泉州市2009年甲型H1N1流感基因特性分析

目的 了解福建省泉州市2009年甲型H1N1流感病毒的HA和NA基因特征,探讨该病毒的遗传变异及分子特性.方法 采集泉州市甲型H1N1流感患者咽拭子,采用实时荧光聚合酶链反应方法检测病毒核酸及MDCK细胞培养进行病毒分离、鉴定,提取其中2株代表性毒株病毒核糖核酸(RNA),采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增病毒HA和NA基因,纯化产物进行核苷酸序列测定,用DNAstar megalign软件进行序列分析.结果 1 020份咽拭子检出甲型H1N1流感病毒核酸阳性200份;季节性流感病毒核酸阳性70份,其中H3N2亚型53份,H1N1亚型14份,B型3份,并分离到29株甲型H1N1流感病毒株;HA基因核苷酸序列测定显示,该毒株与北美流行株高度同源,由HA基因核苷酸序列推导的氨基酸系列与疫苗株A/Brisbane/59/2007比较,有22个位于抗原决定簇的氨基酸位点发生变异,但受体结合特异性仍为人样受体,NA基因耐药性位点分析显示,对达菲药物依然敏感.结论 2009年泉州市甲型H1N1流感流行毒株与北美流行株高度同源,相对于疫苗代表株出现了HA蛋白抗原性漂移.     

荧光定量PCR在军团菌监测中的应用

目的发展一种敏感、快速、特异的检测军团菌的方法,并与运用常规的细菌培养方法所检测结果相比较。方法分别用传统的细菌培养法和以鉴定嗜肺军团菌种水平的mip设计引物的荧光定量PCR方法对68份公共场所中央空调的冷却塔水、客房热水、冷凝水进行检测,通过检测结果比较,评价该方法在实际工作中的应用。结果传统的细菌分离培养共有20份军团菌培养阳性,阳性检出率为29.4%,而以Mip基因为引物,对68份浓缩后的水样进行荧光定量PCR扩增共检出32份为嗜肺军团菌阳性,阳性检出率为47.1%,且细菌分离培养阳性的标本荧光定量PCR均阳性。结论荧光定量PCR法检测阳性率明显高于细菌培养法,且快速、敏感、特异;值得在疾病监测筛查检验中推广应用。     

静功的外动和“脱胎换骨”

静功的外动和“脱胎换骨”林锦忠梁士丰的《自发（五禽戏）动功》、赵金香的《鹤翔庄·站桩功》等，通过一定时间的静站后，身体中内气发动，自发出种种形体的动作。这种“动自静生”的现象，在使人认识“内气”存在上、在气功自我治病健身的效果上，都有毋庸置疑的作用，...     

2009年泉州市H1N1流感监测及基因特性分析

目的 了解2009年泉州地区H1N1流感监测情况,分析泉州市H1N1流感病毒的HA和NA基因特征,探讨该病毒的遗传变异及分子特性.方法 对泉州市H1N1流感监测期间的病人咽拭子采用real-time RT-PCR方法检测病毒核酸,MDCK细胞培养进行病毒分离、鉴定,并提取其中2株代表性毒株病毒RNA;采用RT-PCR扩增病毒HA和NA基因,纯化产物进行核苷酸序列测定;用DNAStar Megalign软件进行序列分析.结果 1020份咽拭子中有200份为H1N1流感病毒核酸阳性,70份季节性流感病毒核酸阳性,其中53份为H3N2亚型,14份为H1N1亚型,3份为B型,并分离到29株甲型H1N1流感病毒株.HA基因经核苷酸序列测定显示,该毒株与北美流行株高度同源,由HA基因核苷酸序列推导的氨基酸系列与疫苗株A/Brisbane/59/2007相比,有22个位于抗原决定簇的氨基酸位点发生变异,但受体结合特异性仍为人样受体.NA基因耐药性位点分析,显示对达菲药物依然敏感.结论 2009年泉州市H1N1流感流行毒株与北美流行株高度同源,相对于疫苗代表株出现了HA蛋白抗原性的改变.     

脏腑炼丹功.坤功动功

脏腑炼丹功·坤功动功·林锦忠·“脏腑炼丹功”为南宗道家秘传的上乘功法。其每部功按性别分为乾功（男性的功法）、坤功．（女性的功法）；按动静分为动功、静功。其功法古朴、简明，易学易练，不出偏差，老幼皆宜，而已在医疗和增和功力上效果显著。我于１９７７年从一...     

强症与长寿

我国当代著名的新诗诗人牛汉在《生与死》中写道：“……勇敢的人死一千次仍勇敢地活着，／而懦弱的人仅仅死一回就懦弱地死去了。／死去一千次仍庄严神奇地活着的人，我见过，／懦弱的人经不住一次死亡的威胁，我见得更多。”本文列举的都是与癌魔斗争10年以上长寿者演奏的生命凯歌。     

癌症与长寿

我国当代著名的新诗诗人牛汉在<生与死>中写道:"……勇敢的人死一千次仍勇敢地活着,/而懦弱的人仅仅死一回就懦弱地死去了./死去一千次仍庄严神奇地活着的人,我见过,/懦弱的人经不住一次死亡的威胁,我见得更多."本文列举的都是与癌魔斗争10年以上长寿者演奏的生命凯歌.     

泉州市流感疫情实验室检测及H3N2亚型基因特性分析

目的 了解2009年泉州地区流感流行及病毒株的变异情况,探讨流感病毒基因的变异与流感流行的关系.方法 对泉州市198例流感患者的咽拭子采用MDCK细胞培养进行病毒分离,经血清学试验鉴定分型和实时荧光RT-PCR方法检测病毒核酸.对其中4株毒株提取病毒RNA,采用RT-PCR扩增病毒HA1基因,纯化产物进行核苷酸序列测定,用DNAstar megalign软件分析基因.结果 198份咽拭子中有98份为H3N2亚型流感病毒核酸阳性,分离到62株H3N2亚型流感病毒,HA1基因经核苷酸序列测定显示,其基因特性更接近于A/Ningbo/333/2008,核苷酸同源性为98.7%,与A/Xiamen/70/2004的同源性为96.8%,由HA1基因核苷酸序列推导的氨基酸系列与疫苗株A/Brisbane/10/2007相比,有7个氨基酸位点发生变异,其中有1个位点位于抗原决定簇A区(144),有2个位点位于抗原决定簇B区(158、189),种系发生树分析也证实HA1基因存在一定差异.结论引起2009年泉州市流感在部分集体单位流行的病毒为H3N2亚型,其基因特性和抗原性与疫苗株相比均发生了一定变异.

Abstract：

Objective To obtain the information of the 2009 influenza outbreak and the variations of influenza virus strains in quanzhou, and explore the relationship between the genetic variation of influenza virus and influenza epidemic. Methods During the influenza outbreak in quanzhou,one hundred and ninetyeight throat swabs specimens from the patients with influenza were collected. Viruses were isolated with MDCK cells and identified with serological test, followed by real-time RT-PCR. RNA of four influenza virus strains were extracted, then HA1 gene was amplified by RT-PCR. The purified PCR products were sequenced. The data were analyzed with the software DNAstar megalign. Results Total 98 pieces of H3N2 subtype influenza virus nucleic acid were detected in 198 throat swabs specimens,among which 62 influenza virus strains were identified as subtype influenza A( H3N2 ). The sequencing results of HA1 gene in these positive strains showed that their genetic characterization were more closed to strains A/Ningbo/333/2008 with a nucleotide homology of 98.7%, which was 96.8% as compared with A/Xiamen/70/2004. The amino acids sequences deduced from the nucleotide sequences in HA1 region of the isolated strain had 7 mutant sites compared with A/Brisbane/10/2007 vaccine strain. One variant amino acids were found located in the antigenic determinant sites A( 144 ), two were in the sites B( 158,189 ). Phylogenetic analysis also confirmed the difference in HAl domain. Conclusion The influenza virus strains causing the flu outbreak among some communities of quanzhou in 2009 are subtype influenza A ( H3N2 ), whose genetic characterization and antigenicity were different from the vaccine strain.     

气功修炼与性健康

中国传统气功,历来关注"性"。练气功增强人体健康,也增强性功能,练气功不禁止适度性生活。正常的适度的性生活有三大功能：１．生育功能;２．健康长寿功能;３．性快乐功能。笔者是"脏腑炼丹功"掌门人。"脏腑炼丹功"主张并实行练气功不禁止正常的适度的性生活;而且练...     

RT-PCR法检测诺如病毒结果分析

目的通过比较2种检测诺如病毒（NV）的方法,为临床实验室病毒检测提供参考依据。方法用荧光定量RT-PCR和ELISA法对泉州地区多起流行性急性胃肠炎事件中病人标本进行NV检测,观察方法的敏感性和特异性。结果荧光定量RT-PCR法阳性检出率（86.5%）高于ELISA法（43.7%）;以ELISA法为标准,荧光定量RT-PCR法的敏感性为94.5%,特异性为19.7%,两者的Kappa值=0.128,相关系数r=0.207,一致性较差。荧光定量RT-PCR法敏感性较高。结论荧光定量RT-PCR法敏感性较高,可用于应急快速检NV,但其特异性不高。