负载连翘苷的外泌体递药系统制备及体外评价

目的:制备负载连翘苷(phil)的外泌体(exos)递药系统(phil-exos),并考察其对人肺上皮腺癌细胞A549迁移能力的影响。方法:采用差速-超高速离心法结合超滤法获取小鼠肺泡巨噬细胞(MHS)来源的外泌体,超声法制备phil-exos并测定其粒径及电位,采用透射电子显微镜观察其形态,蛋白质免疫印迹法鉴定标志蛋白CD63和Alix,激光共聚焦显微镜观察A549细胞对phil-exos的摄取,划痕实验考察其对A549细胞迁移能力的影响。结果:phil-exos的平均粒径为(139±1)nm,聚合物分散系数(PDI)为(0.237±0.023),Zeta电位为-(19.33±0.17)mV;外观呈类球状,具有茶托状膜结构;外泌体及phil-exos对Alix高表达,CD63低表达。A549细胞8 h时对phil-exos摄取良好,且24 h时phil的迁移抑制率为46.30%,phil-exos的迁移抑制率为81.99%,phil-exos对A549细胞迁移能力具有效抑制作用。结论:phil-exos制备成功,其可显著降低A549细胞的迁移能力。     

慢性阻塞性肺病稳定期模型大鼠支气管肺泡灌洗液的代谢组学研究

目的：基于代谢组学方法研究慢性阻塞性肺病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）稳定期大鼠支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）的潜在生物标志物。方法：采用烟熏联合细菌反复感染的方法制备COPD稳定期模型大鼠。采用超高效液相色谱-串联质谱技术采集大鼠的BALF数据，利用多元统计分析软件筛选差异代谢物，再结合数据库鉴定潜在生物标志物，并进行代谢通路分析。结果：多元统计分析结果显示，正常组与模型组BALF代谢物发生显著变化。通过比对数据库，共鉴定出30个差异性代谢物，主要涉及到体内的氨酰基-tRNA的生物合成，甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸的代谢，鞘脂代谢，苯丙氨酸代谢和花生四烯酸代谢等8条代谢通路。结论：基于代谢组学研究COPD稳定期的BALF代谢物变化，寻找COPD稳定期相关代谢标志物，为治疗COPD提供理论参考。     

上消化道疾病患者幽门螺旋杆菌抗体谱检测结果分析

目的探讨蛋白芯片技术检测幽门螺旋杆菌（Hp）抗体谱在上消化道疾病诊断的价值。方法应用蛋白芯片技术对557例上消化道疾病患者（慢性胃炎258例、胃溃疡73例、十二指肠溃疡32例、上消化道肿瘤56例）和138例健康体检（对照组）进行Hp抗体谱（CagA、VacA、Ure、Hsp60、RdxA）检测。结果 Hp感染率胃溃疡与十二指肠溃疡分别为73.9%、75%均明显高于慢性胃炎组为53.9%、对照组52.8%差异有统计学意义（χ2=15.413,P=0.004）;Ⅰ型Hp感染率消化性溃疡组为59.3%、上消化道肿瘤组55.1%均明显高于对照组的26.5%、慢性胃炎组的33.1%,差异有统计学意义（P〈0.01）;上消化道肿瘤组的Hsp60抗体阳性率46.4%明显高于其他4组（χ2 79.43,P〈0.000）。结论 Hp是上消化道疾病的主要致病菌株;Hsp60抗体可以作为人群上消化道肿瘤筛选的一种标志物;Hp蛋白芯片技术是一种敏感、特异、快速的诊断Hp感染的方法。     

抑菌试验结合正交试验优选清咽爽喉喷雾剂的提取工艺

目的：优选清咽爽喉喷雾剂的提取工艺。方法：采用正交试验设计法和药敏纸片琼脂扩散法,以苦参碱含量、抑菌环直径为指标,优选处方最佳醇提水沉工艺。结果：综合抑菌试验和药物含量评分结果发现,在醇提工艺中,各影响因素的顺序依次为乙醇体积分数（P<0.01） > 提取次数（P<0.05） > 提取时间（P>0.05）。综合各种因素,最佳提取工艺为以85%乙醇为溶剂,液料比10：1,回流提取2次,每次2 h,20倍水沉24 h,苦参碱的提取率为75.57%（RSD=2.33%, n=3）,抑菌环直径（2.5±0.3）cm（n=3）。结论：该工艺稳定可靠,重现性较好,所得提取物具有较好的抑菌效果,可为该药的后期研发提供参考。