BSL-2实验室开展SARS-CoV-2核酸检测过程中的生物安全管理

目的:总结生物安全二级(bio-safety level 2,BSL-2)实验室开展新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)核酸检测过程中的生物安全管理经验与效果。方法:检测样本来源于2020年2月21日到2020年11月5日送达中国疾控中心病毒病预防控制所病毒资源中心科室的人体咽拭子、鼻拭子、痰液、尿液、便液等。在遵循常规生物安全管理要求的基础上,在检测过程中积极进行人员、岗位、标本、过程、安全巡视等生物安全管理。结果:共开展了27692人次样本的SARS-CoV-2核酸检测,平均每天检测(2.32±0.11)批样本,每批平均检测(87.22±6.83)件样本,BSL-2实验室平均每天工作时间(3.43±0.23)h。在检测过程中未出现任何生物安全问题。结论:BSL-2实验室在长时间的SARS-CoV-2核酸检测过程中,要积极从多方面加强生物安全管理,从而保障检测工作安全有序进行。     

日本血吸虫纯净活虫卵制备方法的改进

为改进日本血吸虫无菌活虫卵的制备方法，将感染血吸虫尾蚴38～45d的家兔剖杀，于无菌条件下摘取肝脏，匀浆，以360目分样筛过筛，截留成熟及未成熟虫卵，用1．2％生理盐水反复洗涤数次后收集虫卵，置0.25％胰蛋白酶消化液中消化2h，当混杂组织被消化成单个细胞后，再用360目分样筛过滤去除杂质细胞，用含100μl／ml氨苄青霉素与硫酸链霉素双抗的Earle’s平衡盐溶液反复洗涤数次，获得大量纯净、活性高达（95.1-6.4）％的无菌虫卵。本法收集虫卵工作效率较高。     

加味菊花承气汤治疗天行赤眼

加味菊花承气汤治疗天行赤眼王衍海山东省肥城市安临站镇卫生院（２７１６０３）主题词％加味菊花承气汤／治疗应用天行赤眼／中药疗法天行赤眼亦称时行火眼，俗称红眼，系风热毒邪、时行疫气所致，常致暴发流行。轻者眼睑及白睛红赤浮肿，痛痒交作，怕热羞明，眵泪粘稠，...     

《内经》对对中风“偏枯”的论治

对《内经》中风“偏枯”的认识进行了探讨。在发病机制上,《内经》对中风有中外风立论的一面,同时强调过食肥甘,心胃内虚,本气不足,及情志失调,也是中风发病的重要因素。论述对中风治疗“益气活血通络法”治疗中风危重证的“豁痰开窍启闭法”,“益气回阳固脱法”的意义及方药运用。     

2020年冬季青岛肺炎患儿人鼻病毒毒株的分离与鉴定

目的:青岛地区2020年儿童肺炎住院患者人鼻病毒(human rhinovims,HRV)的分离与鉴定,为儿童肺炎的预防提供科学数据。方法:收集2020年儿童肺炎住院患者的咽拭子样本,共计98份。应用荧光定量RT-PCR方法进行常见呼吸道病毒筛查,鉴定出HRV阳性的样本接种于H1-HeLa细胞,观察细胞病变。荧光定量R...     

病原微生物实验室生物安全和质量管理的关系探讨

建国近60年来,虽然我国传染病防治取得了巨大成就,但传染病的威胁依然存在。除了艾滋病、乙型病毒性肝炎和结核病,近年来我国还面临着新发、突发传染病以及多发、常见传染病暴发、大流行的威胁,新发、突发传染病不断出现,严重威胁我国社会稳定和经济发展。这就对从事疾病预防与控制相关的实验研究和教学工作的病原微生物实验室提出了更     

日本血吸虫消减雌性成虫cDNA文库的建立及其特异表达基因的筛选

目的 筛选雌性日本血吸虫特异表达基因。方法 感染日本血吸虫6周的家兔,用静脉灌注法收集成虫,经核糖核酸固定液固定,分别提取雌、雄成虫总RNA,纯化后获得mRNA,并反转录为cDNA。用抑制性消减杂交技术(SSH)构建雌、雄成虫正向消减(雌虫消减雄虫)及反向消减(雄虫消减雌虫)cDNA文库。用斑点杂交法筛选差异表达基因,挑选目标基因片段(与正向消减探针杂交的信号明显高于与反向消减探针杂交信号的克隆)进行测序、同源性搜索及基因功能预测分析。以日本血吸虫肌动蛋白(actin)基因作内参照,用半定量PCR(semi-quantitative PCR)鉴定目标基因在雌、雄虫体内的表达。结果 得到正向消减及反向消减cDNA文库,斑点杂交筛选出50个雌虫特异性表达的克隆,经测序得到42个表达序列标签(EST),其中,有17个基因(占40.5%)与已知日本血吸虫卵壳蛋白基因高度同源;17个基因(占40.5%)与日本血吸虫未知基因高度同源、且有一小片段与卵壳蛋白基因高度同源;有8个基因(占19.0%)与日本血吸虫其他未知基因高度同源。半定量PCR结果,6个基因在雌虫体内的表达水平明显高于雄虫,分别与GenBank的血吸虫卵壳蛋白基因AY222885、AY222895、AB017097、AF519182、M32281及血吸虫其他基因AY813556高度同源。结论 构建了雌、雄成虫正向消减及反向消减cDNA文库。用SSH可筛选日本血吸虫雌性特异性表达基因。     

卡托普利致干咳5例临床分析

卡托普利口服有效的血管紧张素转化酶抑制,对多种类型高血压均有明显降压作用,并能改善充血性心力衰竭患者的心脏功能。但在其近几年的患者应用中,出现了较为剧烈咳嗽症状。笔者在近期患者用药调查中发现该药有此种不良反应的高血压5例,现报告如下。     

日本血吸虫性别特异性基因的研究进展

血吸虫病是一种重要的人畜共患病,在世界范围内广泛分布,严重危害人体健康。本文以近年来国外在血吸虫基因的性别特异性方面的研究为依据,对血吸虫性别特异性基因的调控及克隆进行了综述。     

白纹伊蚊感染登革病毒后病毒特异性piRNAs分析

目的 筛选并分析白纹伊蚊感染登革病毒后病毒特异性vsRNAs与vpiRNAs.方法 白纹伊蚊羽化后2～4d雌性成蚊显微注射DENV-2病毒NGC株,对照组注射生理盐水.8d后提取样品总RNA,分离小RNA,通过illumina Hiseq 2000测序仪进行测序分析.以SOAP2软件与DENV-2基因组和互补序列进行比对.对病毒特异性的vsRNAs与vpiRNAs的长度、碱基与链偏好性、基因组分布进行分析.结果 对于感染蚊虫,我们共计获得3835个特异的DENV-2来源的vsRNAs,其中395个特异性的vpiRNAs.94.99％ vpiRNAs主要来源于病毒的正链基因组.vpiRNAs在DENV-2基因组上的分布也具有偏向性,最高峰位于病毒非结构蛋白NS5编码区域的3＆#39;末端.第10位碱基具有较强的腺嘌呤偏好性,但第1位碱基不具有尿嘧啶偏好性;也无典型“乒乓”扩增循环的特征.结论 白纹伊蚊感染登革病毒后,体内出现病毒特异性vsRNAs与vpiRNAs,对其鉴定与分析将为在白纹伊蚊抗病毒免疫研究提供理论基础.