大青鲨Ⅱ型胶原蛋白灌胃诱导免疫耐受治疗类风湿关节炎

目的:研究大青鲨Ⅱ型胶原蛋白(shark typeⅡcollagen,SCⅡ)灌胃诱导免疫耐受治疗类风湿关节炎(rheumatoidarthritis,RA)的疗效和机制。方法:60只大鼠随机分为6组,除空白对照组以外的其他大鼠以弗式完全佐剂诱导RA模型。模型对照组大鼠灌服0.2ml浓度为0.05mol/L的乙酸溶液,其余各组大鼠分别灌服0.2ml 1mg/ml牛源Ⅱ型胶原蛋白(bovine typeⅡcollagen,BCⅡ)、1和3mg/ml SCⅡ、10mg/ml雷公藤多苷溶液(均以0.05mol/L乙酸溶液为溶剂)诱导免疫耐受。以迟发型超敏反应、循环免疫复合物、白介素-10血清水平、踝关节组织形态学和软骨表面修复状况共5个指标来评价SCⅡ治疗RA的疗效。通过体外细胞实验研究SCⅡ诱导免疫耐受的机制。结果:SCⅡ能通过灌胃诱导免疫耐受,减少迟发型超敏反应,使循环免疫复合物呈阴性,显著提高白介素-10的水平,修复踝关节软骨表面损伤,显著增加CD4+T淋巴细胞Fas/Apo-1的数量。SCⅡ治疗RA的疗效优于雷公藤多苷和BCⅡ,最佳剂量为3mg.kg-1.d-1。结论:RA大鼠模型灌胃SCⅡ可诱导免疫耐受,对RA有较好疗效。     

Ⅱ型胶原蛋白的热稳定性、圆二色性和红外光谱研究

目的以蓝鲨Ⅱ型胶原蛋白为材料,分析Ⅱ型胶原蛋白的热稳定性、圆二色性和红外光谱特性。方法采用限制性酶解法分离蓝鲨软骨Ⅱ型胶原蛋白,通过SDS-PAGE、DSC、CD、IR分析Ⅱ型胶原蛋白的相对分子质量、热变性温度、二级结构特征和红外光谱特征。结果蓝鲨Ⅱ型胶原蛋白是由相对分子质量为130kDa的α1链构成;蓝鲨Ⅱ型胶原蛋白的热变性温度为40.5℃,[Na+]和[H+]改变了胶原蛋白的热稳定性;蓝鲨Ⅱ型胶原蛋白在3411、3008、1648、1549cm-1有红外特征性吸收峰;蓝鲨Ⅱ型胶原蛋白以β-折叠为主,占主链的36.9%,接近于全β型三级结构,[H+]将改变Ⅱ型胶原蛋白的二级结构元件构成,使其β-折叠消失,出现少量的α-螺旋,Ⅱ型胶原蛋白肽链转变成无规卷曲。结论蓝鲨Ⅱ型胶原蛋白是典型的纤维状蛋白质,具有作为生物功能物质的优良生物化学特性。