1-溴丙烷经口染毒致大鼠周围神经病模型的建立

目的 观察1-溴丙烷(1-bromopropane,1-BP)的周围神经毒性,建立1-BP经口染毒致周围神经病的动物模型.方法 40只雄性Wistar大鼠,随机分为低、中、高剂量组和对照组,每组10只;将1-BP溶于玉米油中,分别经口给予200、400、800 mg/kg的1-BP,对照组给予等体积玉米油,灌胃体积均为0.2 ml/100 g,每日1次,每周5d,连续16周.定期观察各组大鼠步态,测定后肢抓力和后肢撑力,染毒8周和16周时检测血液学和生化指标.结果 高剂量组染毒8～16周、中剂量组染毒14～16周和低剂量组染毒15、16周大鼠的步态评分均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).与对照组比较,高剂量组染毒9、12、14周大鼠后肢抓力明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);染毒16周时,动物后肢瘫痪.染毒16周时,中、低剂量组大鼠后肢抓力分别为对照组的72.6％和91.2％,差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05).染毒12、14、16周时,高剂量组大鼠后肢撑力指数明显高于对照组;染毒14、16周时,中剂量组大鼠后肢撑力指数明显高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).染毒8周高、中剂量组和染毒16周高、中、低剂量组血清中丙氨酸转氨酶(ALT)活力均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 神经系统是1-BP毒作用的敏感靶器官,1-BP暴露可导致大鼠周围神经病.     

人β-防御素2在大肠杆菌中的高效表达和纯化

目的：研究具有生物学活性的人防御素2（HBD2）多肽在大肠杆菌中的原核高效表达的可行性及融合表达蛋白的分离纯化技术。方法：PCR扩增不合前导序列的HBD2成熟肽的编码框全长的cDNA片段（smHBD2-cDNA），利用BglⅡ和BamHⅠ同尾酶构建多拷贝串联的nsmHBD2-cDNA的克隆载体，利用NcolⅠ和HindⅢ限制性内切酶构建融合表达载体pET32-nsmHBD2-cDNA，在大肠杆菌中BL21（DE3）中诱导表达含HBD2的融合蛋白，SDS-PAGE分析产量。可溶蛋白经亲和层析、肠激酶酶切、离子交换层析等方法分离、纯化HBD2多肽。采用液体培养法，测定重组人β防御素2对大肠杆菌的抑菌活性。结果：构建了n为1、2、4或8倍的多拷贝串联nsmHBD2-cDNA表达载体，1、2和4倍smHBD2-cDNA的可溶蛋白比例分别为52％、48％和31％；而8倍HBD2-cDNA几乎不合可溶蛋白，目标蛋白以包含体形式表达，集中在不可溶部分。重组HBD2对E．coli K12 D31有较强的抑制作用，在终浓度约为0．4至0．5μg／ml时，90％细胞的生长被抑制。结论：采用融合表达、多拷贝串联表达方式，可增加产物长度以弱化蛋白酶的降解作用，也减弱了目标蛋白产物对宿主的毒性；适当的多拷贝串联基因可以提高HBD2的产量，但拷贝数过高会影响重组蛋白表达产量，且易形成不溶蛋白；在大肠杆菌中可达到具有生物学活性的HBD2多肽的原核高效表达。     

磷酸三邻甲苯酯对母鸡神经组织线粒体超微结构及功能的影响

目的观察磷酸三邻甲苯酯(tri-ortho-cresyl phosphate,TOCP)对母鸡神经组织线粒体超微结构及功能的影响,探讨有机磷化合物诱导的迟发性神经毒性(organophosphorus easter-induced delayed neurotoxicity,OPIDN)的机制。方法成年罗曼母鸡16只,随机分为750mg/kg TOCP染毒组(n=12)和对照组(n=4)。TOCP按0.65ml/kg灌胃量一次性染毒,对照组给予等体积玉米油。分别于染毒后第1、5、15、21天观察线粒体结构的改变。另取成年罗曼母鸡96只,随机分为低、中、高剂量染毒组和1个对照组(n=24)。染毒组分别按185、375、750mg/kg经灌胃一次性染毒TOCP,对照组给予等体积玉米油。分别于染毒后第1、5、15、21天采用MTT比色法检测大脑、脊髓和周围神经(坐骨神经和胫神经)中琥珀酸脱氢酶活力的改变来间接代表线粒体呼吸链酶活力的改变。结果 TOCP组母鸡中枢神经系统大脑和脊髓中线粒体结构从染毒第5天开始出现病理改变,并随着OPIDN症状的发展逐渐加重;胫神经在第1天即可观察到线粒体及髓鞘的病理改变,且逐渐加重。染毒组与对照组相比,大脑中线粒体呼吸链酶活力的改变不明显,高剂量组在第15天和第21天出现明显降低,差异有统计学意义(P0.05);脊髓与周围神经中线粒体呼吸链酶活力的变化趋势大致相同,中、高剂量组均从第5天开始明显下降,差异有统计学意义(P0.05),低剂量组的最低峰值较中、高剂量组出现稍晚。各剂量组间及各时间点之间没有显著差异。结论 TOCP能使母鸡神经组织线粒体结构发生改变,并影响线粒体呼吸链关键酶的活力。     

基层医院急诊科护理人员不良情绪状态及其影响因素分析

目的 了解基层医院护理人员不良情绪状态及其影响因素,以期为其情绪的改善提供依据.方法 选取东方市中医院急诊科82名护理人员为调查对象,于2016年9月采用Zung量表对其不良情绪状态进行评估,然后比较不同年龄、护龄、文化程度、职称、社会支持程度及职业倦怠感护理人员的评估结果,同时采用Logistic回归分析上述因素与护理人员不良情绪的关系.结果 82名基层医院护理人员的Zung量表焦虑及抑郁评分均较高,且年龄较高、护龄较长、文化程度较低、职称较低、社会支持程度较低及职业倦怠感较强的护理人员焦虑及抑郁评分明显高于年龄较低、护龄较短、文化程度较高、职称较高、社会支持程度较高及职业倦怠感较轻的护理人员,差异均有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析结果显示,年龄、护龄、文化程度、职称、社会支持程度及职业倦怠感是护理人员焦虑及抑郁情绪的影响因素(P<0.05).结论 基层医院护理人员不良情绪状态较为明显,且年龄、护龄、文化程度、职称、社会支持程度及职业倦怠感等均是其重要的影响因素.     

DHA预防百草枯诱导大鼠肺组织Smad7和SnoN表达的降低

目的观察百草枯(paraquate,PQ)对大鼠肺组织中Smad7和SnoN蛋白表达的影响和DHA的干预作用。方法体重200～220g的SPF级雄性Wistar大鼠40只,随机分为4组:正常对照组、模型组、DHA干预组和DHA对照组,每组10只。DHA干预组和DHA对照组,分别经灌胃给予DHA(500mg/kg.bw),正常对照组和模型组给予等体积玉米油,给予DHA第8日,DHA干预组和模型组一次性经灌胃给予50mg/kg.bw PQ染毒,正常对照组和DHA对照组均给予等体积生理盐水。PQ染毒后,持续给予DHA,于染毒后第35日,处死动物,取出肺组织,制备组织匀浆,测定还原性谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量,同时制备肺组织切片,免疫组织化学方法观察肺组织中Smad7及SnoN蛋白表达情况。结果各组肺组织中GSH含量无显著差异(P>0.05);与正常对照组比较,模型组大鼠肺组织中Smad7,SnoN蛋白表达水平显著下降(P<0.01,P<0.01);DHA干预组大鼠肺组织中Smad7,SnoN蛋白表达水平明显高于模型组(P<0.01,P<0.05),与正常对照组无显著差别(P>0.05)。结论 DHA能够逆转PQ诱导肺纤维化负向调节因子Smad7和SnoN的减少,对PQ导致的肺组织损伤具有一定的预防性保护作用。     

大蒜油对正己烷致大鼠周围神经病变影响

目的探讨大蒜油(garlic oil,GO)对正己烷(n-hexane)所致大鼠周围神经病变的影响。方法雄性SD大鼠60只,随机分为对照组、模型组、大蒜油低、高剂量组,灌胃给予大蒜油40,80 mg/(kg.bw),1 h后灌胃给予正己烷2 500 mg/(kg.bw),模型组灌胃给予等量正己烷,每周5次,持续8周,测定神经行为学指标。结果模型组大鼠后肢撑力指数(9.58 cm)与对照组(7.28 cm)比较明显增加(P0.05),大蒜油低、高剂量组后肢撑力指数分别为7.94和6.99 cm,与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);对照、模型、大蒜油低、高剂量组倒挂网格指数分别为10.0,3.0,6.0和8.0 s,大蒜油组倒挂网格指数低于对照组(P0.05),高于模型组(P0.05);大蒜油组步态明显优于模型组(P0.05)。结论大蒜油具有保护正己烷所致大鼠周围神经病变的作用。