紫杉醇及其联合用药抗肿瘤的研究进展

紫杉醇是一种从天然短叶红豆杉树皮中提取分离得到的四环二萜类有机化合物,因其具有特殊的抗癌机制,被称为癌症治疗的重大进展之一.本文综述了紫杉醇的研究历史、作用机制及其与其他抗肿瘤药物联合作用情况,旨在为肿瘤的临床治疗提供新的方向.     

小切口剜除面部皮脂腺囊肿的治疗体会

目的对利用小切口剜除术治疗面部皮脂腺囊肿进行探讨和完善。方法对36例利用小切口剜除术治疗面部皮脂腺囊肿的过程和结果进行总结,特别是病情异常时的处理,分析术式选择原因和优缺点。结果 9例患者均取得预期疗效,至今未追踪到复发病例,丰富了对于病情异常患者的颌骨囊肿的手术方法。结论小切口剜除术治疗面部皮脂腺囊肿手术效果好,易于被患者接受,是传统术式的很好的补充,有必要推广。     

PCR-核酸试纸条检测方法鉴别蛤蚧真伪

目的:蛤蚧为我国的名贵中药材,建立PCR-核酸试纸条检测方法对蛤蚧进行定性鉴别。方法:通过碱裂解法提取蛤蚧及其伪品的基因组DNA,以蛤蚧细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(CoⅠ)为靶基因,设计特异性引物,确定合适的PCR-核酸试纸条反应体系以及反应条件。结果:通过PCR-核酸试纸条对蛤蚧进行定性分析,正品蛤蚧在PCR-核酸试纸条上均出现2条带,伪品以及阴性对照均出现1条带。结论:PCR-核酸试纸条检测方法可实现短时间内蛤蚧可视化检测,操作方便,结果准确,可以为蛤蚧的DNA分子鉴别提供技术保障。     

RNAi沉默survivin和HIF-1α基因对胃癌BGC-823细胞体外增殖和凋亡的影响

目的：应用RNA干扰（RNAi）技术抑制胃癌BGC-823细胞中survivin和HIF-1α基因的表达,探讨其对胃癌BGC-823细胞增殖和凋亡的影响。方法：分别设计并合成经过化学修饰的靶向survivin和HIF1α mRNA的小干扰RNA （siRNAs）,同时合成错义RNA （SCR）,采用HifectinⅡ真核体外转染胃癌BGC-823细胞,将转染siRNA-survivin、siRNA-HIF-1α和SCR的各组细胞分别命名为sis组、siH组和SCR组,同时设空白对照组（无血清培养基）,RT-PCR法检测各组细胞中survivin和HIF-1αmRNA表达水平。将胃癌BGC-823细胞分为单干扰组（survivin-siRNA,sis组）、联合干扰组（survivin-siRNA+HIF1α-siRNA,sis+siH组）、非靶向特异性组（SCR组）和空白对照组（无血清培养基）,MTT法检测各组细胞增殖活性,Western blotting法检测各组细胞中survivin和HIF-1α蛋白表达水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果：与空白对照组比较,sis组细胞中survivin mRNA表达水平和siH组细胞中HIF-1αmRNA表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）。与空白对照组比较,SCR组细胞增殖活性无明显变化（P>0.05）,sis组和sis+siH组细胞增殖活性明显降低（P<0.05）;与sis组比较,sis+siH组细胞增殖活性明显降低（P<0.05）。与空白对照组比较,sis+siH组细胞中surviving和HIF-1α蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,细胞凋亡率明显升高（P<0.01）。结论：联合靶向沉默survivin和HIF-1α基因可下调靶基因的表达,抑制胃癌BGC-823细胞增殖,促进细胞凋亡,RNAi基因沉默技术有望成为治疗胃癌的新方法。     

应用纳洛酮治疗早产儿原发性呼吸暂停治疗体会

呼吸暂停（AOP）：指呼吸停止时间〉20秒，常伴有心事减慢≤100次／分，或出现青紫、肌张力低下，是早产儿常见症状之一。其原因与中枢神经系统结构及功能不健全、呼吸控制系统失调有关。2003年1月～2004年10月我院收治早产儿原发性AOP50例，应用纳洛酮治疗30例，疗效显著，报告如下。     

重组人IL-17A在胃癌组织中的表达及其对胃癌BGC-823细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响

检测人白细胞介素17A（IL-17A）重组蛋白在人胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。     

PRDX6过表达对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其分子机制

探讨过表达过氧化物氧化还原蛋白6（PRDX6）基因对肝细胞癌增殖、侵袭和迁移的影响,并阐明其可能的作用机制。     

特异性干扰survivin 基因表达对人舌癌Tca8113 细胞体外增殖和侵袭性的影响

目的：探讨应用RNAi技术特异性沉默survivin基因表达对人舌癌细胞Tca8113增殖、凋亡、迁移的影响,阐明survivin在Tca8113细胞生物学行为中的作用。方法：取对数生长期的Tca8113细胞,分为干扰组、阴性对照组及空白对照组。采用RT-PCR和Western blot方法检测Tca8113细胞中survivin基因的mRNA及蛋白的表达水平;MTT法检测细胞的增殖状况;流式细胞术检测各组Tca8113细胞凋亡率;划痕实验检测Tca8113细胞的迁移状况。结果：RT-PCR 显示舌癌Tca8113细胞中survivin的mRNA表达水平明显低于空白对照组 (P<0.05),Western blot 蛋白免疫印迹结果显示,与空白对照组比较,survivin蛋白表达水平减少(P<0.05)。survivin干扰组Tca8113细胞的增殖能力降低（P<0.05）;细胞划痕实验发现转染Tca8113细胞48 h 后干扰组细胞的迁移距离明显短于空白对照组( P<0.05)。结论：特异性沉默siRNA-survivin的表达可有效抑制舌癌Tca8113细胞的体外迁移能力,可能与survivin表达减少有关,有望成为口腔舌癌生物治疗的潜在靶点。     

微滴式数字聚合酶链反应检测金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌

目的 采用微滴式数字聚合酶链式反应(ddPCR)技术快速检测饲料中金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌,以满足对猪饲料中病原体精准检测需求.方法 通过已建立的荧光定量PCR方法中引物和探针,建立优化ddPCR条件,梯度稀释质粒,进行特异性、敏感性、重复性实验以及市售10种样品的本底检测.结果ddPCR法检测金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌具有良好的特异性,最低可检测到88 copies/μL,SD为19.7,RSD为2.03％.稳定性测试组间RSD小于6.5％.结论 ddPCR 法特异性好,灵敏性较强,具有良好的重复性,可以作为分子生物学方法来诊断饲料中金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌.     

幽门螺杆菌Cag致病岛hp0527基因的缺失株构建和鉴定

目的:构建幽门螺杆菌(H.pylori)Cag致病岛编码hp0527基因的突变株.为Cag致病岛致病机制及H.priori功能研究奠定基础.方法:利用基因同源重组方法将卡那霉素抗性基因(KanR)连接到PCR扩增hp0527两端区域产生的2个目的基因片段之间,构建hp0527基因缺失的自杀质粒pBlueKM40-△hp0527;将带有卡那霉素抗性标志的缺失突变载体,通过抗生素卡那霉素筛选出缺失hp0527基因的突变株,并经PCR方法鉴定后,采用野生株和突变株的幽门螺杆菌分别与胃癌上皮细胞BGC-823共培养后,分析它们对细胞毒素相关蛋白CagA转运能力的影响.结果:成功构建出幽门螺杆菌hp0527基因突变的自杀质粒,突变载体经内切酶酶切分析显示:产生的条带与设计结果完全一致;抗生素筛选并经PCR鉴定后,获得了hp0527基因缺失株;CagA蛋白转运分析表明基因hp0527缺失前后,可以导致细菌转运CagA蛋白能力的丧失.结论:成功构建出1株缺失hp0527基因的H.pylori突变株,对于阐明该基因的功能及其在H.pylori致病中的地位及作用具有重要的研究价值.