EGFP和CM-Dil示踪骨髓间充质干细胞构建组织工程骨的体内研究

目的:应用增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)和CM-Dil标记技术,观察组织工程骨在体内形成过程中种子细胞的变化和转归.方法:分别用EGFP慢病毒表达和CM-Dil染料的方法标记比格犬骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells,BMSCs),MTT法检测标记细胞的体外增殖能力.BMSCs接种珊瑚支架体外成骨诱导7天后,将未标记组、EGFP组和CM-Dil组分别植入裸鼠背部皮下,空白支架作为阴性对照.术后4、8、12周取材,HE染色观察成骨情况,EGFP组采用GFP免疫组化、CM-Dil组冰冻切片荧光显微镜下示踪BMSCs在体内的变化.结果:两种标记技术能高效标记BMSCs,标记前后细胞的体外增殖无显著性差异(P>0.05).细胞-支架复合物植入体内12周后有新生骨形成,标记细胞数量随时间延长而逐渐减少,12周后仍显示有部分标记细胞存活.结论:EGFP和CM-Dil可用于示踪组织工程种子细胞,通过示踪说明BMSCs在体内组织工程骨成骨过程中发挥了重要作用.     

肾综合征出血热合并多器官功能衰竭460例临床分析

目的:探讨肾综合征出血热合并多器官功能衰竭的发生机制、衰竭器官发生频率和临床分期及预后的相互关系。方法:回顾性分析我院近4年来460例肾综合征出血热合并多器官功能衰竭患者的临床资料。结果:460例患者中重型患者114例,危重型患者116例,死亡85例,病死率为18.5%。各个临床分期中发生器官衰竭数比例各不相同,在疾病的进展至低血压休克期和少尿期,出现多个脏器序贯衰竭的比例逐渐增加;病死率随着器官衰竭数的增加而呈正相关;发病年龄、发病后入院时间、有无血液透析或血液净化等因素与治愈率、死亡率显著相关。结论:保护易衰竭器官,及时防治休克、DIC、大出血、肾衰、水电解质紊乱和继发感染,避免或减少MODS的发生是治疗肾综合症出血热合并多器官衰竭的关键;为了提高肾综合征出血热的治愈率,应严格遵循"早发现、早休息、早治疗"的治疗原则,同时早期进行抗病毒治疗和使用免疫调节剂。     

缺血修饰白蛋白在急性脑血管病中的动态变化

目的观察缺血修饰白蛋白（IMA）在急性脑血管病的动态变化。方法采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测脑梗死52例、脑出血34例、短暂性脑缺血发作38例和健康对照组40例的血清IMA浓度。分别对急性脑血管病患者和健康对照组4个时间点（发病或体检后6h、12h、24h、48h）的IMA水平进行检测。结果4组不同时间点的IMA水平比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。脑梗死、脑出血、短暂性脑缺血发作组6hIMA水平均高于对照组（P〈0．05）,且脑梗死〉脑出血〉短暂性脑缺血发作组（P〈0．05）;脑出血组6h、12h、24h、48h组内比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;短暂性脑缺血发作组发病12hIMA与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论IMA可能为急性脑血管病的鉴别诊断提供参考。     

早年应激致雌性大鼠认知功能障碍中脑脊液氨基酸变化及意义

目的 研究母婴分离应激雌性大鼠成年后脑脊液(cerebro-spinal fluid,CSF)氨基酸的变化,为探索早年应激致认知障碍的发生机制提供新的科学依据。方法 采用母婴分离（maternal separation,MS）应激的方法建立早年应激大鼠模型,随机分对照组（CON）和应激组（MS）。在实验大鼠成年后采用旷场、物体识别及水迷宫实验评价认知功能,尼氏染色观察脑海马和前额叶皮质区神经细胞数量及排列,全自动蛋白表达分析系统（WESTM）检测突触后致密物95(PSD-95)蛋白表达水平,超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）靶向定量分析大鼠脑脊液氨基酸含量。结果 与CON组大鼠相比,MS组大鼠旷场评分、物体识别认知指数、水迷宫穿台次数显著降低(P<0.01),水迷宫寻台时间显著延长（P<0.001),海马CA3区、前额叶皮质区神经细胞排列疏松,数量明显减少（P<0.05）,海马、前额叶皮质突触可塑性蛋白标记物PDS-95表达水平明显降低(P<0.05、P<0.01)。MS组大鼠脑脊液中筛选具有潜在生物学效应的氨基酸为苏氨酸(P<0.05...     

肝炎后肝硬化合并原发性腹膜炎103例临床分析

肝炎后肝硬化合并原发性腹膜炎(PBP)者日渐增多,PBP发生后常使肝病迅速加重,导致肝昏迷、感染性休克、肝肾综合症和消化道出血等.病死率高达60～80%,早期诊断PBP、综合治疗是提高存活率的关键.1 临床资料1.1 一般资料 男87例,女16例,年龄20～40岁47例,41～50岁38例,51～60岁11例,61～76岁7例,患病年龄以中青年为主.1.2 症状与体征 发热<,37℃44例,38～38,5℃31例,38.6～39℃17例,>39℃11例.恶心32例,呕吐27例,腹痛45例,腹胀59例,腹部压痛53例,反跳痛40例,肌紧张及板状腹11例.本组无腹痛又无压痛与反跳痛者12例,可能与大量腹水有关.     

应激性认知障碍小鼠脑内同型半胱氨酸的代谢变化研究

目的 通过检测应激小鼠海马和前额叶皮质同型半胱氨酸(Hcy)及其代谢酶水平,了解应激对脑内Hcy代谢的影响,为应激性认知障碍的Hcy损伤机制补充新的证据.方法 24只C57小鼠随机分为对照组和3周慢性束缚应激组,采用高压液相色谱分别检测血浆以及海马和前额叶皮质组织匀浆液中Hcy水平,采用皮质酮酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测血清皮质酮浓度,采用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western印迹检测海马和前额叶皮质4种Hcy代谢酶,即甲硫氨酸合酶(MS)、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)、胱硫醚β-合成酶(CBS)和胱硫醚γ-裂解酶(CSE)的mRNA和蛋白水平.结果 3周慢性束缚应激(CRS)导致小鼠出现认知障碍样行为学改变,应激组小鼠血浆、海马和前额叶皮质Hcy水平均明显升高,但脑组织内Hcy的升高幅度较血浆小.与对照组相比,应激组小鼠海马与前额叶皮质的Hcy甲基化途径代谢酶MS和转硫途径代谢酶CSE表达水平显著降低;此外,应激小鼠海马的另一Hcy转硫途径代谢关键酶CBS也出现明显表达下调.结论 慢性应激时,脑内Hcy主要代谢酶表达显著降低,可能导致脑内Hcy异化代谢受阻,引起脑内Hcy蓄积并易化应激性认知功能障碍.     

应激性抑郁患者认知功能与脑内神经递质变化分析

目的 探讨应激性抑郁患者认知功能状况和神经递质特点.方法 对符合国际疾病分类第10版(ICD-10)抑郁症诊断标准,且发病前有应激性事件的抑郁患者,应用脑涨落图仪检测脑内神经递质水平,使用蒙特利尔认知评估测验(MoCA)评定认知功能,抑郁-焦虑-压力量表(DASS)评定心理健康状况.结果 应激性抑郁患者认知能力下降.DASS得分显示患者处于重度抑郁、重度焦虑及中度压力水平.MoCA总分与DASS总分负相关.去甲肾上腺素(NE)和多巴胺(DA)显著低于常模,而谷氨酸(Glu)和乙酰胆碱(Ach)显著高于常模(P<0.05).MoCA警觉性和计算力得分均与患者谷氨酸水平呈负相关,计算力与多巴胺水平呈正相关,谷氨酸可能是警觉性和计算力影响因素.结论 应激性抑郁患者认知功能下降可能与脑内神经递质失衡及负性情绪有关.     

慢性应激下脑内高糖诱导小鼠海马小胶质细胞M1型极化

目的 观察慢性应激下脑内葡萄糖含量对小鼠海马小胶质细胞极化类型的影响，探讨慢性应激致神经炎症的可能机制。方法 采用慢性不可预见温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)建立慢性应激小鼠模型，并随机分为对照组、应激组。采用葡萄糖检测试剂盒检测小鼠海马及血浆中葡萄糖含量，RT-PCR和ELISA技术检测海马肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-6 (IL-6)含量。采用免疫荧光技术检测海马小胶质细胞极化类型。细胞水平采用20μmol/L糖皮质激素（glucocorticoid,GC）和20 mmol/L葡萄糖干预小鼠小胶质细胞系BV2模拟慢性应激及高糖后检测炎性因子IL-6、IL-1β、TNF-α的含量。结果 应激组小鼠海马及血浆中葡萄糖含量均升高；应激组小鼠海马区M1型小胶质细胞标志物CD68表达增加，且TNF-α、IL-1β、IL-6含量均升高；20μmol/L的GC、20mmol/L的葡萄糖干预BV2细胞后IL-6、IL-1β、TNF-α水平均升高，且GC复合葡萄糖与GC组、葡萄糖组比较，IL-6...     

长期透析患者脑血管并发症的临床特征及影响因素

分析 2 1例并发脑血管疾病的长期透析患者临床资料 ,探讨长期透析患者脑血管并发症临床特征及影响因素。1　临床资料　　透析患者 112 3例中男 6 91例 ,女432例 ,透析中发生脑血管并发症 2 1例(1.87% ) ,脑血管并发症均经 CT或磁共振 (MRI)及临床确诊。 2 1例患者中男15例 ,女