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目的探讨原钙黏蛋白7(protocadherin 7, Pcdh7)基因在促进小鼠皮层神经元细胞凋亡中的作用及可能机制。方法原代培养的C57BL/6小鼠皮层神经元细胞,随机分为空载组(转染空白质粒)、Pcdh7过表达组(转染Pcdh7过表达质粒)、Ca~(2+)通道阻滞组(转染Pcdh7过表达质粒及Ca~(2+)通道抑制剂西尼地平)。转染48 h,采用流式细胞仪检测3组神经元细胞内Ca~(2+)荧光强度,CCK-8法检测3组神经元细胞存活率,荧光探针法检测3组神经元细胞凋亡率。结果 Pcdh7过表达组神经元细胞内Ca~(2+)荧光强度[(30.57±4.34)MFI]高于空载组[(18.60±0.57)MFI]和Ca~(2+)通道阻滞组[(18.63±1.97)MFI](P0.05),空载组与Ca~(2+)通道阻滞组比较差异无统计学意义(P0.05);Pcdh7过表达组神经元细胞存活率吸光度值(0.64±0.04)低于空载组(1.01±0.03)和Ca~(2+)通道阻滞组(0.84±0.02)(P0.05),且Ca~(2+)通道阻滞组低于空载组(P0.05);Pcdh7过表达组神经元细胞凋亡率[(34.10±4.00)%]高于空载组[(13.56±2.48)%]和Ca~(2+)通道阻滞组[(13.98±3.00)%](P0.05),空载组与Ca~(2+)通道阻滞组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论过表达Pcdh7基因可诱导小鼠皮层神经元细胞凋亡,其机制可能与促进细胞内Ca~(2+)内流有关。 相似文献
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目的探讨过表达原钙黏蛋白7(Pcdh7)基因对小鼠原代皮层神经元突起发育的影响。方法体外原代培养C57/B6小鼠胚胎18.5 d的大脑皮层神经元,随机分为空白对照组、实验对照组(空载组)和过表达原钙黏蛋白7基因组(过表达组)。运用免疫细胞化学术检测神经元突起的标记物β-Tubulin Ⅲ的表达来反映各组培养的神经元轴突的长度和初级树突分支数,同时,采用Western blot检测各组神经元Pcdh7及磷酸化丝切蛋白的表达水平。结果过表达Pcdh7基因后,其皮层神经元轴突长度[(247.4±99.38)μm]显著高于对照组和实验对照组[分别为(179.4±97.91)μm和(172.1±65.20)μm],差异有统计学意义(P0.01),但其初级树突分支数(2.74±1.302)却明显低于对照组和空载组(分别为3.726±0.890和3.793±1.196)(P0.01);而Western blot结果显示,当原代培养的神经元过表达Pcdh7基因时,与对照组相比,其磷酸化丝切蛋白的表达水平明显降低(P0.01)。结论在原代培养的小鼠皮层神经元中过表达Pcdh7基因,在致其神经元轴突过度生长的同时,并抑制其树突产生分支。其机制可能与下调磷酸化丝切蛋白的表达水平相关。 相似文献
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肝纤维化是慢性肝病发展至肝硬化的必经阶段,肝硬化是各种慢性肝病的终末期改变,其早期诊断对及时治疗和预后非常重要。目前,肝纤维化和肝硬化的诊断方法主要包括肝活组织检查、超声、CT和MRI等。肝活组织检查是诊断肝纤维化及肝硬化程度的金标准,但由于其侵袭性及样本误差,临床应用受到限制。常规的非侵入性措施不能满足肝纤维及肝硬化的诊断要求。因此,寻找一种新的肝纤维化及肝硬化血清学标志物已成为研究热点。相关研究表明,血清高尔基体蛋白73是一种可用于肝纤维化及肝硬化诊断的血清标志物,有较大的临床应用价值。对目前临床上常用的肝纤维化和肝硬化诊断方法进行了陈述,并阐述了高尔基体蛋白73的生物学特征及其在肝纤维化及肝硬化诊断中的价值。 相似文献
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目的 探讨血清高尔基体蛋白73(GP73)与肝硬化的临床意义及与影像学指标的关系。方法 选择2016年1月至2018年12月吉林大学第一医院收治肝硬化患者177例,慢性肝炎患者61例,选择同期70例健康体格检查者为对照组。比较GP73、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、血清白蛋白(albumin,ALB)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)、凝血酶原时间(prothrombin time,PT)及门静脉主干直径在肝硬化患者、慢性肝炎患者及健康人群之间的差异;根据不同分类标准,比较肝硬化各亚组GP73水平的差异;分析各组GP73与ALT、AST、ALB、TBIL、PT及门静脉主干直径之间的相关性。结果 肝硬化组的GP73 水平较慢性肝炎组与对照组明显升高(P < 0.001)。失代偿期肝硬化组血清GP73水平明显高于代偿期肝硬化组(P < 0.001);Child-pugh B级与Child-pugh C级肝硬化组血清GP73水平明显高于Child-pugh A级肝硬化组(P < 0.05)。肝硬化组GP73水平均与血清AST、ALT、TBIl、PT及门静脉主干直径呈正相关;与ALB呈负相关。结论 血清GP73在肝硬化组表达升高,与肝功能损伤指标密切相关,血清GP73对肝硬化的早期诊断及预后的评估具有重要临床应用价值。 相似文献
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目的制备和鉴定鼠抗粉尘螨主要变应原Derf1的单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)。方法利用重组Derf1蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。通过间接ELISA法筛选特异性分泌的杂交瘤细胞。用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,应用蛋白A亲和层析法进行抗体纯化。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型;通过间接ELISA、Western Blotting鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性。结果获得6株可稳定分泌鼠抗粉尘螨主要变应原Derf1的单克隆抗体,其Ig亚型均为IgG1,且6株单抗均具有良好的效价。ELISA和Western—blotting分析表明,该6株单抗均能识别重组Derf1蛋白和天然的粉尘螨提取物。其中,除了484不识别屋尘螨提取物,其他均能识别。结论成功制备了6株鼠抗粉尘螨主要变应原Derf1的单克隆抗体,为建立粉尘螨主要变应原Derf1检测及纯化方法奠定了基础。 相似文献
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目的制备和鉴定鼠抗粉尘螨主要变应原Derf1的单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)。方法利用重组Derf1蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。通过间接ELISA法筛选特异性分泌的杂交瘤细胞。用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,应用蛋白A亲和层析法进行抗体纯化。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型;通过间接ELISA、Western Blotting鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性。结果获得6株可稳定分泌鼠抗粉尘螨主要变应原Derf1的单克隆抗体,其Ig亚型均为IgG1,且6株单抗均具有良好的效价。ELISA和Western—blotting分析表明,该6株单抗均能识别重组Derf1蛋白和天然的粉尘螨提取物。其中,除了484不识别屋尘螨提取物,其他均能识别。结论成功制备了6株鼠抗粉尘螨主要变应原Derf1的单克隆抗体,为建立粉尘螨主要变应原Derf1检测及纯化方法奠定了基础。 相似文献
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目的探讨黑龙江省城市与农村居民高血脂、高血糖、饮酒和超重的聚集与高血压患病危险性的关联。方法选择黑龙江省哈尔滨市南岗区和兰西县平山镇共5 984名居民,调查其高血压患病和相关危险因素以及吸烟、饮酒等生活方式,测量血压、身高、体重、腰围和臀围,检测血糖、血脂;采用Logistic回归模型对危险因素聚集项数与高血压的关联性进行分析。结果调整年龄和性别因素后,城市居民高血压危险因素聚集1~4项的OR值(95%CI)分别为2.075(1.709~2.319),3.259(2.611~4.068),5.596(4.106~7.262)和5.597(2.993~10.465);农村居民高血压危险因素聚集1~4项的OR值(95%CI)分别为1.298(1.072~1.572),2.145(1.729~2.662),2.986(2.185~4.079)和2.169(1.1293~3.954);危险因素聚集2项及以上的OR值均高于1项的OR值。结论黑龙江地区城市和农村人群高血压患病危险性均随着危险因素的聚集项数增加而增加。 相似文献