豇豆胰蛋白酶抑制剂的大量纯化和急性毒性研究

目的用大肠杆菌大量表达豇豆胰蛋白酶抑制剂蛋白(CpTI)并检测其急性毒性。方法将重组表达载体pET41-CpTI转化大肠杆菌,用IPTG诱导目的蛋白表达,通过疏水层析和阴离子交换层析等色谱技术纯化大肠杆菌表达的CpTI蛋白。取60只ICR小鼠,随机分成6组,每组10只,雌雄各半,经口灌胃法分别一次性给予10.0、4.64、2.15和1.00g/kg BW的重组CpTI蛋白,并设5.00g/kg的BSA对照蛋白组和水空白对照组,连续观察14d。结果所有的小鼠在观察期间体重、脏器比重、进食量等均未出现显著变化,在15d大体解剖也未发现明显的病理变化。小鼠对CpTI蛋白的最大耐受剂量(MTD)应大于10.0g/kg BW。结论在该试验条件下,经口灌胃法给予ICR小鼠CpTI蛋白,未发现其毒性。     

首发精神分裂症患者精神病治疗前期间影响因素与临床疗效关系的流行病学研究

目的 探讨首发精神分裂症患者精神病治疗前期间(duration of untreated psychosis,DUP)的影响因素及临床疗效和DUP的关系.方法 对912例首发精神分裂症患者的病案资料进行流行病学调查.收集患者的一般资料、临床诊断及临床疗效.参考精神分裂症首发症状评定量表评估患者的DUP.根据DUP的中位值将患者分为短DUP和长DUP2组.结果 短DUP与长DUP2组间婚姻比较差异具有显著性(P<0.05),其中未婚在短DUP组频数分布(63.7%)高于长DUP组(52.6%),差异具有显著性(λ2=5.990,P<0.05),离婚在短DUP组频数分布(0.6%)低于长DUP组(4.4%),差异具有显著性(λ2=15.079,P<0.01).精神分裂症单纯型在短DUP组频数分布(1.5%)低于长DUP组(4.1%),差异具有显著性(λ2=5.868,P<0.05).2组临床疗效间的比较差异具有显著性(λ2=36.093,P<0.01),2组临床疗效间Ridit分析显示差异有显著性(u=5.183,P<0.01).多因素Logistic回归分析发现婚姻、发病年龄和临床诊断对DUP有显著影响.结论 在首发精神分裂症患者中,婚姻、发病年龄和临床诊断对DUP有影响,DUP越长其临床疗效越差.     

亚慢性2,3,7,8四氯二苯并二噁英暴露对大鼠肝脏的毒性

目的：了解亚慢性2,3,7,8四氯二苯并二噁英（TCDD）暴露对大鼠肝脏的毒性作用。方法：1月龄SD大鼠随机分为阴性对照组（予玉米油）和3个TCDD（2、10和50 ng.kg-1.d-1）实验组,每组30只,雌雄各半,连续暴露13周后测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性,观察肝脏病理组织学变化。结果：亚慢性TCDD暴露对大鼠体质量和主要脏器相对重量无明显影响;血清AST和ALT活性在实验组升高：雌鼠AST和ALT在10和50 ng.kg-1.d-1组高于对照组和2 ng.kg-1.d-1组（P〈0.05）;雄鼠AST在50 ng.kg-1.d-1组高于其它3组（P〈0.05）,ALT在各组间差异无统计学意义;病理观察发现实验组肝组织坏死,肝血窦瘀血和肝细胞空泡样变。结论：亚慢性TCDD暴露对大鼠肝脏具有毒性作用,且雌鼠比雄鼠的肝脏对TCDD的毒性更敏感。     

二(口恶)英类化合物对智力的影响

二(口恶)英类化合物是一类持久性有机污染物,由于其高毒性、稳定性和生物蓄积性,对人类健康和环境具有严重危害.目前对二(口恶)的毒性研究已经涉及生殖毒性、免疫毒性、致癌性、内分泌毒性等多方面,但对其影响智力方面的研究较少.笔者从动物实验、人群调查方面综述了国内外有关二(口恶)英与智力关系的研究,并分析了其可能机制.     

亚慢性接触2,3,7,8-四氯二苯-并-二(口恶)英对成年雄性大鼠海马形态结构的影响

目的 研究亚慢性低剂量2,3,7,8-四氯二苯-并-二(口恶)英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)染毒对SD雄性成年大鼠海马形态结构的影响.方法 将32只1月龄SPF级Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为4组,分别为对照(玉米油)组和低(2 ng/kg)、中(1...     

转基因水稻中重组人乳铁蛋白的分离纯化及其抑菌活性研究

目的研究从转基因水稻中分离纯化重组人乳铁蛋白(recombinant humanlactoferrin,rhLF),并检测其是否具有抑菌活性。方法通过饱和硫酸铵分级沉淀从转基因水稻中分离rhLF后,经CM Sepharose FF交换层析和Sephadex G25分子筛层析进一步纯化rhLF。采用微量肉汤稀释法检测不同浓度rhLF(0.25、0.50、1.00、2.00、4.00和5.00mg/ml)对鼠伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、单增李斯特菌的抑制情况。结果通过分离和纯化成功获得纯度较高的rhLF(纯度约90%),经考马斯亮蓝染色,Western blot和质谱仪鉴定分析确定为rhLF,分子量约为79 kD。抑菌实验显示,5.00和4.00mg/ml rhLF对鼠伤寒沙门菌和金黄色葡萄球菌有持久的抑制效果,2.00和1.00mg/ml rhLF在实验后期也表现出明显的抑菌作用,0.50mg/ml及以下浓度则没有抑菌效果。5.00和4.00mg/ml rhLF在18h内对蜡样芽孢菌表现出一定的抑制效果;5.00mg/ml rhLF对单增李斯特菌在18h内有抑制作用。结论从转基因水稻中可成功分离和纯化rhLF,纯化后蛋白仍具有明显的抑菌活性。     

大豆脱水应答元件结合蛋白(GmDREB1)的非融合原核表达及纯化

目的大豆脱水应答元件结合蛋白(GmDREB1转录因子)基因是应用于转基因小麦中增强其耐旱、盐碱的基因,本研究拟探索获得与天然蛋白GmDREB1一致的蛋白表达纯化方法,以获得足量的蛋白纯品,为该外源蛋白的安全性评价奠定基础。方法将GmDREB1基因克隆到原核表达载体pBV220中,构建重组表达载体pBV220-GmDREB1,转化E.coli DH5a进行诱导表达,通过优化GmDREB1基因密码子、改善诱导表达条件及选择合适的表达载体等实现目的蛋白的高效表达,对表达产物进行阳离子交换和分子筛等层析纯化,对获得的纯化蛋白进行序列、活性及免疫原性等测定。结果含序列优化目的基因的重组载体pBV220-GmDREB1转化E.coliDH5a后,经42℃诱导表达2小时,获得了以可溶性为主的GmDREB1蛋白,经层析纯化获得了与天然目的蛋白一致的蛋白纯品。结论利用本研究方法可得到在N端序列、活性及免疫原性等方面与天然GmDREB1蛋白一致的目的蛋白。     

营养改良型转基因作物的营养及特殊功效评价研究进展

由于食物缺乏和营养不良等问题仍然存在,以及对高营养品质的食品需求越来越大,通过现代农业生物技术获得的营养改良型转基因作物受到越来越多的关注。目前这类产品已得到大量的研究和开发,其中一些已进入商业化生产阶段。本文就营养改良型转基因作物的营养及特殊功效评价研究进展进行综述。