关于药学类高校开放实验室建设与发展的思考

开放实验室是药学类高校进行实验教学改革的重要组成部分,对提高本科毕业生的综合素质和专业技能有着重要作用。本文从药学开放实验室的意义、模式、要求和存在问题等几个方面探讨了药学类高校开放实验室建设与发展的问题。以期能和各位同行相互学习讨论,使得药学开放实验室工作能够更好地开展下去。     

不同miR-146a表达条件下Treg细胞体内回输对小鼠心脏移植免疫排斥反应的影响

目的:本研究探讨调控miR-146a Treg细胞体内回输对小鼠心脏移植免疫排斥反应的影响。方法:流式分选Treg细胞并进行体外扩增。转染试剂分别上调和下调Treg miR-146a表达。建立小鼠心脏移植模型,设立对照组,空白Treg组,miR-146a上调组,miR-146a下调组。移植后回输Treg,观察生存曲线,病理分级,测定受体脾T细胞亚群,RT-PCR检测供心IFN-γ、IL-4、IL-17表达。结果:细胞扩增10倍后miR-146a表达无明显变化,并能有效调控miR-146a表达。回输后空白Treg组（中位生存期11 d）及上调组（中位生存期13 d）生存时间延长,病理分级降低（P<0.05）;上调组更为明显（P<0.05）;下调组（中位生存期7 d）生存时间缩短,病理分级升高（P<0.05）,Th1细胞数量（28.6%±2.7%）及供心IFN-γ表达（1.12±0.11）升高（P<0.05）。结论:体外能有效地分选和扩增Treg细胞,并保证miR-146a的表达。回输Treg明显抑制小鼠心脏移植急性排斥反应,上调组抑制功能增强,下调组抑制功能减弱。     

不同浓度131I-ELP近距离放射治疗兔VX2肝癌模型的实验研究

背景近距离放射治疗是治疗癌症的靶向放射疗法,类弹性蛋白多肽(elastin-like peptide, ELP)是一种人工合成的弹性蛋白,其具有的自组装性、温度响应性和非免疫原性等独特优势,为其成为放射性核素~(131)I的载体提供了可能.目的制备放射性核素~(131)I标记的ELP,研究不同放射性浓度~(131)I-ELP对兔VX2肝癌模型近距离放射治疗的有效性及差异性,为其临床应用提供依据.方法应用Iodogen法对ELP进行~(131)I碘化标记,制备100 mCi/mL和50 mCi/mL放射浓度的~(131)I-ELP;在B超引导下将不同浓度~(131)I-ELP药物及ELP溶液随机注入15只VX2模型兔的肝肿瘤内进行近距离放射性治疗及空白对照观察,以注入100 m Ci/mL ~(131)I-ELP为高放射浓度治疗组(H组, n=5);注入50 mCi/mL ~(131)I-ELP为低放射浓度治疗组(L组, n=5)及注入ELP溶液为空白对照组(C组, n=5).治疗后,定期行B超及血液学检查以观察治疗效果,治疗组行单光子发射计算机断层扫描/计算机断层扫描(single-photon emission computed tomography/computedtomography,SPECT/CT)检查,观察三组动物的自然生存时间和病理学检查.结果 H组的动物生存期最长(61.4d±10.50d),L组的动物生存期为(52.6 d±8.85 d), C组的动物生存期最短(39.2d±5.63d),三组之间有显著差异(P 0.05).治疗后7 d、14 d, SPECT/CT示治疗组的放射性持续位于肿瘤内部.H和L组的肿瘤生长率显著低于C组(P 0.05).H和L组治疗后7 d、14 d肝功能指标丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)显著低于C组(P0.05),治疗后7 d L组的ALT水平显著低于H组(P 0.05);治疗后14d,L组AST数值显著低于H组(P 0.05),提示H组的肝功能受损更严重.治疗后7 d、14 d三组Hb、RBC计数无显著差异.病理组织学检查示H组癌旁正常肝组织存在小叶中央静脉淤血、肝窦及汇管区小胆管扩张、肝内纤维增生,在肿瘤组织内发现大片状坏死.L组的癌旁正常组织则仅见少量纤维增生.结论 ~(131)I-ELP近距离放射疗法可杀伤肝癌细胞,放射性浓度为100 mCi/mL的~(131)I-ELP较50mCi/mL的杀伤作用更强,但其放射性损伤也更大.     

Twist基因对结肠癌细胞系侵袭转移能力影响的体外研究

目的 :探讨Twist基因在SW480、HCT116和HT29结肠癌细胞系上皮-间质转化（EMT）中的作用,明确其对恶性肿瘤侵袭转移能力的影响。方法:利用重组质粒pTracer-CMV/BSD-Twist 和pGenesil1.2-Twist-shRNA转染SW480、HT29和HCT116;流式细胞术检测转染率;Real time-PCR和Western blot检测Twist,E-cadherin和Vimentin转录及蛋白表达水平;Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果:转染高表达Twist质粒后,各结肠癌细胞系中Twist和Vimentin表达水平显著升高（P<0.05）,E-cadherin显著降低（P<0.05）;转染低表达Twist质粒后,SW480和HT29中各指标均无显著变化（P>0.05）,HCT116中Twist 和Vimentin表达水平显著降低（P<0.05）,E-cadherin无显著变化（P>0.05）;Transwell实验表明抑制HCT116细胞系Twist表达后,其侵袭和迁移能力明显减弱（P<0.01）。结论:上调Twist表达可以促进EMT;抑制HCT116 中Twist表达能减弱结肠癌细胞的侵袭和转移能力。     

CYP27A1在肿瘤进程中的作用研究进展

CYP27A1是细胞色素P450 27亚族的成员之一,存在于多种组织的线粒体内,其主要功能是通过经典通路和酸性通路催化胆汁酸合成过程中的羟化、维持体内胆汁酸的平衡,催化维生素D3的生物活化.CYP27A1与多种肿瘤的形成密切相关,如乳腺癌、前列腺癌、结肠直肠癌以及肝癌等,本文总结了CYP27A1在3种常见肿瘤中的作用,以期为肿瘤发生机制研究奠定基础.