乳酸脱氢酶与蚊虫对溴氰菊酯抗性相关性的研究

目的研究乳酸脱氢酶(LDH)与蚊溴氰菊酯抗性之间的关系。方法应用RT-PCR及cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA end,RACE)技术扩增白纹伊蚊LDH全长基因;用实时荧光定量PCR检测敏感和抗性蚊C6/36细胞中LDH基因的表达水平;用乳酸脱氢酶活性检测试剂盒检测敏感和抗性蚊细胞中LDH酶活性。结果 LDH基因全长共1831 bp,其中ORF为996 bp,共编码331个氨基酸。该基因与埃及伊蚊、黑腹果蝇、小家鼠和人的乳酸脱氢酶的同源性分别为89%、72%、66%和65%。实时荧光定量PCR结果表明,LDH基因在抗性蚊细胞中高表达,为敏感蚊细胞的1.87倍(P<0.05)。LDH酶活性检测结果显示,LDH在敏感蚊细胞中的酶活性范围为1～95 U/gprot,均值为40 U/gprot;在抗性蚊细胞中的酶活性范围为20～150 U/gprot,均值为75 U/gprot(n=15,P<0.01)。结论抗性蚊细胞中的LDH表达量和酶活性均高于敏感蚊细胞,提示LDH可能与蚊溴氰菊酯抗性相关。