构建携带EGFP标志人白细胞介素10基因的重组腺病毒载体

目的 构建携带EGFP标志人白细胞介素10(hIL-10)基因腺病毒载体.方法 以pSNAV2.0-hIL-10重组质粒为模板.PCR扩增hIL-10基因,获得hIL-10 cDNA片段,并酶切连接到带有含强绿色荧光蛋白基因(EGFP)标记的pDC316-IRES-EGFP-lacZalpha载体质粒上,Pmel线性化重组质粒pDC316-hIL-10-IRES-EGFP,与腺病毒包装系统AdMax转染293包装细胞,包装产生复制缺陷型重组腺病毒,经反复感染293细胞扩增病毒后,进行离子交换法纯化病毒,并测定病毒颗粒数、滴度.结果 经PCR鉴定、限制性酶切分析及序列测定,证明已正确构建重组穿梭质粒pDC316-hIL-10-IRES-EGFP和重组腺病毒质粒Ad-hIL-10-IRES-EGFP.扩增纯化后.测得重组腺病毒颗粒数为3.2×1011VP/ml,OD260/OD280值约为2.0,滴度为1.1×1010TCID50/ml.结论 成功构建了重组腺病毒质粒Ad-hIL-10-IRES-EGFP,为进一步研究hIL-10基因奠定实验基础.     

T型接头内镜面罩通气复合瑞芬太尼镇静清醒气管插管的效果

目的 探讨带有T型接头的内镜面罩(专利号:201120467717.9)通气复合瑞芬太尼持续输注镇静在纤维支气管镜(FOB)引导清醒气管插管(AFOI)的效果.方法 选择拟行经鼻气管插管全身麻醉口腔颌面外科手术患者45例,ASA Ⅰ或Ⅱ级,年龄25～60岁,随机分为三组,R1组采用T型接头内镜面罩通气复合瑞芬太尼镇静,R2组鼻导管吸氧复合瑞芬太尼镇静,F组鼻导管吸氧复合芬太尼镇静.记录三组插管操作时间,插管期间呛咳发生率以及术后随访患者的满意度.结果 与F组比较,R1和R2组在FOB操作时和气管插管时MAP降低、HR减慢,AFOI操作时间缩短,操作期间呛咳发生率减低,术后随访患者的满意度增加(P＜0.05).结论 自行设计的带有T型接头内镜面罩通气复合瑞芬太尼持续输注镇静可提供满意的清醒气管插管条件,且患者易于接受.     

肺动脉高压大鼠肺组织肝细胞生长因子和c-met表达的变化

目的 观察肺动脉高压大鼠肺内肝细胞生长因子(HGF)及其受体(c-met)表达的变化.方法 雄性SD大鼠80只,7周龄,体重180～250 g,采用随机数字表法,将其随机分为2组(n=40):对照组(C组)和肺动脉高压组(PH组).PH组经左侧开胸行左肺切除术,手术结束后关胸,待自主呼吸恢复后拔除气管导管,2周后颈部皮下注射野百合碱60 mg/kg,制备肺动脉高压模型;C组仅开胸,2周后颈部皮下注射等容量生理盐水.分别于注射野百合碱前1 d(基础值)、注射野百合碱后7、14、21和28 d时,各取8只大鼠,监测肺动脉压(mPAP),计算右心室与左心室+室间隔质量比[RV/( LV+S)],计算肌型肺小动脉血管中膜相对厚度(RWT1和RWT分别表示直径为50～100 μm和100-150μm的血管中膜相对厚度).采用RT-PCR法检测肺组织HGF mRNA和c-met mRNA的表达,采用Western blot法检测肺组织HGF蛋白和c-met蛋白的表达,采用ELISA法检测肺组织转化生长因子-β(TGF-β)含量.结果 与C组比较,PH组注射野百合碱后14、21和28 d时mPAP、RV/ (LV+S)和RWT2升高,HGF蛋白表达下调,注射野百合碱后7、14、21和28 d时RWT1升高,肺组织HGF mRNA表达下调,TGF-β含量升高(P＜0.01),c-met mRNA及其蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 肺组织HGF合成不足可能参与了肺动脉高压的形成,其机制与肺组织TGF-β含量升高有关.     

福建省2003年麻醉学学术会议召开

福建省 2 0 0 3年麻醉学学术会议于 1 0月 2 9日～ 1 1月 2日在我省东山县召开。到会正式代表 1 5 6人 ,与会 30 0余人 ,会议共收到学术讲座及论文等 1 90余篇。会议特邀第四军医大学西京医院熊利泽教授作学术报告。会议期间进行福建省麻醉学会换届改选 ,产生了第五届福建省麻醉学会委员会 :主任委员林财珠 (福建医科大学附属第一医院 ) ;副主任委员郭永正 (福建医科大学附属协和医院 ) ,陈彦青 (福建省立医院 ) ,陈国忠 (南京军区福州总医院 ) ;常委陈朴 (福州市第二医院 ) ,魏真 (福建省立医院 ) ,于荣国 (福建省立医院 ) ,张良成 (福建医…     

二异丙酚对自发性高血压大鼠血流动力学和血浆ET、CGRP、AngⅡ的影响

目的　观察不同剂量二异丙酚对自发性高血压大鼠 (SHR)血流动力学及其对血浆内皮素 (ET)、降钙素基因相关肽 (CGRP)、血管紧张素 (Ang )的影响 ,为临床高血压病人的麻醉结合其不同降压药物的使用、合理应用二异丙酚提供实验依据。　方法　 1 2～ 1 4周雄性自发性 SHR2 4只随机分为 3组 (各 8只 ) :SA组 (生理盐水 ) ,SB组 (低剂量二异丙酚 )和 SC组 (高剂量二异丙酚 ) ;同龄雄性 WKY大鼠 2 4只随机分为 3组 (各 8只 ) :WA组 (生理盐水 ) ,WB组 (低剂量二异丙酚 )和 WC组 (高剂量二异丙酚 )。WA及 SA组 ,生理盐水 1 .2 m L/ kg1 5 s静注后持续注入生理盐水 1 2 m L· kg- 1 · h- 1 ;WB及 SB组静注二异丙酚 5 m g/ kg诱导麻醉后静脉持续注入二异丙酚 30 m g· kg- 1 · h- 1 30 m in;WC及 SC组静注二异丙酚 5 mg/ kg诱导麻醉后静脉持续注入二异丙酚 6 0 mg· kg- 1· h- 1 30 min维持 ,总容量均相同。记录未注药时、注药后 2 ,1 0 ,2 0 ,30 m in平均动脉压 (MAP)、心率 (HR)及呼吸频率 ,测定血浆 ET、CGRP、Ang 的含量。　结果　 (1 )随着二异丙酚注入时间延长及剂量增加 ,SHR及 WKY大鼠均出现 MAP降低和 HR减慢 ;SHR出现改变的时间较 WKY早 ,下降幅度比 WKY大 ;二异丙酚呈时间剂量依赖性方式降低血压减     

急性等容性血液稀释对肝脏手术纤维蛋白降解产物D-二聚体和凝血功能的影响

目的探讨急性等容性血液稀释(ANH)对肝脏手术纤维蛋白降解产物D二聚体和凝血功能的影响。方法肝脏手术患者60例随机均分为三组,Ⅰ组行ANH,红细胞压积(Hct)为30%;Ⅱ组行ANH,Hct为25%;Ⅲ组为对照组不行ANH。所有行ANH患者均经肘部静脉或其他大静脉采血,放血时间为15～30min,血液存于含PCD的采血袋;下肢同步输注等容量6%羟乙基淀粉(HES),直到Hct降至30%或25%,并维持血液动力学稳定。所采集的血液室温保存于手术室,结合术中失血量和循环情况在手术结束前行自体输血;分别于ANH前、ANH后30、60min、手术结束和手术后12h采静脉血测定血小板计数(Plt)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白降解产物D二聚体和Hct。结果Ⅰ、Ⅱ组术中出血量较Ⅲ组显著减少(P<0.05);Ⅰ、Ⅱ组ANH后和术中PT、TT较Ⅲ组显著延长(P<0.05,P<0.01),Plt显著下降(P<0.05,P<0.01),但仍在正常范围内,回输自体血后上述指标明显恢复,手术野和切口无异常出血;三组D二聚体无明显改变(P>0.05)。结论术前对肝脏手术患者进行ANH至Hct降至30%～25%之间是安全的,对凝血功能和纤溶系统无明显影响且可减少术中出血量。     

异丙酚对大鼠血流动力学和血浆及心肌内皮素、降钙素基因相关肽的影响

目的　探讨异丙酚对大鼠血流动力学和血浆及心肌内皮素 (ET)、降钙素基因相关肽 (CGRP)的影响。　方法　 12～ 14周 Wistar大鼠 2 4只 ,随机分为 3组 ,每组 8只 :A组 (对照组 ,注射 0 .9%生理盐水 ) ,B组 (低剂量异丙酚 )和 C组 (高剂量异丙酚 )静注异丙酚 5 m g/kg诱导麻醉后分别静脉持续 30 min注入异丙酚 30、6 0 m g·kg- 1 · h- 1 。总容量均相同 ,记录未注药时、注药后 2 ,10 ,2 0 ,30 m in的收缩压 (SBP)、平均动脉压 (MAP)、舒张压(DBP)、心率 (HR)及呼吸 ,测定血浆及心肌 ET、CGRP的含量。　结果　组内比较 :B组各时点血压、心率无差异(P<0 .0 5 ) ;C组随时间的延长 ,2 0 ,30 min的 SBP、MAP、DBP、HR均下降 (P<0 .0 5或 0 .0 1)。组间与 A组比较 :各组基础值无差异 ;B组仅在 2 ,10 m in时 HR下降 (P<0 .0 5 ) ;而 C组 SBP、MAP、DBP、HR均下降 (P<0 .0 5或0 .0 1) ,且 HR随时间的延长与 A组的差异明显增加 ,30 m in时 P<0 .0 0 1;B组和 C组血浆中 CGRP增高、ET下降 ,C组改变显著 ,心肌中 CGRP、ET无变化。　结论　异丙酚促进 CGRP释放 ,抑制 ET的释放 ,通过改变 CGRP/ET的平衡呈时间剂量依赖性降血压 ,减慢心率     

病例分析教学法在临床麻醉教学中的应用

为了更好地激发学生的学习积极性,培养学生临床思维能力,在麻醉科临床教学中采用病例分析教学法。通过这种方法,学生能更有效地掌握麻醉科知识,同时提高了临床综合分析能力,改善了教学效果。     

人IL-10对呼吸机相关性肺损伤大鼠炎性细胞因子的影响

目的：探讨人白介素10(hIL-10)预先给药对呼吸机相关性肺损伤(VILI)大鼠炎性因子的影响。方法健康雄性 SD大鼠36只,体质量220~300 g,随机分为3组(n=12)：对照组(C组)、大潮气量机械通气组(H 组)和 hIL-10干预组(HI组)。其中C组经口插管后维持自主呼吸4 h;H 组采用大潮气量机械通气建立大鼠 VILI 模型,阿曲库铵静脉输注抑制自主呼吸、维持肌松,接小动物呼吸机机械通气,呼吸参数设定：呼吸频率40次/min,通气时间4 h,吸呼比为1∶3,呼气末正压通气0 cmH2 O,吸入氧浓度为21%,潮气量30 ml/kg,根据体质量调节潮气量;HI组在大潮气量机械通气开始前30 min从尾静脉注射 hIL-10(剂量为8000 U/kg),余同 H 组,C组、H 组给予等量的生理盐水。各组于通气4 h后放血处死大鼠,收集大鼠血清和 BALF,采用酶联免疫吸附测定法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-8和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的浓度;取右上肺组织做病理切片,HE染色镜下观察形态学变化。结果光镜下观察显示 C组肺泡结构无明显损伤;H 组肺泡结构破坏严重,肺泡内渗出物、出血和间质水肿明显,可见明显肺泡腔融合,肺间隔增宽,大量炎性细胞浸润;HI组肺组织结构有一定程度损伤,肺间隔有少量增厚,但较 H 组减轻。与C组相比,H 组、HI组血清和BALF中TNF-α、IL-8和 ICAM-1水平均升高(P <0.05或 P <0.01);与 H 组相比, HI组血清和BALF中TNF-α、IL-8和 ICAM-1水平明显降低(P值均<0.01)。结论 hIL-10作为机体重要的抗炎因子,可通过调节肺组织炎症反应,降低炎性细胞因子水平,在一定程度上减轻大鼠VILI。