CHD5基因启动子甲基化调控p19~(Arf)/p53/p21~(Cip1)信号通路促进急性髓系白血病发病的研究

目的:探讨急性髓系白血病患者(AML)骨髓中CHD5基因甲基启动子甲基化状态及其调控p19~(Arf)/p53/p21~(Cip1)信号通路促进AML发病的机制。方法:采用MSP检测AML组及对照组CHD5基因甲基化状态,应用实时定量RT-PCR和Western blot检测CHD5、p19~(Arf)、p53及p21~(Cip1)的表达水平。结果:AML患者骨髓中CHD5基因甲基化率(39.06%)较对照组(6.67%)明显增高(P0.05);CHD5基因甲基化与AML不同染色体核型相关(P=0.009),但与性别、年龄及临床分型无显著相关(P0.05);AML患者CHD5相对表达水平明显低于对照组(P0.05);存在CHD5甲基化AML患者p19~(Arf)、p53及p21~(Cip1)基因和蛋白表达水平较对照组降低。结论:AML患者CHD5基因启动子的高甲基化可导致CHD5、p19~(Arf)、p53和p21~(Cip1)表达水平下降,从而可能通过调控p19~(Arf)/p53/p21~(Cip1)途径减弱对白血病细胞增殖抑制作用,促进AML的发生。     

大学生攻击性与家庭成员关系的关联性研究

目的：探索家庭成员关系与大学生攻击性的相关性，为改善大学生攻击性提供措施和依据。方法：分层整群抽取芜湖市某高校928名大学生进行调查，其内容包括一般资料问卷和中文版Buss和Perry攻击问卷。大学生攻击性得分与家庭成员关系的相关性采用Spearman相关分析；校正差异有统计学意义的人口学变量，采用多元线性回归分析探讨家庭成员关系与大学生攻击性得分的相关性。结果：大学生攻击性总分为（56.61±19.68）分，身体攻击性（12.95±4.92）分，言语攻击性（9.69±3.68）分，愤怒（11.65±4.66）分，敌意（13.59±5.04）分，指向自我的攻击性（8.73±3.78）分。各家庭成员和睦程度越低大学生攻击性得分越高。相关分析显示，大学生攻击性各因子和攻击总分与父母关系、与父亲关系、与母亲关系、与其他家人关系均呈正相关（P<0.01）。校正性别、吸烟、饮酒、年级和家庭类型因素后多元回归分析显示，父母关系、与母亲关系、与其他家人关系和睦程度下降，大学生攻击性总分仍增高（P<0.05）。结论：家庭成员关系与大学生攻击性存在相关性，和睦的家庭成员关系有利于降低大学生攻...     

靶向Survivin基因microRNA诱导肝癌细胞凋亡的实验

目的:探讨靶向Survivin的microRNA转染肝癌细胞阻抑Survivin表达,及其对肝癌细胞凋亡、增殖的影响。方法:设计合成特异性靶向Survivin的microRNA的序列。肝癌细胞株HepG2接种于细胞培养板内,分为5组,空白对照组、脂质体组和低、中、高浓度转染组(分别给予50、100和200 nmol/L microRNA转染);作用后收集各组细胞。四氮唑盐(MTT)法检测不同浓度的microRNA对细胞的生长抑制率。流式细胞术检测各组细胞增殖率和凋亡指数。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测靶向Survivin的mRNA表达水平。结果:通过MTT检测,不同浓度microRNA转染组细胞的抑制率明显高于对照组(P<0.05)。各浓度mi-croRNA转染组细胞凋亡指数明显高于对照组(P<0.05),高浓度转染率最明显(P<0.05)。各浓度microRNA转染组细胞增殖指数明显低于对照组(P<0.05),高浓度转染组最明显(P<0.05)。各浓度microRNA转染组细胞Sur-vivin的mRNA转录水平有不同程度减弱。结论:不同浓度Survivin的microRNA转录能下调Survivin的mRNA表达,诱导肝癌细胞凋亡,抑制细胞增殖。     

银耳多糖对肝癌细胞株HepG-2增殖的影响

目的:研究银耳多糖对肝癌HepG-2细胞增殖的影响。方法:采用高温浸提的方法提取银耳多糖,并进行提取定量;将银耳多糖作用于肝癌HepG-2细胞,采用台盼蓝排斥试验测定细胞活力和生长曲线。结果:在分别培养1 d、2d和3 d后,银耳多糖干预各组的活细胞率都低于对照组(P<0.001)。生长曲线法显示,银耳多糖干预各组的细胞倍增时间延长,银耳多糖对增殖细胞的杀伤率最高达89.29%(>80%),且存在剂量依赖关系。结论:银耳多糖对肝癌HepG-2细胞具有直接抑制作用。     

低分子RNA与高三尖杉酯碱联用对白血病细胞系HL-60细胞作用的实验观察

目的:研究低分子RNA与抗白血病药物高三尖杉酯碱联用对HL-60细胞药物敏感性的影响。方法:采用细胞形态学观察、四唑盐(MTT)比色法分析细胞增殖以及应用凯氏定氮法测定细胞蛋白质的含量。结果:①0.05~50μg/ml高三尖杉酯碱对HL-60细胞增殖有抑制作用,并与时间和剂量相关。②低分子RNA与高三尖杉酯碱联用能显著降低HL-60细胞的增殖率,并进一步降低细胞内蛋白质的合成。结论:低分子RNA能提高HL-60细胞对白血病药物高三尖杉酯碱的敏感性,两者联用能有效抑制白血病细胞系HL-60细胞的增殖。     

碘化砷-硫脲诱导白血病细胞系HL-60细胞凋亡的研究

目的　研究新型砷剂配合物碘化砷 硫脲 (AsI3 Tu)诱导白血病HL 6 0细胞凋亡的生物学效应。方法　采用细胞形态学观察、细胞凋亡原位检测法 (TUNEL法 )检测凋亡细胞并测定其细胞蛋白质的含量。结果　① 1～16 μmol/LAsI3 Tu对HL 6 0细胞增殖有抑制作用 ,并与时间和剂量相关。②TUNEL法检测凋亡细胞明显增加。③AsI3 Tu能够抑制HL 6 0细胞蛋白质合成。结论　AsI3 Tu能有效诱导白血病细胞系HL 6 0细胞凋亡。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对Reh细胞增殖及RUNX3基因甲基化状态的影响

目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对白血病细胞系Reh细胞增殖抑制作用及对RUNX3基因启动子区甲基化状态及表达的影响,探讨Reh细胞RUNX3基因的失活机制及EGCG对RUNX3基因表达的调控。方法:体外培养Reh细胞,用5、10、15和20μg/mL EGCG与Reh细胞孵育,采用MTT法检测EGCG对Reh细胞增殖活性的影响;采用流式细胞术检测EGCG对Reh细胞凋亡的影响;采用甲基化特异性PCR(MSP)检测RUNX3基因启动子区域的甲基化情况;采用RT-PCR、Western blot法分别检测RUNX3 mRNA、蛋白的表达。结果:EGCG对Reh细胞生长有明显的抑制作用,并有时间及剂量依赖性;EGCG可促进Reh细胞发生凋亡,随着EGCG浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加;MSP法结果显示EGCG处理后RUNX3基因启动子高甲基化的区域发生去甲基化,EGCG能够诱导Reh细胞RUNX3基因mRNA和蛋白的重新表达,具剂量依赖性。结论:EGCG可明显抑制Reh细胞的增殖,并诱导Reh细胞中异常甲基化的RUNX3基因去甲基化,使RUNX3基因恢复表达,这可能是其抗肿瘤的重要机制。     

新型砷剂与5-Fu对HL-60细胞增殖抑制作用的比较

目的 探讨新型砷剂(AsI_3Cys)对HL-60细胞增殖的抑制作用。方法 通过细胞增殖、活力检测、形态学观察、蛋白定量及碱性磷酸酶(AKP)活性测定,观察新型砷剂与5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-Fu)对HL-60细胞增殖的影响。结果 AsI_3Cys对HL-60细胞的抑制作用与5-Fu比较有明显抑制作用;AsI_3-Cys与5-Fu联合使用能增强单药对HL-60细胞的杀伤作用。结论 AsI_3Cys可作为治疗急性髓系白血病的药物选择,AsI_3-Cys与5-Fu联合应用比单用AsI_3-Cys具有更好的治疗效果。