相对密闭环境配药新模式对药品中不溶性微粒的影响

目的研究相对密闭环境药品配置模式对药品中不溶性微粒的影响。方法检测Ⅰ类环境和Ⅲ类环境中常规配药模式与相对密闭环境配药模式的不溶性微粒数量,比较不同配药模式对药品中不溶性微粒数量的影响。结果手工配药时Ⅰ类环境中1～10μm各组别不溶性微粒数少于Ⅲ类环境,差异均有统计学意义(均P0.05)。采用相对密闭环境配药新模式时Ⅰ类环境中1～15μm各组别不溶性微粒数与Ⅲ类环境比较,差异均无统计学意义(均P0.05)。在Ⅲ类环境中采用相对密闭环境配药新模式时1～20μm各组别不溶性微粒数少于手工配药,差异均有统计学意义(均P0.05)。在Ⅰ类环境中采用相对密闭环境配药新模式时1～15μm各组别不溶性微粒数少于手工配药,差异均有统计学意义(均P0.05)。在I类环境中进行手工配药时1～15μm各组别不溶性微粒数均多于在Ⅲ类环境中进行相对密闭环境配药,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论相对密闭环境配药模式能有效降低药品配置过程中环境微粒进入静脉输液系统中。     

诱导人脐带MSCs分化为胰岛样细胞团的促成熟方案及机制

 [摘 要]目的:通过各种生物化学制剂的不同组合在体外诱导人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）向胰岛样细胞团（ILCs）分化,筛选出能表达激素原转化酶（PC）1和PC2的促成熟方案。方法:用胶原酶Ⅱ消化、过滤离心和不完全消化传代的方法从人的完整脐带中分离和纯化hUC-MSCs,流式细胞术、RT-PCR和免疫细胞荧光技术检测其干细胞标志物。选用A、B、C 3种方案诱导hUC-MSCs向ILCs分化：方案A为含10 μg/L 碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、10 μg/L 表皮生长因子（EGF）、10 mg/L银杏提取液（GBE）及2%胎牛血清（FCS）的高糖培养基IMDM;在方案A基础上加入10 μg/L尼克酰胺为方案B;在方案B基础上加入10 μg/L肝细胞生长因子（HGF）为方案C。在hUC-MSCs诱导前后,通过倒置显微镜观察其形态变化,采用RT-PCR、qPCR和Western blotting检测胰岛相关mRNA和蛋白,特别是PC1和 PC2的表达情况。结果:(1)细胞形态、表面相关抗原、干细胞特异基因的表达等情况表明hUC-MSCs可以从人脐带中被成功地分离和纯化;hUC-MSCs普遍表达nestin,轻微表达Isl1。(2) RT-PCR检测发现方案A诱导的ILCs有Glut-2和MafA mRNA表达,方案B诱导的ILCs有Glut-2、MafA、Nkx6.1和PC2 mRNA表达,方案C诱导的ILCs有Glut-2、MafA、Nkx6.1、PC2、Ngn3、Pdx1、PC1和胰岛素mRNA表达,提示A、B和C 3种方案诱导的细胞有逐渐成熟的趋势。qPCR检测也证实了PC1 mRNA仅在方案C中有表达,PC2 mRNA在方案B和方案C中均有表达,但方案C中PC2 mRNA的表达量显著高于方案B（P<0.01）;Western blotting结果也表明PC1蛋白只在方案C中有表达;PC2酶原（ProPC2）与PC2在方案B和方案C中都有表达,且它们在方案C中的表达量均显著高于方案B(P<0.01)。结论: （1）hUC-MSCs具有向胰岛祖细胞或胰岛细胞分化的潜能;(2)方案C中尼克酰胺和HGF可促进hUC-MSCs向ILCs分化,使ILCs表达PC1并上调PC2;相对于方案A和B,方案C是一种促成熟方案。