NUDT15c.415C>T和TPMT*3C基因多态性检测方法的比较与临床应用

目的 建立准确、快速、经济的方法,检测NUDT15 c.415C>T和TPMT*3C基因多态性,探讨临床应用价值。方法 收集2017年5月-2018年5月期间福建汉族患者服用硫唑嘌呤2周以上的血清样本,提取DNA或白细胞后分别采用PCR-RFLP法、PCR-Sanger测序法和荧光定量PCR法对NUDT15 c.415C>T和TPMT*3C进行基因多态性分型,比较这3种方法的准确性、简便性及经济性。根据白细胞值分组,结合临床资料,探讨基因多态性等因素与硫唑嘌呤致白细胞减少的相关性。结果 共纳入129例患者,其中硫唑嘌呤致白细胞减少15例（11.6%）。3种方法的基因多态性检测结果一致,TPMT*3C未发现突变纯合子。携带NUDT15c.415C>T突变等位基因者服用硫唑嘌呤致白细胞减少的风险高于携带野生等位基因者（OR=6.2,95%CI：2.5~15.4,P=0.000 054）,而携带TPMT*3C突变等位基因者与野生等位基因者出现白细胞减少比例并无显著性差异（P=0.393）。NUDT15c.415C>T基因多态性预测白细胞减少敏感度为53.3%,特异度为85.1%,ROC曲线AUC为0.69。结论 3种方法都可用于临床检测NUDT15 c.415C>T和TPMT*3C基因多态性。PCR-RFLP法不需要专用试剂盒,也不需要昂贵的仪器设备,成本较低,过程简单,易于操作,特别适合条件有限的单位开展工作。福建汉族患者在服用硫唑嘌呤前进行NUDT15c.415C>T基因多态性检测比TPMT*3C更具临床价值。     

注射用比阿培南与5种输液配伍稳定性考察

目的建立HPLC法测定注射用比阿培南的含量,并考察其与0.9%氯化钠、5%葡萄糖、10%葡萄糖、葡萄糖氯化钠、复方氯化钠注射液配伍的稳定性。方法采用色谱柱Symmetry C18（4.6×150mm,5μm）、流动相为醋酸盐缓冲液∶乙腈（100∶3,v/v）、检测波长294nm;在25℃、室内自然光照射下观察配伍液的外观变化,同时监测配伍液pH值及比阿培南含量的变化。结果比阿培南线性范围0.01~1.0mg.mL-1,r=0.9998（n=8）;平均回收率99.57%,RSD 1.30%,最低定量限58ng.mL-1（S/N≥10）。在0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液中10h,葡萄糖氯化钠注射液中8h,10%葡萄糖注射液中5h,比阿培南的含量变化均〈5%;在复方氯化钠注射液中,3h时比阿培南的含量即小于95%。5种配伍液pH值均略降低,但24h内皆未超出药典规定范围。葡萄糖氯化钠配伍液6h起,10%葡萄糖配伍液10h起,颜色开始逐渐变黄加深。结论在25°C室内自然光照射下,比阿培南可与除复方氯化钠以外的本文其他4种输液配伍使用,但须注意稳定时间有所差别。本文建立的HPLC法适用于比阿培南含量测定。     

基因多态性对华法林谷浓度及维持剂量的影响

目的 探讨VKORC1(-1639G/A)、CYP2C9*3、CYP4F2(rs2108622) 和CYP2C19*2 基因多态性在中国心房颤动群体中的表达,分析其对房颤患者华法林谷浓度及维持剂量的影响。 方法 收集75例房颤患者的华法林血样,采用HPLC-UV法测定其谷浓度,PCR-RFLP法检测VKORC1(-1639G/A)、CYP2C9*3、CYP4F2(rs2108622)和CYP2C19*2基因分型。明确基因多态性对华法林谷浓度及维持剂量的影响。结果 华法林稳态谷浓度在0.5~<1.0μg?mL-1 、1.0~2.0μg?mL-1 及超过2.0μg?mL-1范围时,其临床有效率（69.23%,82.6%,63.41%）显著高于0. 5μg?mL-1以下浓度范围(48.39%)（P<0.05）,且0.5~<1.0μg?mL-1 及超过2.0μg?mL-1浓度范围华法林的临床有效率相近（P>0.05）。VKORC1(-1639G/A)、CYP2C9*3、CYP4F2(rs2108622) 和CYP2C19*2等位基因频率分别为8.65%、7.35%、20%、30%。VKORC1位点AA型、CYP4F2位点CC型患者华法林稳态谷浓度分别低于AG/GG及 CT/TT型患者（P<0.01）,而CYP2C9*3、CYP2C19*2各基因型间对华法林稳态谷浓度无显著差异（P>0.05）。携带AG/GG、CT/ TT型和野生型（*1/*1）基因型的患者,华法林维持剂量分别高于携带AA型、CC型和杂合型（*1/*3）的患者（P <0.01）,而CYP2C19*2各基因型间与华法林维持剂量无显著差异（P >0.05）。结论 VKORC1(-1639G/A)、CYP2C9*3、CYP4F2(rs2108622) 和CYP2C19*2基因多态性显著影响房颤患者华法林的维持剂量,且VKORC1(-1639G/A)、CYP4F2(rs2108622)基因多态性与房颤患者华法林谷浓度密切相关。     

肾功能正常患者万古霉素稳态谷浓度分布及影响因素分析

目的 考察肾功能正常患者万古霉素稳态谷浓度的分布情况,明确影响万古霉素稳态谷浓度的相关因素。方法 收集肾功能正常(肌酐清除率≥50mL/min)且接受万古霉素常规给药方案(1g q12h)治疗的感染患者血样,采用酶免疫扩大法测定万古霉素稳态谷浓度,应用有序多元Logistic回归分析万古霉素稳态谷浓度与患者基本资料及生化指标的相关性。结果 纳入331例符合入排标准的感染患者,统计分析发现,41%(136/331)的患者万古霉素稳态谷浓度低于10μg/mL,而稳态谷浓度高于20μg/mL占15%(48/331),仅44%(147/331)的稳态谷浓度达到指南推荐的目标范围(10~20μg/mL)。有序多元Logistic回归结果显示,患者的年龄(P<0.001)、体重(P<0.001)、肌酐清除率(P<0.001)、重症感染(P=0.022)以及高血压(P=0.022)是影响万古霉素稳态谷浓度的危险因素。结论 可以根据患者的年龄、体重、肌酐清除率、感染类型及血压情况来综合调整万古霉素的给药方案,以更好地实现个体化用药。     

慢性淋巴细胞性甲状腺炎所致儿童期甲状腺功能减低4例

临床资料年龄分布为10～14岁,男女之比是1∶3,病程为2～5年不等,均以身材矮小为主诉;其临床症状均有不同程度的生长发育落后、乏力、畏寒、活动少、皮肤粗糙,腹胀、便秘等甲低症状。除1例外,均呈现甲低的特殊面容,但智力不低下,病程中都无一过性甲亢。仅有1例甲状腺肿大。无甲状腺手术及服抗甲状腺药物史。化验检查:4例患儿T_3、T_4均低于正常,T8H都增高,而TGA(抗甲状腺球蛋白抗体)和TMA(抗甲状腺微粒体抗体)增高,腕部骨龄明显落后。     

高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍血药浓度及临床应用

盐酸二甲双胍(metformin hydrochloride,Met)是临床常用的口服双胍类降糖药,近年有一些缓、控释制剂上市.为了探讨其体内过程与临床疗效,笔者参考有关文献并加以改进[1-4],在实验室建立高效液相色谱法测定Met血药浓度,报道如下.     

不同年龄组全麻手术病人丙泊酚药动学研究

目的 建立高效液相色谱电化学法测定血浆丙泊酚浓度,研究丙泊酚在不同年龄组全麻手术病人中的药动学.方法 按年龄将病人分为3组:青年组(18～44岁)11例(男6例,女5例);中年组(45～59岁)13例(男10例,女3例);老年组(≥60岁)12例(男11例,女1例).单次静脉注射丙泊酚2 mg&#183;kg-1后不同时间取血以HPLC-ECD测定血浆丙泊酚浓度.应用3P87软件包求算药动学参数,SPSS软件包进行统计分析.结果 丙泊酚药动学参数①Vc:老年组＜青年组[(0.13&#177;0.05)vs(0.33&#177;0.07)L&#183;kg-1,P＜0.01)];中年组＜青年组[(0.163&#177;0.028)vs(0.33&#177;0.07)L&#183;kg-1,P＜0.05)];②t1/2β:青年组＜中年组＜老年组[(220&#177;32)vs(252&#177;48)vs(285&#177;30)min,P＜0.05)];③CLs:老年组＜青年组[(0.018 4&#177;0.00l 0)vs(0.023 9&#177;0.001 6)L&#183;kg-1&#183;min-1,P＜0.05)];④AUC0-∞:老年组＞中年组及青年组[(115&#177;10,vs(91&#177;6)vs(90&#177;7)mg&#183;min&#183;L-1,P＜0.05)];AUC0-540:老年组＞中年组及青年组[(103&#177;9)vs(76&#177;5)vs(78&#177;7)mg&#183;min&#183;L-1,P＜0.05)].结论 HPLC-ECD测定血浆丙泊酚浓度,方法较简便、准确,灵敏度高,重现性好,适用于临床丙泊酚血药浓度监测及药动学研究.老年病人丙泊酚的代谢减慢,提示丙泊酚在老年人麻醉用药时需减量.     

RP-HPLC法测定癫(间)患者氯硝西泮血药浓度

目的建立RP-HPLC法测定氯硝西泮(CZP)血药浓度.方法血清样品加入磷酸盐缓冲液(pH=5.8),以二氯甲烷提取后在37 ℃经氮气吹干,残渣用甲醇溶解后进样分析.色谱条件Sphrisorb ODS(250 mm×4.0 mm,5 μm)分析柱;流动相为甲醇-水(53∶47,V/V);流速0.9 mL*min-1;检测波长320 nm;柱温27 ℃;进样量20 μL.结果CZP在0.01～0.40 μg*mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9,n=6),最低检测浓度0.5 ng*mL-1(rSN≥3).平均回收率为100.8%,日内及日间RSD＜5%.结论该方法较为灵敏、准确,适用于临床氯硝西泮血药浓度监测.     

高效液相色谱法测定人血清卡铂浓度

卡铂(carboplatin)又名碳铂,为二代铂族抗癌药物,具有与顺铂相似的抗瘤谱和作用强度,但其副作用较顺铂低,已在临床广泛使用.测定卡铂血药浓度有衍生化法和超滤法,但前者操作较繁琐,后者处理血样需特殊装置不易普及[1-3].为探讨该药的体内过程及剂量一效应关系,笔者建立高效液相色谱法测定人血清中卡铂浓度,报道如下.     

高效液相色谱法同时测定美容霜中3种有效成分

目的：测定美容霜中替硝唑、西咪替丁、氯霉素三者的含量。方法：高效液相色谱法,以苯巴比妥为内标,Nova-pakC18柱,甲醇-水-冰乙酸-二正丁胺为流动相;检测波长205nm。结果：一次进样可完成3种化学性质不同组分的含量测定,替硝唑1.575-25.0ug.ml^-1,西咪替丁3.15-50.0ug.ml^-1,氯霉素0.945-15.0ug.ml^-1浓度范围内,每个组分与内标峰面积的比与其浓度呈良好的线性关系;平均回收率分别为100.9%（RSD1.2%);98.0%(RSD0.7%),91.0%(RSD0.8%)。结论：方法简便、快速、准确,可作为日常质控手段。