泪腺上皮细胞凋亡与丙酸睾酮的抑制效应

目的:分析丙酸睾酮抑制泪腺上皮细胞凋亡的机制,为干眼症的性激素防治提供科学的理论依据。方法:实验于2003-09/2004-01在重庆医科大学附属第一医院中心实验室完成。①实验材料:二三月龄新西兰健康白色家兔30只,无眼疾,雌性,体质量1.5～2.5kg。丙酸睾酮(产品批号:020902,上海通用药业股份有限公司产品),用DMSO配成储存液,-70℃保存。分析纯过氧化氢购自北方同正生物技术发展有限公司。②实验方法:经耳缘静脉注射空气处死家兔,按常规无菌操作行泪腺摘除术,酶消化法分离兔泪腺上皮细胞。取二三代培养的泪腺上皮细胞,按约1×108L-1密度接种于预置小玻片的24孔板内,培养4d后,加入浓度为1×10-8,1×10-7,1×10-6,1×10-5mol/L丙酸睾酮,继续培养24h,另以未加丙酸睾酮的培养液培养的同期传代的泪腺上皮细胞作空白对照。培养24h后,再分别加入终浓度为100μmol/LH2O2于不同浓度丙酸睾酮组继续培养60min,另以未加丙酸睾酮的DMEM/F12培养液培养的同期传代的泪腺上皮细胞作对照。③实验评估:应用TUNEL法检测泪腺上皮细胞凋亡,采用免疫细胞化学法检测泪腺上皮细胞Bax和Bcl-2表达。结果:①丙酸睾酮对过氧化氢诱导的泪腺上皮细胞凋亡的影响:与单纯加入100μmol/LH2O2组比较,加入不同浓度丙酸睾酮组泪腺上皮细胞凋亡率均明显下降且丙酸睾酮的抗凋亡作用呈现一定范围内的剂量依赖性[(15.15±1.05)%,(13.94±0.73)%,(12.51±0.91)%,(10.63±0.78)%,(8.19±0.85)%,P<0.01]。②免疫细胞化学法检测Bcl-2和Bax蛋白表达:与单纯加100μmol/LH2O2组相比较,同时加入1×10-8,1×10-7,1×10-6,1×10-5mol/L丙酸睾酮各组均可使泪腺上皮细胞Bcl-2的表达明显增强和Bax的表达明显减弱,且与丙酸睾酮的剂量呈正相关(Bcl-2:0.92±0.10,1.01±0.08,1.12±0.06,1.24±0.12,1.37±0.11;Bax:2.28±0.09,2.17±0.11,2.06±0.07,1.91±0.13,1.77±0.10,P<0.01)。结论:丙酸睾酮抑制泪腺上皮细胞凋亡的机制可能与凋亡调节相关基因Bcl-2表达上调和Bax表达下调有关。     

兔泪腺上皮细胞的体外分离和培养

分离和培养泪腺上皮细胞，是研究泪腺功能的基础，也是研究干眼症发病机制的重要方法之一。本实验参考国内外文献，探索出稳定和经济的分离方法，报告如下。     

眼前段碱烧伤后视网膜病理改变及氧自由基反应

眼前段碱性化学伤是临床上常见的致盲性眼外伤之一，对其研究多年来主要集中在眼前段，后段的研究很少。角膜重度碱烧伤后眼前节将发生一系列严重的组织病理学改变，如组织变性坏死、炎症细胞浸润等，同时角膜和房水中丙二醛（MDA）含量显著升高，超氧化物歧化酶（SOD）活性显著下降。碱烧伤后视网膜组织中是否也存在类似改变呢？我们通过建立大鼠角膜碱烧伤模型，对眼前段碱烧伤后视网膜组织的病理改变及氧自由基反应进行了初步研究，现将结果报告如下。[第一段]     

大鼠角膜碱烧伤后视网膜细胞凋亡的研究

目的研究严重眼前段碱烧伤后视网膜组织内的细胞凋亡情况,以及Fas抗原(Fas)和Fas配体(Fas ligand,FasL)表达与细胞凋亡的关系。方法制作大鼠角膜严重碱烧伤模型。在烧伤的不同阶段,应用TUNEL法检测凋亡细胞、免疫组织化学法检测Fas、FasL在视网膜组织中的表达和变化,并与正常大鼠相对照。结果正常视网膜中基本未见TUNEL阳性细胞,碱烧伤3d后在视网膜神经节细胞、内核层细胞和内层血管内皮细胞中均可见不同程度的TUNEL阳性细胞。正常视网膜未见Fas表达,实验各组中均可见不同程度的Fas表达;正常视网膜FasL弱表达,实验各组FasL表达显著增强,与正常对照组比较差异有显著性(P<0.01)。Fas和FasL表达与凋亡之间具有较好的相关性,相关系数分别为0.899(P<0.01)和0.504(P<0.01)。结论严重眼前段碱烧伤后视网膜组织细胞存在异常凋亡,凋亡可能与Fas/FasL系统有关。     

整合素在眼表疾病中的研究现状

整合素作为粘附分子的重要成分在多种生理与病理过程中具有重要作用。它在角膜新生血管形成、上皮损伤修复、大泡性角膜病变、角膜与眼表炎症、角膜移植、糖尿病角膜病变、圆锥角膜等病变过程中扮演重要角色。     

重症急性视神经炎综合治疗的短期疗效评价

目的探讨综合治疗重症急性视神经炎的短期疗效。方法回顾分析2003年1月至2005年12月在我院诊断为急性视神经炎且入院视力等于或低于眼前手动的患者17例（27眼），随机分为A、B两组，A组8例，13只眼，采用单纯甲基强的松龙冲击治疗3～5d，并按正规程序减量治疗。B组9例，14只眼，采用综合治疗，对比观察两组治疗后5d，10d，3个月后视力、视觉诱发电位（VEP）等的变化。结果治疗后出现A、B两组视力改善，VEP异常恢复，其中B组疗效优于A组，两组比较差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论综合治疗重症急性视神经炎的疗效确切，可以缩短视功能改善的过程，帮助患者更快度过黑暗时期。     

地震灾害中颅脑外伤合并眼伤的临床特点和对策分析

目的：分析地震灾害中颅脑外伤合并眼伤的临床特点和诊治难点,为制定合理的对策提供参考。方法：统计分析2008年5月12日汶川地震中绵阳地区颅脑外伤合并眼伤96例的疾病资料,以及早期处理方案和效果。结果：颅脑外伤合并的眼伤中钝挫伤比例高（99．5％）,昏迷患者容易忽视眼部损伤。结论：在生命抢救后的功能抢救阶段及时检查眼部情况有利于早期发现和挽救视功能;根据灾情整合眼科医疗资源,利用原有团队建制,有利于提高医院对大规模灾情的紧急应对效率。     

地震带医院常设应急救援队在5·12大地震后早期救援中的作用

目的 探讨地震带医院常设应急救援队应对地震等自然灾害的能力.方法 总结四川省绵阳市中心医院常设应急救援队在5·12汶川地震灾害救援中各方面的作用.结果 本次地震中该院虽因灾损失严重,但在极其艰苦的条件下和持续不断的余震中救治2000余人次,收治重灾区重危伤员1557人,安全转运844人次.其中医院常设应急救援队在震后早期的救援工作作用突出,在急救援队基础上成立临时指挥中心,以点带面推广原有应急救援机制到全院各科室,队员成为救援骨干成为有力的救援者和组织者,安定民心,保障了救援工作的顺利进行.结论 地震带公立医院常设应急救援队的建设和完善对地震等自然灾害的救援有着不可缺少的作用.     

改良式氩激光周边虹膜成形术(ALPI)治疗原发性急性闭角型青光眼(PACG)的临床分析

目的观察改良式180°氩激光周边虹膜成形术(ALPI)治疗原发性急性闭角型青光眼(PACG)的有效性和安全性。方法 15例首次发作的36h内的原发性急性闭角型青光眼(PACG),未予以药物抗青光眼治疗,采用改良式180°氩激光周边虹膜成形术(ALPI)治疗,观察治疗前后的视力、角膜水肿变化情况及眼压是否下降,以及房角改变情况。结果 15例患者ALPI术后眼压均下降,120min后眼压均正常。眼压下降后,角膜均由水肿变透明。治疗眼的房角均较对侧眼增宽。患者均能耐受治疗,未出现并发症。结论改良式180°氩激光周边虹膜成形术(ALPI)治疗首次发作的36h内的原发性急性闭角型青光眼(PACG),能迅速开放房角,降低眼压,缩小了传统360°的治疗范围,减少了并发症的发生,尤其适合于有全身合并症的患者,成为另一种治疗PACG的行之有效的新方法。     

抗炎治疗干眼的疗效观察

目的 观察局部使用人工泪液、糖皮质激素眼液,口服四环素类(多西环素)抗炎药治疗中、重度蒸发过强性干眼的疗效.方法 对2012年5月至2013年4月在绵阳市中心医院眼科门诊,按照国际干眼研究组(DEWS)标准分级为2及3级干眼、SⅠt正常患者46例(92只眼),按级分层后分为两组,实验组24例(48只眼),其中2级11例(22只眼);对照组22例(44只眼),其中2级10例(20只眼).实验组以局部滴用0.2％卡波姆眼用凝胶、0.5％氯替泼诺滴眼液联合口服四环素类抗炎药(多西环素)治疗;对照组仅局部滴用0.2％卡波姆眼用凝胶、0.5％氯替泼诺滴眼液治疗.在治疗前及治疗后2、4、6、8周询问患者自觉症状、裂隙灯显微镜检查、角膜荧光染色(FL),泪膜破裂时间(BUT)、Schirmer Ⅰ试验(S Ⅰ t)及眼压.各项指标采用x2检验和t检验.结果 治疗8周后,治疗前眼表炎症分在10分以上者,治疗组与对照组的症状体征综合评分均降低,分别为(15.2±2.5)、(21.0±5.1)分,BUT均较治疗前延长(9.5±2.8)、(6.5±2.2)s,FL较治疗前减低(3.6±1.3)、(5.5±2.3)分,治疗前后两者比较差异均有统计学意义(P＜0.05);而治疗前眼表炎症分在10分以下者,治疗组与对照组的疗效症状评分均降低,分别为(11.7±2.2)、(12.2±3.2)分,BUT均较治疗前延长(10.2±2.6)、(10.4±2.7)s,FL较治疗前减低(2.8±1.5)、(2.5±1.2)分,治疗前后两者比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 对眼表有明显炎症患者(眼表炎症分在10分以上者)局部点用0.2％卡波姆眼用凝胶、0.5％氯替泼诺滴眼液联合口服四环素类抗炎药(多西环素)治疗较未使用四环素类抗炎药效果更好.而对眼表炎症较轻患者(眼表炎症分在10分以下者)可不口服四环素类抗炎药.