LC-MS结合网络药理学探讨“片姜黄-当归”挥发油防治膝骨关节炎的作用机制

目的 提取“片姜黄-当归”药对挥发油,使用液相色谱-质谱联用仪(LC-MS)对提取的挥发油进行化学成分定性分析,并运用网络药理学探讨药对挥发油防治膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的作用机制。方法 采用水蒸气蒸馏法提取“片姜黄-当归”药对挥发油,并使用LC-MS对挥发油成分进行分析。借助Pubchem、Swiss Target Prediction、GeneCards、DAVID等数据库预测有效成分防治KOA的作用靶点及通路,对核心基因进行基因本体(Gene ontology,GO)分析与京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析,并使用Cytoscape软件构建“活性成分-疾病靶点”可视化网络图。运用AutoDock及Pymol对度值靠前的靶点与活性成分进行分子对接验证。结果 “片姜黄-当归”药对挥发油中共鉴定出59种化合物,主要成分为莪术酮、异姜黄醇、藁本内酯等;通过网络药理学筛选出挥发油作用于KOA的28个潜在靶点,包括CTSK、PTGS1、PTGS2和ESR1等关键靶点;KEGG富集分析预测“片姜黄-当归”药对挥发油主要通过肿瘤坏死因子信号通路、破骨细胞分化、白介素17信号通路、松弛素信号通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路来发挥治疗KOA的作用。分子对接结果显示筛选的活性成分与其对应靶蛋白均具有较好的结合活性。结论 使用LC-MS结合网络药理学的方法初步探明了“片姜黄-当归”药对挥发油中的主要有效成分及其干预KOA的潜在靶点与作用机制,为“片姜黄-当归”后续的深入研究提供思路。     

新型冠状病毒疫情在线防控的“华西项目化工作模式”探索与实践

目的探索"华西项目化工作模式"在新型冠状病毒(2019-nCoV)疫情在线防控工作中的应用价值。方法基于四川大学华西医院丰富的抗震救灾和项目管理经验,依托PDCA循环持续优化"华西项目化工作模式"。结果"华西项目化工作模式"可运用于新型冠状病毒(2019-nCoV)突发公共卫生事件,已建立快速反应工作闭环,整个项目组运行良好、系统运维稳定。结论"华西项目化工作模式"为疫情在线防控工作提供了工作路径,采用互联网+方式远程协作办公方式,有效促进疫情应急管理科学化,在疫情在线干预防控工作中起到了积极作用。     

徐州地区孕中期产前筛查风险截断值与产筛效率的关系分析

目的确立孕中期21-三体及18-三体的风险截断值,提高产筛效率。方法对185 66例15～20w+6孕妇采用时间分辨免疫荧光分析法检测血清AFP、Free-βhCG的浓度,结合母龄、孕周、体重等因素计算风险率。对高风险孕妇进行羊水穿刺,并利用系统软件统计出不同风险截断值所对应的筛查阳性率、检出率及阳性预测值。结果不同风险截断值所对应的产筛效率差异很大,21-三体风险截断值为1/270时,阳性预测值1.7%,检出率80%,产筛效率达到最高;18-三体风险截断值为1/350时,阳性预测值4%,检出率100%,产筛效率最高。结论孕中期母体血清AFP、Free-βhCG测定是一种无创性检测手段,降低出生缺陷,在徐州地区适合实行,但须确立一合适风险截断值,以使产筛效率达到最高。     

基于网络药理学和体内实验验证霍山石斛治疗胃溃疡的作用机制

目的 通过网络药理学方法及体内实验研究探讨霍山石斛治疗胃溃疡（GU）的作用机制。方法 从中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）数据库及文献中收集建立霍山石斛的成分库，寻找其主要活性化合物，并通过TCMSP等数据库预测作用靶点。从GeneCards、在线人类孟德尔遗传数据库（OMIM）、DisGeNET等数据库中筛选GU相关基因，将成分靶点与疾病基因交集后构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络，并进行基因本体（GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。根据预测结果采用苏木素-伊红（HE）染色法、免疫组化、酶联免疫吸附测定法（ELISA）、蛋白免疫印迹法（Western blot）、实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）等实验验证霍山石斛对乙酸诱导GU大鼠模型的影响。结果 筛选出霍山石斛63种有效成分，得到霍山石斛治疗GU的靶基因37个，PPI分析得到多个霍山石斛治疗GU的可能核心靶点，并通过作用于磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）、缺氧诱导因子-1（HIF-1）、肿瘤坏死因子（TNF）、核转录因子-κB（NF-κB）等信号通路和各种生物过程影响GU的发展。体内实验结果显示，霍山石斛可显著降低模型大鼠血清中白细胞介素-1β（IL-1β），白细胞介素-6（IL-6）及TNF-α等炎性因子的水平（P<0.05，P<0.01），增加溃疡边缘的胃血流量（GBF），增加溃疡边缘表皮生长因子（EGF），表皮生长因子受体（EGFR）的表达（P<0.01），显著下调GU大鼠胃组织中PI3K，Akt蛋白和mRNA的表达，上调人第10号染色体缺失的磷酸酶（PTEN）蛋白和mRNA的表达（P<0.01）。结论 网络药理学分析及动物实验结果提示，霍山石斛可以通过调节EGFR/PI3K/Akt信号通路抑制组织炎症，增加溃疡边缘的胃微循环血流，促进细胞增殖和受损胃黏膜的修复。     

CK7、CK20联合肠道源性标志物检测在肺肠型腺癌和转移性结直肠腺癌鉴别诊断中的价值

目的检测肺肠型腺癌(pulmonary enteric adenocarcinoma,PEAC)和肺转移性结直肠腺癌(pulmonary metastatic colorectal adenocarcinoma,PMCA)中CK7、CK20和肠道源性标志物(CDX2、SATB2、CDH17、β-catenin)的表达,探讨其在两者鉴别诊断中的价值。方法应用免疫组化EnVision法检测11例PEAC和22例PMCA中CK7、CK20、CDX2、SATB2、CDH17和β-catenin的表达,分析其在两者鉴别诊断中的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。结果CK7在PEAC中的表达高于PMCA,CK20、CDX2、SATB2、CDH17和β-catenin在PMCA中的表达均明显高于PEAC,差异有统计学意义(P<0.05)。SATB2和β-catenin的表达对PEAC与PMCA的鉴别诊断,具有较高的特异性和阳性预测值(100%)。CK7^-/CK20^+联合肠道源性标志物对PEAC和PMCA的鉴别诊断,均有较高的特异性和阳性预测值(100%)。结论SATB2或β-catenin是鉴别PEAC与PMCA高度特异性的免疫组化标志物,联合CK7和CK20可以提高PEAC病理诊断的准确性。     

老年单纯收缩期高血压患者24 h平均脉压与心功能的关系

目的探讨老年单纯收缩期高血压患者24 h平均脉压与心功能的关系. 方法选择老年单纯收缩期高血压患者72例,应用动态血压监测技术测定24 h平均脉压,放射性核素心血池显像技术测定左心室收缩与舒张功能. 结果 24 h平均脉压与左心室射血分数(r=-0.46,P<0.01)、高峰充盈率(r=-0.41,P<0.05)呈负相关,平均脉压越大,心功能越差(P<0.05). 结论老年单纯收缩期高血压患者心脏功能与24 h平均脉压呈负相关,脉压可作为心功能受损的预测因子之一.     

抗菌淀粉-聚乙烯醇水凝胶的制备及性能

以环氧氯丙烷为键合剂将胍盐低聚物(PHMG)接枝到淀粉分子上,设计了正交试验优化接枝反应条件。将产物添加到淀粉和聚乙烯醇(PVA)水溶液中,采用化学交联法合成了具有抗菌性能的淀粉-聚乙烯醇(S-PVA)水凝胶,测试了水凝胶的溶胀率、脱水率以及抗菌性能。结果表明：当反应温度为40 °C、时间为0.5 h、pH为9时,PHMG的接枝效率最高,水凝胶的溶胀率随着PVA含量的增大而减小,随着交联剂用量的增加呈现先增大后减小的趋势。S-PVA水凝胶对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均显示出了优异的抗菌活性,当w(PHMG)=0.2%时,抑菌率达到100%。     

牙龈卟啉单胞菌诱导的耐受对小鼠牙槽骨吸收的影响

目的:研究牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)诱导的耐受对小鼠骨吸收相关因子白细胞介素-1β(IL-1β)、骨保护素(OPG)/NF-κB受体激活蛋白配体(RANKL)表达水平,以及牙槽骨吸收的影响。方法:采用1×10~9CFU P.gingivalis口内涂布给菌5 d,磷酸盐缓冲液(PBS)洗脱后,再次口内涂布P.gingivalis给菌2 d,构建Balb/c小鼠牙周组织耐受模型。10 d后收集新鲜牙龈组织,采用western bolt检测牙龈组织中IL-1β、OPG和RANKL表达水平的变化。6周后,收集上颌骨,采用亚甲基蓝染色法检测牙槽骨吸收水平的改变。结果:耐受组小鼠牙龈组织中IL-1β表达水平较非耐受组降低,OPG/RANKL比值较非耐受组升高。亚甲基蓝染色结果显示,耐受组小鼠釉牙骨质界至牙槽嵴顶(ABC-CEJ)的距离小于非耐受组(P<0.01),说明耐受组小鼠牙槽骨吸收较非耐受组降低。结论:P.gingivalis诱导小鼠牙周组织耐受后,小鼠牙龈组织中骨吸收相关因子IL-1β分泌降低,OPG/RANKL比值升高,抑制了牙槽骨吸收。