丙氨酸氨基转移酶质控物的研制及应用价值

目的　制备丙氨酸氨基转移酶 (ALT)质控物 ,评价其性能和应用前景。方法　大鼠肝组织经抽提、离心、热处理、(NH4) 2 SO4沉淀 ,透析处理制成 ALT质控材料 ,以荧光动力学法测定其活性。结果　每克组织制备的 ALT活性为 2～ 3.5单位 ,质控物参考定值为 (5 0 .4± 2 .0 7) U/L。精密度 :最佳条件的变异(OCV)为 4.7% ,常规条件的变异 (RCV)为 6.8%。- 2 0℃保存一年 ,ALT活性基本无变化。结论　AL T质控物稳定可靠 (一年 ) ,能用于临床室内质量控制 (IQC)。     

Zn~(2+)—SCN~-—罗丹明B荧光熄灭法测定头发及指甲中微量锌

本文研究了不经萃取分离,在阿拉伯树胶存在下,硫氰酸锌—罗丹明B离子缔合物水相荧光熄灭法测定微量锌的实验方法。试验了该法的最佳实验条件和共存离子的影响,线性范围0.05～0.5μg/25ml,CV≤5.2％,回收范围为92～102％,与原子吸收法比较,无显著差异,可用于头发及指甲中微量锌的测定。     

1,5-脱水葡萄糖醇的测定与应用

1 ,5 脱水葡萄糖醇 (1,5 ａｎｈｙｄｒｏｇｌｕｃｉｔｏｌ,1,5 ＡＧ) ,又叫 2 脱氧葡萄糖 ,1,5 脱水山梨醇。 1975年Ｓｅｒｖｏ〔1〕在脑脊液及血清中观察 1,5 ＡＧ与糖尿病之间具有相关性。 1994年Ｆｕｋｕｍｕｒａ等〔2〕介绍全酶法测定体液中 1,5 ＡＧ含量。本研究探讨在临床常规中开展全酶法的实验条件 ,观察糖尿病患者和糖尿病动物模型血清中 1,5 ＡＧ与葡萄糖水平变化之间的相关性。一、材料和方法1.材料 :葡萄糖激酶 (ＧＫ) ,己糖激酶 (ＨＫ) ,丙酮酸激酶(ＰＫ) ,维生素Ｃ氧化酶 ,磷酸烯醇式丙酮酸 (ＰＥＰ) ,1,5 ＡＧ均购…     

固相微萃取气相色谱联用技术在环境卫生检验中的应用

目前 ,随着分析仪器的不断发展 ,分析工作者对分析过程中较落后的样品预处理技术进行了广泛深入的研究。固相微萃取 (Solid- phase Microextraction,SPME)就是一种极具吸引力的绿色化学样品预处理技术 ,1989年由加拿大Pawliszyn研究小组〔1〕首创。自 1993年 SPME装置由 Supel-co公司商品化以来 ,该技术得到了迅猛的发展 ,与气相色谱联用 (SPME- GC)已在环境卫生检验中有着较广泛的应用。有关 SPME方法的理论、应用和发展已为许多国内外学者报道 〔2 ,3〕,本文仅对其装置、原理、操作和特点作一简介 ,而着重介绍该技术在环境卫生检…     

酶偶联放大法测定血清总胆汁酸

目的　建立简便的酶偶联放大法 ,直接检测血清总胆汁酸 (TBA)。方法　基于脱氢酶 辅酶体系的原理 ,用丙酮酸钠作乳酸脱氢酶 (LDH)的阻止剂 ,在Tris HCl缓冲溶液中 ,由NAD -NBT -Brij 98组成酶偶联放大系统。用自动生化分析仪测定血清TBA。结果　线性范围 :0～ 180 μmol/L ;精密度 :批内CV <2 .7% ,日间CV <4 .3% ,总CV <5 .4 %。与日本ENZABILE .AUTO(X)比较 :r =0 .990 ,Y =1.114X - 2 .137,与朗道BILEACIDS(Z)比较 :r =0 .997,Y =1.0 32Z 0 .90 6。LDH <3kU/L ,乳酸 <2 0mmol/L ,维生素C <0 .5mmol/L ,胆红素 <30 0 μmol/L ,血红蛋白 <5g/L时 ,对结果无显著干扰。 结论　该法简便、灵敏 ,试剂稳定 ,适用于血清TBA的常规和自动分析     

荧光分析法动态观察丙氨酸氨基转移酶活性的研究

NADH2具有散发荧光特性,反应中NADH2量的变化可以用荧光分析法来监测.利用丙氨酸氨基转移酶(ALT)酶偶联反应发生NADH2量的变化这一原理建立荧光分析法动态监测ALT活性.结果表明ALT荧光分析法严格控制实验测定条件,其准确度、精密度、灵敏度高,特异性好,试剂、样品耗量少.并对荧光分析法动态观察ALT活性的测定条件、活性计算、方法学评价作较详细的研究.     

酶偶联放大法测定血清总胆汁酸

目的建立简便的酶偶联放大法,直接检测血清总胆汁酸(TBA).方法基于脱氢酶-辅酶体系的原理,用丙酮酸钠作乳酸脱氢酶(LDH)的阻止剂,在Tris-HCl缓冲溶液中,由NAD+-NBT-Brij-98组成酶偶联放大系统.用自动生化分析仪测定血清TBA.结果线性范围0～180μmol/L;精密度批内CV＜2.7%,日间CV＜4.3%,总CV＜5.4%.与日本ENZABILE.AUTO(X)比较r=0.990,Y=1.114X-2.137,与朗道BILEACIDS(Z)比较r=0.997,Y=1.032Z+0.906.LDH＜3 kU/L,乳酸＜20 mmol/L,维生素C＜0.5 mmol/L,胆红素＜300μmol/L,血红蛋白＜5 g/L时,对结果无显著干扰.结论该法简便、灵敏,试剂稳定,适用于血清TBA的常规和自动分析.     

荧光熄灭法测定生物材料中微量锌

以碱性染料为显色剂的离子缔合物体系具有极高的灵敏度 ,广泛用于金属离子的比色法测定〔1,2〕。本文在文献〔1〕基础上 ,利用碱性染料罗丹明Ｂ的荧光特性 (λＥＭ=5 78ｎｍ) ,建立荧光法测定生物材料中微量锌。当罗丹明Ｂ与硫氰酸锌形成离子缔合物后 (Ｚｎ2 + -ＳＣＮ--ＲｈＢ) ,最大荧光峰位不变 ,荧光定量猝灭 ,其荧光熄灭程度与锌含量成正比。本文研究了在阿拉伯胶存在下水相荧光熄灭法测定锌的最佳条件 ,线性范围为 (0 0 5～ 0 5 ) μｇ/ 2 5ｍｌ。1　实验部分1 1　主要仪器与试剂　ＲＦ - 5 10荧光分光光度计 (日本岛津 ) ;ＡＡ - 6…