香菇多糖抗小鼠MRSA皮肤感染的作用

目的 本研究主要探讨香菇多糖是否具有抗小鼠耐甲氧西林金黄色葡萄球菌皮肤感染的作用.方法 将小鼠随机分为对照组和香菇多糖处理组,每组10只,皮下注射5×107CFU/30μl耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,建立小鼠皮肤感染模型.对照组腹腔注射100μl PBS,实验组腹腔注射100μl香菇多糖(100mg/kg).观察小鼠皮肤部位感染情况,感染组织匀浆细菌培养检测小鼠皮肤感染部位细菌负荷量,免疫荧光染色方法检测小鼠皮肤感染部位内中性粒细胞浸润情况,RT-P C R技术检测小鼠皮肤感染部位白细胞介素33(I L-33)、中性粒细胞趋化因子1(KC)的表达.结果 经香菇多糖处理后,小鼠皮肤部位感染明显轻于对照组;感染部位细菌定量、免疫荧光染色显示香菇多糖可降低小鼠皮肤感染部位细菌负荷量,促进中性粒细胞浸润;RT-P C R技术检测显示香菇多糖可促进小鼠皮肤感染部位I L-33、趋化因子K C的表达.结论 香菇多糖可抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对小鼠皮肤的感染.     

pEGFP-N3-TFPI-2真核表达载体的构建和鉴定

目的构建pEGFP-N3-TFPI-2真核表达载体,为研究TFPI-2基因的功能做准备。方法从胎盘组织中提取总RNA,逆转录合成cDNA,再以PCR法进行扩增。将扩增的TFPI-2基因片段克隆到pEGFP-N3真核表达载体上,经XhoI和KpnI双酶切后,行1％琼脂糖凝胶电泳鉴定,同时测定其DNA序列。将pEGFP-N3-TFPI-2真核表达载体以脂质体LipofectamineTM2000介导的方法转染Top10感受态细胞（转染组）,同时设空白对照组（仅转染pEGFP-N3质粒）和未转染组（不予转染）。采用Westernblot法检测3组细胞中TFPI-2蛋白的表达情况。结果总RNA经分光光度法验证,其纯度符合PCR法扩增的要求。构建的pEGFP-N3-TFPI-2真核表达载体经XhoI和KpnI双酶切后,行1％琼脂糖凝胶电泳,结果显示,分别在708bp处和4700bp处有特异扩增条带,大小与理论值一致。DNA序列测定结果证实,pEFFP-N3-TFPI-2真核表达载体的序列完全正确。Westernblot法结果显示,TFPI-2蛋白的表达量转染组为0．6573±0．0325,空白对照组为0．3017±0．0287,未转染组为0．3143±0．0266,转染组TFPI-2蛋白的表达量高于空白对照组和未转染组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论本实验成功构建了pEGFP-N3-TFPI-2真核表达载体,为TFPI-2基因功能的研究奠定了基础。     

5-氮杂-2′-脱氧胞苷对胃癌SGC7901细胞增殖的抑制作用研究

目的:研究5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对胃癌SGC7901细胞增殖的抑制作用。方法:取SGC7901对数生长期细胞,分别加入0(未给药)、0.1、0.5、1.0、5.0μmol/L5-Aza-CdR,每个浓度设3个复孔,分别于给药后24、48、60、72h,采用MTT法检测细胞增殖情况,采用蛋白质印迹法和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法分别检测细胞内组织因子途径抑制物2(TFPI-2)蛋白和mRNA的表达情况。结果:与未给药比较,除作用24h外,各浓度5-Aza-CdR作用48、60、72h后SGC7901细胞的增殖活性均明显降低,细胞内TFPI-2蛋白和mRNA表达均明显增加(P<0.05),且与浓度和时间呈正相关。结论:5-Aza-CdR可上调SGC7901细胞中TFPI-2基因的表达,对SGC7901细胞增殖具有抑制作用。     

多重耐药菌感染术后肺炎相关危险因素分析及控制方法学探究

  目的  通过监测胸外科术后肺炎医院感染的发生情况,分析多重耐药菌感染所致术后肺炎的相关危险因素,从而制定相应防控和干预措施,以降低术后肺炎感染发生率及多重耐药菌感染所致的术后肺炎发生率,有效加速患者术后康复。  方法  通过对2016—2018年入住胸外科的所用手术患者610例进行医院感染目标性监测,分析多重耐药菌感染所致术后肺炎发生情况及感染相关危险因素。采用SPSS 20.0软件对数据进行统计分析。  结果  检出铜绿假单胞菌最多:共22株,占比50.00%(22/44)。检出的多重耐药菌主要为:耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌共8株,占比53.33%(8/15)。多重耐药菌感染导致的术后肺炎感染率呈现下降趋势,从2016年的3.38%降至2018年的1.37%,对其危险因素进行单因素分析发现:抗生素使用≥14 d、留置导尿管、进行机械通气、入住重症监护病房、ASA评分≥Ⅱ、使用抗菌药物种类≥3种等因素是主要危险因素(均P＜0.05),经logistic多因素分析结果发现,仅抗生素使用时间是多重耐药菌感染所致术后肺炎感染的相关独立危险因素。  结论  通过有效的医院感染监测及危险因素分析,可发现多重耐药菌感染所致术后肺炎的主要感染危险因素,从而降低多重耐药菌感染所致术后肺炎的发生率。