松果菊苷对帕金森病模型大鼠中脑超微结构的影响

目的:观察松果菊苷对帕金森病(PD)模型大鼠中脑超微结构的影响.方法:将健康SD大鼠随机分为对照组、模型组和松果菊苷组,每组10只.对照组用生理盐水灌胃,模型组和松果菊苷组大鼠造模后,分别用生理盐水和2 mg/mL的松果菊苷水溶液灌胃,每天1次,连续14 d.灌胃结束后,采集各组大鼠中脑,制作超薄切片,在7000倍和50000倍电镜下观察并比较各组大鼠中脑神经细胞超微结构的差异.结果:对照组中脑神经细胞结构清晰,核膜光滑、完整,核内染色质分布均匀;线粒体数量较多,形态规则,双层膜结构、线粒体嵴结构清晰.与对照组比较,模型组的神经细胞胞体缩小,核染色质边聚;线粒体数量减少,双层膜结构不清,线粒体嵴排列紊乱.松果菊苷组与模型组比较,神经细胞胞体大小有所恢复,核染色质边集现象有所缓解;线粒体数量增加,双层膜结构清晰,线粒体嵴排列相对规律,形态基本正常.结论:松果菊苷能改善PD模型大鼠中脑神经细胞凋亡的超微结构,这一结果可能与缓解神经细胞线粒体功能障碍有关.     

跑台运动训练对脑缺血大鼠TGF-β1/Smad3通路蛋白表达及细胞凋亡的影响

目的 观察跑台运动训练对脑缺血大鼠脑缺血周边区组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）及其受体Smad3蛋白表达水平及细胞凋亡的影响,探讨跑台运动训练促进大鼠脑缺血后神经功能恢复的相关机制。 方法 取成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠30只,按随机数字表法分为假手术组（n=6）、模型组（n=12）和运动组（n=12）。模型组和运动组大鼠采用改良的Longa线栓法制备大脑中动脉闭塞(MCAO)脑缺血动物模型,假手术组大鼠手术方法同模型组和运动组,但是不插入线栓。运动组于造模成功后24 h采用跑台训练仪进行跑台运动训练,其余2组则不进行运动训练。采用修正的神经功能缺损评分方法(mNSS)评价模型组和运动组大鼠造模后第3天、7天及14天的神经功能,并于造模后14 d断头取脑。采用Western blot法检测脑缺血周边区组织中TGF-β1及Smad3蛋白的表达情况,采用TUNEL法检测脑缺血周边区组织中细胞凋亡情况。 结果 造模后第7、14天,运动组的mNSS评分分别为(7.06±0.79)分和(6.33±1.15)分,分别于模型组同时间点比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);运动组大鼠的TGF-β1及Smad3蛋白表达均较模型组明显增加,差异具有统计学意义(P<0.01);运动组大鼠脑缺血周边区TUNEL染色阳性细胞较模型组明显减少,差异具有统计学意义(P<0.01)。 结论 跑台运动训练能够促进脑缺血后大鼠神经功能恢复,其机制可能与上调脑缺血周边区组织中TGF-β1/Smad3蛋白表达,进而抑制细胞凋亡有关。     

白介素-12抑瘤机制及其在黑色素瘤治疗中的应用

IL-12是一种多功能的细胞因子。主要介导细胞免疫,在诱导Th1型细胞的分化中发挥重要调节作用;促进IFN-γ的分泌使NK细胞、T细胞大量增殖并增强其细胞毒性。其免疫调节及抗血管生成作用而被认为是一种强有力的抗癌剂。因其显著的抗肿瘤及抑制转移活性在黑色素瘤治疗中发挥了强大的作用。     

沙培林联合肿瘤冻融抗原刺激的小鼠骨髓源性树突状细胞瘤苗的抗胃癌效应

目的:观察沙培林(OK-432)对小鼠骨髓源性树突状细胞(DCs)功能的影响,及由此产生的DCs对荷胃癌小鼠的抗癌效应.方法:OK-432联合肿瘤冻融抗原诱导小鼠骨髓源性DCs,ELISA法检测DCs分泌白介素12(IL-12)水平.建立荷胃癌小鼠模型,尾静脉注射DCs,观察其对肿瘤生长的抑制作用,RT-PCR法检测移植瘤IL-12mRNA表达情况,ELISA法检测移植瘤IL-12蛋白表达情况,免疫组织化学法检测移植瘤血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达情况.结果:OK-432联合肿瘤冻融抗原促进DCs分泌IL-12.OK-432联合肿瘤冻融抗原刺激的DCs抑制移植瘤生长,促进移植瘤IL-12mRNA和IL-12蛋白表达,抑制移植瘤VEGF蛋白表达.结论:OK-432联合肿瘤冻融抗原刺激能有效增强DCs瘤苗的抑瘤效应,其机制可能与纠正肿瘤组织免疫缺陷,促进肿瘤组织表达IL-12和抑制肿瘤组织表达VEGF有关.     

溶血性链球菌制剂OK432联合肿瘤冻融抗原诱导小鼠骨髓树突状细胞的成熟

目的 探讨溶血性链球菌制剂(OK432)联合肿瘤冻融抗原诱导小鼠骨髓树突状细胞(DCs)成熟的作用,改进体外诱导DCs成熟的方案,为后期制备临床使用的抗肿瘤DCs疫苗提供新的技术路线.方法 分离小鼠骨髓单核细胞(BMMCs),并在含10%胎牛血清(FCS)、重组小鼠粒-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)、重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)的培养体系中诱导培养,部分加入OK432和/或肿瘤冻融抗原冲击,光镜和透射电镜下观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞表面分子CD83和CD86的表达情况.结果 经OK432联合肿瘤细胞冻融抗原冲击的DCs形态学特征典型.肿瘤冻融抗原冲击后,DCs表面CD83和CD86的表达上调,OK432进一步刺激后,CD83和CD86的表达率显著升高.结论 采用OK432联合肿瘤冻融抗原诱导DCs成熟的方案相对简便;OK432能有效促进肿瘤冻融抗原冲击后的骨髓DCs进一步成熟.     

溶血性链球菌制剂OK-432联合肿瘤冻融抗原诱导的树突状细胞瘤苗对小鼠前胃癌的抑瘤作用

目的观察溶血性链球菌制剂（OK-432）联合肿瘤冻融抗原诱导的树突状细胞（DCs）瘤苗对小鼠前胃癌的体内抑瘤作用。方法分离小鼠骨髓单个核细胞（BMMCs）,并在含10%胎牛血清、重组小鼠粒-巨噬细胞集落刺激因子（rmGM-CSF）、重组小鼠白细胞介素-4（rmIL-4）的培养体系中诱导培养,部分加入肿瘤冻融抗原和/或OK-432冲击,透射电镜下观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞表面抗原CD83和CD86的表达情况。建立小鼠前胃癌移植瘤模型,随机分4组,分别从小鼠尾静脉注射磷酸盐缓冲液（PBS对照组）、未经肿瘤冻融抗原刺激的DCs（BM-DCs组）、经肿瘤冻融抗原刺激的DCs（TL-DCs组）和经OK-432联合肿瘤冻融抗原诱导的DCs（OK-DCs组）,观察各组小鼠肿瘤体积及质量,并计算抑瘤率。结果于培养的第7天收集各组的DCs,OK-DCs呈典型成熟形态,其表面CD83和CD86的表达率高于BMMCs、BM-DCs、TL-DCs。体内实验显示,OK-DCs组移植瘤生长缓慢,瘤体积和质量均显著小于PBS对照组、BM-DCs组、TL-DCs组,体内抑瘤率为55.32%。结论 OK-432联合肿瘤冻融抗原诱导DCs成熟的方案制备的DCs瘤苗可明显抑制荷瘤小鼠前胃癌的生长。     

MyD88在OK-432诱导树突状细胞成熟中的作用

目的探讨小鼠骨髓树突状细胞（Dcs）髓性分化蛋白88（MyD88）在OK-432诱导DCs成熟中的作用机制。方法分离小鼠骨髓单核细胞（BMMCs）,在含10％胎牛血清、重组小鼠粒-巨噬细胞集落刺激因子（rmGM-CSF）、重组小鼠白细胞介素-4（rmIL-4）的培养体系中诱导培养,所得的细胞即为DCs。于培养的第5天,将细胞分为3组：对照组不加OK-432和MyD88siRNAOK-432组加入终浓度为5μg／mL的OK-432;RNA干扰组加入MyD88siRNA12h后,再加入5μg／mLOK-432刺激。半定量RT-PCR法检测DCs中MyD88的表达;ELISA法检测各组DCs分泌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和IL-12的能力;MTT法检测DCs体外刺激同种混合淋巴细胞增殖的免疫活性。结果OK-432组DCs的MyD88高表达、TNF-α和IL-12释放明显增加并能诱导较强混合淋巴细胞反应,而用MyD88siRNA干扰后以上效应均降低（P〈0．05）。结论靶向MyD88siRNA可明显抑制小鼠DCs中MyD88的表达和OK-432诱导的DCs成熟,表明MyD88介导OK-432诱导的DCs成熟。     

苁蓉舒痉颗粒对帕金森病模型大鼠中脑线粒体氧化应激及自噬相关SIRT1/FoxO通路的影响

目的 探讨苁蓉舒痉颗粒对帕金森病(PD)线粒体氧化应激及自噬相关SIRT1/FoxO通路的影响.方法 采用软件随机数字法将27只健康SD大鼠分为正常组9只、造模组18只,造模组采用颈背部皮下注射鱼藤酮葵花油乳化液建立PD模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组和治疗组各9只,治疗组予苁蓉舒痉颗粒溶液灌胃,正常组、模型组予等...     

基于探究式学习与过程管理的《病理生理学》CPBL教学探讨

笔者基于建构主义教学理念，以促进学生自主探究式学习为目标，确立“全员参与、过程把控、深入讨论、拓展思维”的指导思想，采取线下小组探究式学习、课内答辩点评为主，线上师生互动、督学促学为辅的混合式教学模式，在我校2017级临床医学专业开展《病理生理学》CPBL教学，并强化过程管理，对资料查阅和小组讨论这两个关键环节进行有效监管。结果表明该CPBL教学模式能激发学生主动探索、构建知识的热情，促进学生自主学习和临床思维培养，提高教学有效性。     

基于探究式学习与过程管理的《病理生理学》CPBL教学实践研究

本研究基于建构主义教学理念，以促进学生自主探究式学习与临床思维培养为目标，确立“全员参与、过程把控、深入讨论、拓展思维”的指导思想，采取“线下小组探究式学习、课内答辩点评为主，线上师生互动、督学促学为辅”的混合式教学模式。在本校2017级临床医学专业开展《病理生理学》以病例-问题为基础的教学（case-problem based learning，CPBL）教学，并强化过程管理，对资料查阅和小组讨论这两个关键环节进行有效的过程管理。通过对学期结束时收回的176份教学评价的分析，结果表明，在CPBL教学总体评价方面，92.05% （162人）以上学生对教学目标、组织、案例及个人收获评价较高，持非常赞同、比较赞同的态度；对“时间分配恰当”负面反馈较多，有11.93%（21人）的学生持比较不赞同、非常不赞同的态度；另外84.66% （149人）以上学生“觉得很累”。在教学效果评价方面，超过85.23%（150人）的学生非常赞同或比较赞同CPBL教学能够帮助专业知识理解、激发学习积极性和主动性、提高处理问题能力、联系临床培养临床思维、督学促学、增强团队合作与师生交流等。对教师的评价方面，超过94.89%（167人）学生认为教师教学严谨负责又有热忱，重视过程管理，有效引导与思维启发都做得比较好（非常赞同、比较赞同）。上述结果提示，本次《病理生理学》CPBL教学改革立足于过程管理，能有效促进学生深度自主探究式学习，促进临床思维培养，提高教学有效性，但在教学安排、时间分配方面有待改进。