基于规律成簇的间隔短回文重复序列及其相关蛋白技术检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA方法的建立

目的建立一种基于规律成簇的间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas13a)的乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)检测方法。方法提取2017年6月至2020年10月于首都医科大学附属北京佑安医院就诊的4例乙型肝炎患者肝脏总DNA后,使用HindⅢ内切酶和质粒安全性ATP依赖DNA酶(PSAD)分别进行酶切;根据松弛环状DNA(rcDNA)和cccDNA的结构差异,设计特异性扩增HBV cccDNA的引物,对酶切后的产物进行滚环扩增(RCA)和PCR扩增;并筛选crRNA,建立基于CRISPR/Cas13a技术的HBV cccDNA检测新方法。结果利用α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)和HBV表面抗原(HBsAg)引物对双重酶切后的产物进行扩增,验证产物中HBV基因组的存在;利用HBV cccDNA和HBV rcDNA引物对PSDA酶切后的产物扩增,验证了产物中只存在HBV cccDNA;利用RCA后的阳性样本作为模板梯度稀释,然后进行PCR扩增转录后使用CRISPR/Cas13a检测,计算出检测下限为10拷贝/μl。结论本研究建立了RCA-PCR-CRISPR-Cas13a的新型检测方法,可对HBV cccDNA进行高灵敏度和高特异性检测,为乙型肝炎患者抗病毒治疗评估、治疗终点的确定以及调整治疗方案提供了有效的监测手段。     

新上岗男护士存在的问题及对策

探讨男护士在新上岗期间的工作问题及对策。根据ICU新护士工作考评表对新上岗男女护士进行工作考评,比较男女护士在新上岗期间工作考核情况。男护士新上岗期间在职责完成、基础重病护理、沟通能力3项内容的考核得分低于同上岗女护士。加强对新上岗男护士的岗前培训,培养沟通能力,提高工作自信心。     

自动化流水线上质量指标智能监控系统的开发与应用

目的开发临床实验室质量指标智能统计系统,一键生成各项质量指标统计图,实现质量指标统计的实时性和智能化,实时监控检验全过程的关键环节,以提高检验报告的及时率和保证结果的准确性。方法参照我国2015年发布的临床检验质量指标WS/T 496-2017和ISO 15189:2012质量和能力认可准则要求,以SiemensAptio生化免疫自动化流水线中间体Centralink、Datalink为核心,结合Aptio自动化流水线各功能模块和实验室信息系统(LIS),利用数字化和互联网技术,自主开发实验室质量指标智能统计系统。结果本系统可实现统计的质量指标包括检验前阶段指标:抗凝标本凝集率、检验前周转时间(TAT)中位数等;检验中阶段指标:室内质控项目开展率、实验室内TAT中位数等;检验后阶段指标3项,分别为检验报告不正确率、危急值通报率、危急值通报及时率。另增加统计的质量指标分别为:检验项目仪器分配统计,标本来源及数量统计,流水线模块故障率,标本流程TAT和仪器TAT的统计。实现了检验全程质量指标的时段性数据自动统计、一键生成,并以柱状图、箱线图和饼状图形式呈现,达到质量指标智能统计、简便直观呈现的目的。传统的上述质量指标统计需专人2个工作日方能完成,现仅需1 s即可完成。结论借助自主开发的质量指标智能统计软件,可对检验分析全过程的各项质量指标统计实现实时性和智能化,有利于检验分析过程的精细化管理和质量控制的实时监控,有效提高工作效率,缩短TAT,达到持续改进目的。     

翻转课堂在留学生生理学实验教学中的应用

随着我国综合国力增强和高等教育国际化程度的提升,留学生规模不断扩大,已经成为高等教育的重要群体。如何确保留学生的本科教学质量,是目前各医学院校亟须解决的课题。综合留学生的个体特征,并总结锦州医科大学生理学教研室多年开展留学生生理学实验教学的实践和体会,在实际教学工作中采用翻转课堂的教学手段,旨在提高实验课的教学质量和留学生的学习兴趣,初步探索适合留学生生理学实验的教学方法,为我国医学教育国际化改革提供新思路。     

多指标综合评分法优选补正续骨颗粒最佳提取工艺

目的：优选补正续骨颗粒的提取工艺。方法采用 L9（34）正交试验法,以出膏率为考察指标,优选最佳水提取工艺,以川续断皂苷Ⅵ与柚皮苷总含量及出膏率综合评分为评价指标,优选最佳乙醇提取工艺。结果最佳水提取工艺为加6倍量水,提取2次,每次提取1 h。最佳乙醇提取工艺为加6倍量60％乙醇,提取3次,每次2 h。结论优选的提工艺稳定可行,适用于补正续骨颗粒的工业化生产。     

社区健康教育对2型糖尿病患者抑郁焦虑状态及糖代谢的影响

目的了解社区内2型糖尿病患者的抑郁和焦虑状况,探讨健康教育对患者抑郁、焦虑状态及糖代谢的影响.方法 选取重庆市沙坪坝区106例社区2型糖尿病患者,随机分为教育干预组和常规对照组,进行3个月的对照实验,运用抑郁、焦虑自评量表对患者进行心理测评,观察干预前后患者抑郁、焦虑情绪的变化及糖代谢情况.结果 2型糖尿病患者中抑郁、焦虑情绪评分显著高于我国国内常模,干预结束后,教育干预组患者抑郁、焦虑情绪得到明显改善,两组患者空腹血糖和糖化血红蛋白都有明显下降,教育干预组下降幅度更大.结论 健康教育可有效改善2型糖尿病患者的抑郁、焦虑情绪,改善血糖代谢,适合在社区糖尿病防治工作中应用推广.     

宁夏古赛细蠓复合组细微结构的研究

目的研究古塞细蠓复合组细微结构的变化规律,为种间鉴别提供科学依据。方法应用雄性和雌性成虫主要特征细微结构的鉴别方法。结果研究发现古塞细蠓复合组雄性成虫不同种抱器端节形态、大小,端部端突形态、有无鬃毛而有异;第9背板有无中突、突的形态、大小,背板中部有无小鬃、数量、着生部位及第9腹板凹陷宽窄、深浅和膜上微毛有无等均因种而异;不同种其雄性成虫阳基侧突膨端体形态、大小,内外缘有无突起、突的多少、位置、突的形态、大小,有无角化现象、角化部位及程度而有变化。阳茎中叶的发育程度、形态、大小,内外缘和端、基部有无突、突的多少、形态,有无角化现象、角化部位、程度及阳茎中叶端部有无色斑、色斑形态、大小均因种而有别。雌性成虫受精囊的数量、大小、形态、基部有无短颈、端部有无斑纹,囊的角化程度、长宽比值和触须第3节膨大的程度、形状、感觉器窝的分布位置、窝的大小、形态,触须第3节与第4节的比值均有种间差异。结论研究发现古塞细蠓复合组雄性成虫抱器、第9背腹板、阳基侧突膨端体、阳茎中叶和雌性成虫触须及受精囊的细微结构有着种间的变化规律。     

基于肠道菌群探讨张震“一体两翼、疏调气机”治疗肠易激综合征的作用机制

探讨张震“一体两翼、疏调气机”治疗肠易激综合征(IBS)的作用机制。IBS是一种慢性、功能性疾病，以腹痛和排便异常为主要表现。目前机制尚不明确，认为胃肠动力改变、脑-肠轴调节异常、低度黏膜炎症、内脏高敏感、精神心理因素等均可诱发该病。“一体两翼”即肝脾肾与IBS的发病有着紧密的联系，临床以“疏调气机”为治法治疗该病疗效明显。文章从肠道菌群与IBS的相关性及对IBS发病机制的影响出发，推测以“一体两翼、疏调气机”为指导治疗IBS可能通过调节肠道菌群恢复平衡实现。将名老中医学术结晶与西医学研究成果相结合，以期为临床运用及科研实践提供科学依据，促进中医药现代化研究的开展。     

缺氧复合氰化钠中毒对大鼠脑组织单胺类神经递质含量的影响

目的观察缺氧复合氰化钠(NaCN)中毒对大鼠脑组织单胺类神经递质含量的影响。方法128只雄性SD大鼠随机分为平原组和高原组,每组64只。平原组大鼠在常规实验室内处理,高原组于模拟海拔4 000m的高原低压舱内连续缺氧暴露3d,每天23.5h。高原组和平原组大鼠分别在模拟高原条件和平原条件下经腹腔注射NaCN 3.6mg/kg,于中毒0、0.5、2、6h麻醉取脑,冰上分离海马和纹状体组织,离心提取组织内蛋白质。HPLC法测定大鼠脑纹状体和海马组织多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)含量。结果平原组大鼠NaCN中毒0.5、2、6h脑纹状体和海马组织的DA、NE和5-HT含量与中毒0h比较变化不明显。高原组大鼠脑纹状体DA、NE、5-HT含量和海马组织NE、5-HT含量在NaCN中毒2h或6h与0h比较均显著下降。与平原组比较,高原组纹状体DA、NE、5-HT和海马组织NE、5-HT含量均明显降低(P<0.05或0.01)。结论高原缺氧后脑组织单胺类神经递质含量明显降低,而氰化物中毒可进一步加剧这一改变。     

益肾康颗粒质量标准研究

目的研究建立益肾康颗粒的质量标准。方法采用薄层色谱法对方中黄芪、丹参进行定性鉴别,采用HPLC法测定赤芍中芍药苷含量,Agilent TC-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,乙腈-0.3%冰醋酸（15∶85）为流动相,流速1.0 m L/min,检测波长230 nm,柱温25℃。结果薄层色谱斑点清晰、阴性液无干扰。芍药苷在0.263-1.315μg范围内呈现良好的线性关系（r=0.999 6）,平均回收率为98.83%（n=6,RSD=2.1%）。结论该方法准确、专属性强、重复性好,可以作为控制益肾康颗粒质量的方法。