AST、ALT及MDA水平均降低（P〈0．05）,而SOD活性均增高（P〈0．05）;NF-κBp65蛋白的表达均明显下调;肝组织的病理学损伤均改善。但该2组的AST、ALT、MDA及SOD水平比较差异均无统计学意义（P〉0．05）,且肝组织的病理学改变也无明显差别。结论大鼠BMSCs移植治疗肝缺血再灌注损伤的最佳剂量为1×10^6个细胞。     

开放式MR引导下经皮胰腺占位性病变粗针穿刺活检的临床应用北大核心CSCD

目的探讨光学导航辅助0.4T开放式MR引导下胰腺占位性病变经皮粗针穿刺活检的安全性和有效性。方法回顾性分析2019年1月至2021年1月116例行胰腺穿刺活检患者的临床资料。术前增强CT或MRI评估,根据术前是否行PET-CT检查分为2组,行PET-CT检查组56例,未行PETCT检查组60例。0.4T开放式磁共振成像仪结合光学导航仪系统,采用17 G同轴穿刺针和18 G全自动活检枪行胰腺肿瘤穿刺活检术。术后送病理检查,记录腹痛、出血等并发症,通过手术或临床随访至少6个月确定最终诊断。结果所有病例准确穿刺至拟定靶点,一次成功率为100%,准确率为96.6%。3例发生穿刺后腹痛,2例出现腹腔出血,并发症发生率为4.2%。术前有PET-CT组的准确率和并发症率分别为98.3%和3.4%,无PET-CT组准确率和并发症率分别为94.6%和5.0%(P>0.05)。结论磁共振导航引导下胰腺占位性病变粗针穿刺活检术准确、安全,是一项值得推广的临床技术。     

脐带血间充质干细胞研究进展

随着骨髓间充质干细胞研究的不断深入,人们对间充质干细胞的生物学特性及分化能力有了进一步认识.近年来,很多学者从脐带血中分离出间充质干细胞,并且作了大量相关研究.本文总结了近年来国内外关于脐带血间充质干细胞的研究情况,对脐带血间充质干细胞的分离培养,生物学特性以及分化能力作简要综述.