生物样品中酸性鞘磷脂酶活性测定

目的建立高效液相色谱测定生物样品中酸性鞘磷脂酶(ASM)活性的方法。方法收集成年昆明种小鼠血、尿、肝组织匀浆等生物样品,以BODIPY C12-Spm为荧光底物孵育2 h,采用ACQUITY BEH C18色谱柱,流动相为甲醇:13 mmol/L乙酸钠溶液=95∶5,流速0.8 m L/min,进样量10μL,荧光检测器检测,激发波长505 nm,发射波长540 nm。结果荧光产物B12-Cer在反向色谱解析中,4 min即可有效分离,在40~5 000 nmol/L范围内线性良好,相关系数为0.998 8,方法检出限为5.86 nmol/L;小鼠血、尿、肝细胞匀浆中ASM活性分别为(927.40±189.62)、(122.88±49.84)、(422.51±65.81)nmol/(μL·h)。结论基于荧光底物的高效液相色谱检测方法简便、稳定、灵敏度高,可用于微量生物样品中ASM活性检测。     

hOGG1基因在Cr(Ⅵ)诱导线粒体DNA氧化损伤中的作用

目的探讨hOGG1基因在Cr(Ⅵ)诱导线粒体DNA氧化损伤中的修复作用。方法取不同浓度的Cr(Ⅵ)(0、2、8和32μmol/L)处理L-02肝细胞24h,分别测定细胞内活性氧簇(ROS)与hOGG1 mRNA表达水平和线粒体内8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)与hOGG1基因表达的人类8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶蛋白(hOGG1蛋白)水平。结果 8μmol/L和32μmol/L剂量组与对照组比较,细胞内ROS平均水平及线粒体内8-OhdG平均水平均明显增加(P<0.05),而hOGG1基因mRNA水平和线粒体内hOGG1蛋白水平,与对照组比较,2μmol/L剂量组两者水平均上升(P<0.05),32μmol/L剂量组两者水平均降低(P<0.05)。结论 Cr(Ⅵ)可诱导细胞内ROS水平增加,引起线粒体DNA氧化损伤,而hOGG1基因表达水平的改变,影响了线粒体DNA的修复能力。hOGG1基因在Cr(Ⅵ)诱导线粒体DNA氧化损伤中起到了重要的作用。     

赤霉素对雌性大鼠早期生长发育及胰岛素样生长因子表达水平的影响

目的探讨植物生长调节剂赤霉素对雌性SD大鼠生长发育及胰岛素样生长因子(IGF-1)表达水平的影响。方法选择刚断乳雌性SD大鼠40只,随机分为4组,即对照组,低、中、高赤霉素剂量组,分别按照0、2、100和200mg/kg赤霉素剂量经口灌胃,连续15天,每天记录身长、体重、阴道开口情况。染毒结束,剖杀受试动物,获得肝脏、卵巢、子宫,计算脏器系数。提取肝组织RNA进行RT-PCR,检测肝内IGF-1、胰岛素样生长因子捆绑蛋白(IGFBP-1)基因的表达水平。结果各组间大鼠的身长、体重,阴道开口时间,子宫、卵巢的脏器系数差异无显著性(P>0.05),肝组织内IGF-1、IGFBP-1平均表达水平差异亦无显著性(P>0.05),但高剂量组部分样本出现IGF-1、IGFBP-1表达强度倒置的现象。高剂量组动物的肝脏系数小于对照组(P<0.05)。结论在0～200mg/kg剂量范围赤霉素接触对雌性SD大鼠生长发育、肝脏内IGF-1及其捆绑蛋白的表达影响不明显,但200mg/kg剂量的赤霉素摄入可能对其肝脏产生损伤。     

葡萄球菌中β-内酰胺类抗生素抗性系统的分子基础

β-内酰胺类抗生素(β-lactams)是某些真菌(如产黄青霉)分泌的用来抵御细菌感染的次生代谢产物,它通过不可逆地抑制细胞壁合成和修复的有关酶类,来杀灭正在生长分裂的细菌细胞[1].自从Fleming 1929年发现青霉素具有杀菌作用以来,β-内酰胺类抗生素仍被广泛使用.但是,随着抗生素的大规模应用,细菌对抗生素的抗性问题已凸现出来.近年来葡萄球菌的抗性机制研究,已有大量报导[2～3].为进一步了解葡萄球菌中调控β-内酰胺类抗生素抗性的信号传导机制与途径,本文就葡萄球菌中β-内酰胺类抗生素抗性系统的分子基础综述如下.     

“电解—过滤法”处理肠衣废水的卫生学评价

为了保护水资源,我们于1985、1986年对湖南某肠衣厂的废水处理效果进行了评价。 1.评价对象:某肠衣厂,位于长沙市南郊。每天排放废水400～500吨。废水排入湘江,排放口位于B自来水厂上游一公里处。该厂于1984年采用“电解-过滤法”处理废     

用混合细菌作指示生物评价工业废水综合毒性的实验研究

用混合细菌作指示生物，建立了富含重金属工业废水综合毒性的评价方法。结果表明，混合细菌总脱氢酶活性的抑制率（％）随工业废水中重金属浓度的增加而增加，按现行的国家《污水综合排放标准》（ＧＢ８９７８－８８）配制模拟混合废水、其中的重金属（Ｈｇ、Ｃｄ、Ｃｒ＋６、Ａｓ·Ｐｂ）浓度（Ｘ）与细菌总脱氢酶活性抑制率（Ｙ）之间的回归方程为：Ｙ＝－８．５＋２０．６Ｘ．相关系数（ｒ）＝０．９８４．二者呈直线相关性（Ｐ＜０．０１）。用这一回方程评价了长沙市８家工厂生产废水的综合毒性和一家工厂废水外理装置对废水综合毒性的去除效果，这一方法在实际应用上较为理想。     

六价铬致DNA损伤机制的研究进展

六价铬致DNA损伤的几种常见形式及机制包括DNA断裂、8-羟脱氧鸟嘌呤形成、DNA加合物的形成及碱基突变等.目前有效的拮抗六价铬致DNA损伤的物质主要包括维生素C和一些植物性的物质.本文主要对六价铬致DNA损伤的常见形式、机制及两种拮抗损伤的物质作一简述.     

敌百虫促高脂饮食致兔动脉粥样硬化作用研究

对氧磷酶（paraoxonase，简称PONl）是体内分解有机磷酸酯类（organophosphate，以下简称OP）的酶。它在肝脏合成并与高密度脂蛋白（HDL）结合，具有抗氧化和过氧化物酶样作用。文献报道，长期与0P接触可导致体内PONl活性降低和心血管系统疾病的发生”。我们推测机体长期暴露于低量OP农药，可消耗体内的PON1，继而导致动脉粥样硬化（AS）发生。本文报道兔长期口服低剂量敌百虫对血管内皮功能及对高脂饮食致AS作用的影响。     

硒对六价铬诱导L-02肝细胞DNA损伤的影响

目的研究硒(Se)对六价铬Cr(Ⅵ)诱导肝细胞DNA损伤的影响,探讨Se对Cr(Ⅵ)中毒预防的可能性。方法分别用8和32μmol/L重铬酸钾(K2Cr2O7)溶液处理在含有0.1和10μmol/L亚硒酸钠(Na2SeO3)中培养的L-O2细胞,采用单细胞凝胶电泳(SCGE)检测L-02肝细胞DNA损伤程度。结果8和32μmol/L K2Cr2O7单独作用时,可引起L-02肝细胞DNA损伤。当Na2SeO3与K2Cr2O7联合作用时,0.1μmol/L NaSeO3对8、32μmol/L K2Cr2O7诱导的DNA损伤存在明显的拮抗作用,而10μmol/L Na2SeO3单独存在与K2Cr2O7相互作用均具有诱导DNA损伤的作用。结论Se对L-02肝细胞DNA损伤的影响具有剂量依赖性,即Se在较低处理组水平具有降低Cr(Ⅵ)对L-02肝细胞DNA损伤的作用,在高处理组水平能诱导细胞DNA损伤。     

HPV16致癌分子机制的研究进展

人乳头瘤病毒 (Ｈｕｍａｎｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓｅｓ,ＨＰＶ)是一类分子长度大约为 8ｋｂ左右的小分子环状双股ＤＮＡ病毒。通过ＤＮＡ序列分析 ,至今已发现人乳头瘤病毒大约有 70多型 ,不同型ＨＰＶ常常分布于不同组织的上皮表面 ,大约有 2 0多型ＨＰＶ嗜好感染粘膜上皮 ,特别是生殖道的粘膜上皮[1] 。大量分子流行病学研究资料表明 ,人乳头瘤病毒 16型(ＨＰＶ16 )与生殖道肿瘤密切相关 ,在宫颈癌活检组织中 ,ＨＰＶ16的阳性检出率显著高于正常宫颈组织[2 ] 。动物致癌实验发现 ,ＨＰＶ16及其Ｅ6Ｅ7基因可明显诱导小鼠宫颈癌的发生…