白藜芦醇对小鼠非酒精性脂肪性肝炎干预作用

目的探讨自噬通路在白藜芦醇(RSV)减轻蛋氨酸-胆碱缺乏(MCD)饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)中的作用及机制。方法雄性C57BL/6J小鼠40只,随机分为对照组、模型组、白藜芦醇低、高剂量组(100、250 mg/kg)(n=10);对照组和模型组小鼠分别喂饲基础饲料和MCD饲料,白藜芦醇组在喂饲MCD饲料同时给予RSV灌胃,4周后测定小鼠体重、肝重、血清中谷丙转氨酶(ALT)含量,分离小鼠肝脏,测定甘油三酯(TG)和丙二醛含量,苏木素-伊红染色观察肝组织形态学变化,油红O染色观察脂肪变性情况,Western blot检测自噬标志蛋白LC3及各通路蛋白的表达量。结果与对照组比较,模型组小鼠血清ALT和肝组织TG含量[分别为(144.17±0.32)U/L和(112.77±0.88)mg/g]明显升高(P<0.01),肝脏LC3Ⅱ和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)表达水平[分别为(1.27±0.01)、(1.81±0.09)]升高(P<0.05);与模型组比较,高剂量白藜芦醇组小鼠血清ALT含量、肝组织TG含量[分别为(83.16±0.40)U/L、(40.75±0.19)mg/g]明显降低(P<0.01),LC3Ⅱ、AMPK蛋白表达水平[分别为(2.25±0.14)、(3.01±0.16)]明显升高(P<0.01);蛋白激酶B(Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)表达水平无明显变化。结论白藜芦醇可以改善MCD饮食诱导的NASH,其机制可能与激活自噬AMPK途径有关。     

染料木黄酮对高脂饮食喂养大鼠肝脏脂质代谢和AMPK磷酸化的影响

目的探讨染料木黄酮（Gen）对高脂饮食喂养大鼠肝脂质代谢和肝脏腺苷酸环化酶蛋白激酶（AMPK）磷酸化的影响。方法36只大鼠适应性喂养1周后随机分为4组：正常对照组（正常组）、模型对照组（模型组）、Gen高剂量干预组（Gen高组）和Gen低剂量干预组（Gen低组）。正常组大鼠给予基础饲料D12450B（脂肪供能占10％）喂养,模型组给予D12492高脂饲料（脂肪供能占60％）喂养,Gen高组给予D12492高脂饲料喂养和8mg／kgGen灌胃干预,Gen低组给予D12492高脂饲料喂养和4mg／kgGen灌胃干预。持续喂养12周后,处死所有大鼠。取血和肝组织进行相关指标的检测。全自动生化检测仪检测血清和肝组织匀浆甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）水平,游离脂肪酸（FFA）试剂盒检测血清和肝组织匀浆FFA水平,Westernblot法检测肝组织总AMPK和磷酸化腺苷酸环化酶蛋白激酶（pAMPK）的表达。结果与正常组比,模型组大鼠肝脏血清和肝组织TG、TC、FFA及血清LDL—C明显升高（P〈0．05或P〈0．01）,肝组织pAMPK水平显著降低（P〈0．01）。与模型组相比,Gen低组大鼠血FFA、肝FFA和TG含量明显降低（P〈0．05或P〈0．01）;Gen高组大鼠血TC、TG、LDL—C、FFA和肝TG、FFA含量明显低于模型组大鼠（P〈0．05或P〈0．01）。与模型对照组相比,低、高剂量Gen干预均能显著上调pAMPK水平（P〈0．01和P〈0．05）;但各组大鼠肝组织总AMPK水平差异无统计学意义（P〉0．05）。结论染料木黄酮能够改善12周高脂饮食诱导的大鼠肝脂肪代谢紊乱,减轻肝脏脂质沉积,其作用机制可能与其增加pAMPK水平有关。     

染料木黄酮对油酸诱导脂肪变HepG2细胞糖脂水平和HMG-CoA还原酶的影响

目的研究染料木黄酮（genistein,Gen）对油酸（oleicacid,OA）诱导的脂肪变HepG2细胞内HMG．CoA还原酶水平以及糖、脂水平的影响。方法将HepG2细胞在含有0～50txmol／L的Gen、0．5mmol／L的OA的培养基内培养24h,收集细胞分别用试剂盒测定3．羟基．3．甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（HMGR）、胆固醇（Tc）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）的含量;同时,收集培养基上清液,用试剂盒测定葡萄糖消耗量。结果Gen可降低细胞内HMG．CoA还原酶的水平和细胞对葡萄糖的消耗。提高细胞内TC和HDL．C含量。结论Gen能改善OA诱导的脂肪变HepG2细胞内的糖脂代谢情况。     

白藜芦醇对蛋氨酸胆碱缺乏培养基诱导肝细胞损伤的保护作用

目的研究白藜芦醇对蛋氨酸胆碱缺乏(methionine-choline-deficient,MCD)培养基诱导的小鼠正常肝细胞(alpha monse liver 12,AML12)损伤的保护作用。方法体外培养小鼠正常肝细胞AML12,建立蛋氨酸胆碱缺乏培养基诱导的肝细胞损伤模型,用不同浓度白藜芦醇(25、50、100μmol/L)进行干预24h,检测细胞的增值活性,以及细胞培养基上清液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱基酶(LDH)活性和细胞中丙二醛(MDA)水平、甘油三酯(TG)含量,检测细胞中炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平及其m RNA水平,并检测微管相关蛋白1轻链3(MAP1-LC3)蛋白的表达。结果与MCD损伤组相比,各白藜芦醇干预组细胞活力明显增强,白藜芦醇可以显著抑制MCD导致的肝细胞ALT,AST,LDH的释放,降低肝细胞内MDA水平和TG含量,降低炎性细胞因子水平,上调MAP1-LC3的表达。结论白藜芦醇对MCD诱导的的小鼠肝AML12细胞损伤有明显的保护作用,自噬可能在其中起到一定的作用。     

医学营养治疗妊娠期糖尿病对妊娠结局的影响

目的:分析医学营养治疗妊娠期糖尿病对妊娠结局影响。方法:根据意向性原则,2018年1月至6月在广州市第一人民医院采用分层随机选取60例新诊断的妊娠期糖尿病患者,分为对照组和观察组,每组30例。对照组给予口头营养指导,观察组给予基于血糖负荷的食物交换份法的医学营养疗法。观察治疗前与治疗后两组患者血糖指标变化,观察两组患者妊娠并发症发生情况和围生儿不良结局发生情况。结果:治疗前,两组患者空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2h PG)、糖化血红蛋白(HbA1c)比较,差异无统计学意义(P 0.05);治疗后,观察组患者FBG、PBG、HbA1c显著低于对照组,组间比较,差异具有统计学意义(P 0.05);观察组患者妊娠并发症发生率显著低于对照组,组间比较,差异具有统计学意义(P 0.05);观察组围生儿不良结局发生率显著低于对照组,组间比较,差异具有统计学意义(P 0.05)。结论:与单纯口头营养指导比较,在此基础上联合基于血糖负荷的食物交换份法的医学营养疗法能改善妊娠期糖尿病患者血糖指标、降低妊娠并发症发生率,降低围生儿不良结局发生率。     

染料木黄酮对HepG2细胞胆固醇代谢和SREBP-2通路的调控作用

目的探讨染料木黄酮（Gen）对HepG2人肝癌细胞胆固醇代谢和SREBP-2通路的调节作用。方法体外培养HepG2细胞,将HepG2细胞在含有0、0．01、0．10、1．00、10．00、50．00、100．00μmol／LGen的培养液内分别培养24、48、72h后,用MTT法检测细胞增殖活性。用分别含0、0．01、1．00、10．00、50．00μmol／LGen的完全培养液培养HepG2细胞24h,收集细胞,分别进行细胞内总胆固醇（TC）含量检测、实时荧光定量PCR检测细胞低密度脂蛋白受体（ldlr）、3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（hmgcr）基因的mRNA表达和蛋白印迹法检测核转录因子SREBP-2的表达。结果0．01、0．10、1．00、10．00、50．00、100．00μmol／LGen分别作用于HepG2细胞24h,0．01、0．10、1．00μmol／LGen组细胞增殖率高于溶剂对照组（均P〈0．05）;作用48、72h,1．00、10．00、50．00、100．00μmol／LGen组细胞增殖率均低于溶剂对照组（均P〈0．05）。1.00、10．00、50．00μmoL／LGen与HepG2细胞共同孵育24h,HepG2细胞内TC水平分别为（1．81±0．15）、（2．29±0．17）、（2．88±0．08）mmol／L,均高于对照组[（1．44±0．17）mmol／L],且随着Gen浓度升高,呈增加趋势（R2=0．48,P〈0．01）;各Gen实验组的hmgcr和ldlr基因的mRNA表达水平随着Gen浓度升高而升高（R2分别为0．53、0．79,均P〈0．01）。1．00、10．00、50．00μmol／LGen组蛋白表达灰度值均高于对照组（均P〈0．01）。结论染料木黄酮能够调节细胞内胆固醇的代谢,其作用机制可能与调控SREBP-2通路有关。     

染料木黄酮对脂肪变HepG2细胞甘油三酯水平和Lipin 1表达的影响

目的 研究染料木黄酮(genistein,Gen)对油酸(oleic acid,OA)诱导的脂肪变HepG2细胞胞核内Lipin1水平以及培养基和胞浆内甘油三酯水平的影响.方法 在HepG2细胞中分别或联合加入0～640μmol/L的Gen,0～2.0 mmol/L的OA干预,用MTT法测定细胞活性,以确定适宜的OA建模和Gen的干预浓度.之后,采用OA建立HepG2细胞脂肪变模型,用Gen干预24h,收集培养基上清和细胞分别测定甘油三酯水平,Western blot检测胞核Lipin1的表达.结果0.5 mmol/L OA为造模最佳干预浓度,可同时提高培养基和细胞中甘油三酯的含量,10～50 μmol/L的Gen可以减轻HepG2细胞脂肪变的状态,并且呈现剂量效应关系(P＜0.05),同时,胞核内Lipin1水平增加(P＜0.05).结论 Gen能抑制OA诱导的HepG2细胞脂肪变,并可能与Lipin1的核转移有关.