学习记忆训练对阿尔茨海默病大鼠空间认知能力及脑组织的保护作用

目的:探讨学习记忆训练对阿尔茨海默病大鼠行为学变化和海马异常磷酸化tau蛋白和神经元型一氧化氮合酶阳性神经元表达的影响。方法:实验于2004-04/07在武汉大学医学院神经生物学实验室完成。选取86只大鼠运用淀粉样β蛋白双侧海马注射建立大鼠阿尔茨海默病模型,随机抽取造模成功大鼠56只分为阿尔茨海默病训练组40只、阿尔茨海默病对照组16只。未建立阿尔茨海默病模型16只大鼠为正常对照组。用Y型迷宫对阿尔茨海默病大鼠进行学习记忆训练4周,分别在训练第7,14,21,28天观察各组大鼠行为学变化和脑内异常磷酸化tau蛋白和海马神经元型一氧化氮合酶阳性神经元表达情况。结果:参加实验动物100只,模型制备成功72只进入结果分析。①训练第28天时,阿尔茨海默病训练组Y型迷宫检测达标训练次数,错误反应次数,潜伏期,全天总反应时间[15.82±2.64,4.18±1.75,(6.18±4.86)s,(1236.78±97.26)s]均接近正常对照组[16.10±3.94,3.90±1.72,(5.87±4.08)s,(1175.40±81.76)s,(P>0.05)],而与阿尔茨海默病对照组大鼠比较差异显著[48.33±5.10,8.83±2.98,(11.32±12.23)s,(2264.32±244.60)s,(P<0.05)]。②训练第28天时阿尔茨海默病训练组大鼠脑海马异常磷酸化tau蛋白和神经元型一氧化氮合酶阳性信号的积分吸光度(19.33±3.     

吡咯喹啉醌与神经干细胞的增殖

背景:目前国内外学者主要应用生长因子样物质来促进神经干细胞的分裂与增殖,所以作者推测吡咯喹啉醌小分子化合物也能促进神经干细胞的分裂增殖.目的:体外观察氧化还原酶辅酶吡咯喹啉醌促进鼠成体神经干细胞增殖的作用.方法:体外培养Wistar 胎鼠成体神经干细胞成球体后,于培养液中加入1×10-8 mol/L 吡咯喹啉醌,对照组...     

Aβ25～35诱导阿尔茨海默病模型大鼠海马神经元HSP70的表达

目的利用β-淀粉样蛋白(Aβ25～35)毒性作用诱导大鼠阿尔茨海默病(AD)模型,研究热休克蛋白70(HSP70)在海马神经元损伤中的表达.方法将大鼠随机分为2组:AD模型组、溶媒体组,在双侧海马分别注射2 μl(10 μg)Aβ25～35 、2 μl生理盐水;于海马注射第1,7,14,21天采用免疫组织化学、积分光密度分析等手段对各组大鼠脑HSP70的表达进行观察.结果 AD模型组手术第7天大鼠记忆明显减退(P<0.05),且HSP70在海马神经元内表达第1天时最高,第1～21天呈递减趋势,其中第14天锐减.结论 Aβ25～35通过氧化应激和损伤海马神经元等过程使HSP70的表达明显降低,HSP70表达是AD大鼠脑内神经元存活的重要标志.     

吡咯喹啉醌与神经干细胞的增殖

背景：目前国内外学者主要应用生长因子样物质来促进神经干细胞的分裂与增殖,所以作者推测吡咯喹啉醌小分子化合物也能促进神经干细胞的分裂增殖。目的：体外观察氧化还原酶辅酶吡咯喹啉醌促进鼠成体神经干细胞增殖的作用。方法：体外培养Wistar胎鼠成体神经干细胞成球体后,于培养液中加入1×10-8mol/L吡咯喹啉醌,对照组加入同等剂量的Hanks溶液。应用流式细胞仪测细胞周期增殖率,应用免疫组化法和WesternBlot测周期蛋白激酶（CDK2）和周期蛋白激酶抑制剂（P27）的表达。结果与结论：与对照组相比,吡咯喹啉醌处理16h和24h后,S期和G2期细胞数的比例显著增高,而细胞的凋亡率降低;CDK2蛋白的表达显著增强,而P27的表达显著降低。结果显示低浓度的吡咯喹啉醌即能促进鼠成体神经干细胞的增殖。     

PBL教学法在局部解剖学教学中的应用

在局部解剖学教学中引进PBL教学模式,符合21世纪社会发展对高素质创新性医学人才培养的需要和局部解剖学的课程特点,有利于学生学习观念的转变和学习能力的提高,是全面实施素质教育的有效途径。     

脑室内移植嗅成鞘细胞改善大鼠阿尔茨海默病的症状

目的探讨嗅成鞘细胞（olfactory ensheathing cells,OECs）脑室内注射对大鼠阿尔茨海默病的影响。方法sD大鼠双侧海马注射ABl．40,建立AD大鼠模型。实验动物分为四组：正常对照组、AD模型组、OECs移植组、MCSF注射组,每组10只。体外原代培养嗅成鞘细胞并将其移植至AD大鼠侧脑室。运用行为学测试、组织化学、原位杂交结合图像分析以及电镜等技术,观察、比较各组大鼠学习记忆能力、海马CA1区线粒体细胞色素氧化酶（cytochrome oxidase,COX）活性、细胞色素氧化酶Ⅱ型亚基（COⅡ）mRNA表达、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）阳性神经元数,以及CA1区神经元线粒体超微结构等指标的变化。结果与正常对照组比较,AD模型组大鼠空间学习记忆能力、海马CA1区线粒体COX活性及CO II mRNA表达、NOS阳性神经元数明显降低或减少俨〈0．05）,线粒体数肇减少,结构不清、肿胀、空泡样变、嵴断裂;嗅成鞘细胞移植明显上调上述指标俨〈0．05）,并对神经元线粒体超微结构有明显的保护作用。结论嗅成鞘细胞移植通过改善AD大鼠学习记忆能力、提高海马COX活性和CO1ImRNA、NOS阳性神经元表达以及保护神经元线粒体等作用,对大鼠阿尔茨海默病具有明显的治疗作用。     

大鼠嗅成鞘细胞培养不同分离方法对纯度的影响

目的通过对多种分离方法的比较获得较为理想的嗅成鞘细胞的分离措施。方法应用3种不同分离方法各取12份样本,对同一条件下培养10d的细胞纯度进行p75NGFR免疫细胞化学测定及统计分析;结果(1)3种不同分离方法取材平均活细胞率:传统分离法(组)为84.52%,直接挤压法(组)为97.33%,机械过滤法(组)为83.97%,直接挤压(组)法分散后的OECs活细胞数量最多(P<0.05);(2)3种分离方法取材、培养所获得的OECs纯度:传统分离法(组)为67.58%,直接挤压法(组)为91.23%,机械过滤法(组)为63.51%;直接挤压法(组)培养细胞纯度最高(P<0.05)。结论嗅成鞘细胞最佳分离措施为直接挤压法,应用直接挤压法可收获大量嗅成鞘细胞,对OECs进一步的基础研究以及将来的临床应用奠定了基础。     

HSP70在早期妊娠大鼠子宫中的表达及己烯雌酚的诱导作用

目的探讨在早期妊娠大鼠子宫中热休克蛋白70(hearshockprotelns,HSP70)的表达变化以及己烯雌酚(dithylstilbestrol,DES)对子宫HSP70表达的诱导作用。方法采用免疫组织化学和图像分析技术研究正常大鼠未孕及已孕的子宫。结果①孕鼠子宫HSP70的阳性表达较未孕鼠明显增强,差异有显著性(P<0.01);②小剂量(1.25滋g/50g)大剂量(5滋g/50g)DES均可诱导大鼠子宫HSP70免疫反应阳性细胞数量显著增加(P<0.01)。结论热休克蛋白70在早期妊娠大鼠子宫内膜固有层的基质细胞及蜕膜内蜕膜细胞的表达明显增高,DES对子宫HSP70。表达具有明显诱导作用。