蛋白质复性的条件及影响因素

蛋白质复性是一个过程 ,存在中间阶段 ,此阶段的各种相互作用力决定了蛋白质能否复性。蛋白质复性要求有一定的条件 ,如pH、温度、离子强度、蛋白质浓度等。另外多种添加剂能促进蛋白质复性 ,其中包括表面活性剂、低浓度变性剂、分子伴侣蛋白和各种氧化还原对 ,但对于不同蛋白质 ,因其结构及理化特性不同 ,采取不同复性方法 ,可以使其达到最佳复性效果     

含凝血酶识别位点的重组人粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子在大肠杆菌的表达

采用PCR技术，从细胞中获取粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子cDNA，并在5′端设计上凝血酸酶切位点、5个组氨酸密码子、起始密码子及EcoR1酶切位点，在3′端设计上BamH1酶切位点。将扩增产物酶切后克隆到pBV220质粒的EcoRⅠ－BamHⅠ酶切位点，转化大肠杆菌DH5α，筛选阳性重组子（pGM09／DH5α）。在E.coli中获高效表达，表达量占总蛋白的31．2％，生物活性为1．1×107U／L发酵液，纯化工艺简化。     

髓磷脂碱蛋白抗体对神经细胞损伤作用的初步研究

自1969年Walker提出癫痫的免疫病理机制以来,有关癲痫的免疫学研究越来越受到重视,人们发现抗脑抗体对脑组织的特异性作用可引起癲痫样放电;将抗脑抗体注入动物脑内,可引起反复性的癲痫样发作。髓磷脂碱蛋白(MBP)是神经髓鞘的重要成份,也是一种自身免疫原性较强的物质。本文报告了MBP抗体对体外培养的神经细胞的作用,为探索癫痫的发病机理秈临床治疗提供线索。一、材料和方法 (一)神经细胞培养:取3～4月龄水囊引产胎儿,产后及时以无菌手续取出脑组织,去除脑膜和血管,Hank液洗三次,0.25％胰蛋白酶37℃消化30分钟,吸除胰蛋白酶后;加含20％乳牛血清的Eagle液,吹打分散细胞,计数后稀释至10~6个/ml接种细胞管,37℃培养约7     

脑脊液髓鞘碱性蛋白抗体检测对格林-巴利综合征的临床价值

目的探讨格林-巴利综合征（GBS）中枢神经髓鞘的免疫性损伤。方法GBS患者20例，神经系统其它疾病组（OND）20例，非神经系统疾病手术者33例。以酶联免疫吸附法检测73份脑脊液（CSF）中髓鞘碱性蛋白IgG（MBP－IgG）。结果GBS患者、OND患者和非神经系统疾病手术者CSF中MBP－IgG阳性率分别为55％、30％和9.1％。GBS患者CSF中MBP-IgG阳性率与发病天数有关。结论部分GBS有中枢神经髓鞘的免疫性损害，证实GBS是自身免疫性脱髓鞘病。     

葡糖基转移酶抗体的防龋研究

为了从病因学的角度对龋齿进行有效防治.方法 通过测定使用从免疫乳中提取的葡糖基转移酶抗体后,对唾液中游离型该酶的活性影响,及儿童近期新龋发生率的观察和比较. 结果 该抗体可显著降低口腔唾液中游离型萄糖基转移酶的活性,并取得明显近期防龋作用.结论 该方法是一种安全可靠的防龋新途径.     

HIV-1中和抗体b12的研究进展

HIV-1由于其外膜糖蛋白结构多变可以很容易逃避抗体介导的中和作用.b12抗体是目前少数几种被证明具有广谱抗HIV-1活性的中和抗体,近来关于gp120结构研究表明在gp120上有一个保守的中和位点,且b12抗体可以和这个位点结合从而阻断靶细胞CD4与gp120作用,这一发现预示b12抗体对于新一代艾滋病疫苗设计具有重要的作用.本文即对b12抗体的有关研究进展作一综述.     

真核表达骨形成蛋白的条件优化

重组人骨形成蛋白 7(ｒｈＢＭＰ 7)在体内和体外都显示了高效的骨诱导活性[1] 。可刺激成骨细胞、类成骨细胞及已分化的人骨细胞 ,促进其增殖和胶原合成以及细胞中碱性磷酸酶增加。在长期培养基中可使胶外基质钙化性的诱导原始成骨祖细胞的定向分化。本组实验主要探索体外培养条件下骨形成蛋白 7(ＢＭＰ 7)在真核细胞 (ＣＨＯ)中的表达 ,通过逐渐增加氨甲蝶呤 (ＭＴＸ)的浓度筛选克隆 ,得到高表达的单克隆细胞株。1　材料和方法1.1　材料　ＣＨＯ细胞株 ,由美国得克萨斯大学西北医学中心赠送 ,ＢＭＰ 7重组表达质粒由美国得克萨斯大学西北…     

格林巴利综合征患者脑脊液髓鞘碱性蛋白抗体测定及其抗原制备

目的探讨格林巴利综合征(GBS)是否存在中枢神经系统脱髓鞘现象.方法应用酸提法从胎儿大脑白质中提取髓磷脂碱性蛋白(MBP),经Sephdex-G150柱层析纯化和SDS-PAGE圆盘电泳分析,以纯化的MBP为抗原,用EUSA法测了44例GBS患者、38例其他神经疾病(OND)患者和33例正常人.结果经酸提后的碱蛋白,共有3个洗脱峰;SDS-PAGE证实第三峰中含1.7kD和2.1kD两条区带;GSF-MBP-EgG检测,GBS组阳性率为38.6%(17/44),OND组阳性率为34%(13/38),对照组阳性率为9%(3/33).结论MBP作为髓鞘的主要蛋白在GBS的自身免疫性脱髓鞘的过程中起重要作用.     

HIV-1中和抗体b12的研究进展

HIV-1由于其外膜糖蛋白结构多变可以很容易逃避抗体介导的中和作用.b12抗体是目前少数几种被证明具有广谱抗HIV-1活性的中和抗体,近来关于gp120结构研究表明在gp120上有一个保守的中和位点,且b12抗体可以和这个位点结合从而阻断靶细胞CD4与gp120作用,这一发现预示b12抗体对于新一代艾滋病疫苗设计具有重要的作用.本文即对b12抗体的有关研究进展作一综述.