广西边境口岸鼠类本底调查及探讨

目的 全面掌握中越边境口岸鼠类的种类和组成,为口岸鼠类科学管理提供基础资料.方法 采用夹夜法和笼夜法捕获鼠类.结果 东兴口岸捕获鼠类4种498只,凭祥口岸捕获14种756只,水口口岸捕获6种75只,龙邦口岸捕获8种173只,褐家鼠为各口岸的优势鼠种.结论 褐家鼠是各口岸重点监测和控制的对象.     

应用 DNA 条形码技术鉴定凭祥口岸蚊种

为探索DNA条形码技术在蚊类鉴定中的应用,本研究扩增了广西凭祥地区5种蚊虫的COⅠ基因序列,进行比对分析。基于Kimura双参数模型计算23只蚊子COⅠ序列的种内种间遗传距离结果表明种间遗传距离显著大于种内遗传距离。通过NJ法构建系统发育树聚类分析,不同种类的蚊虫位于不同的分支,同属的蚊种分支较不同属的蚊种分支较短,种内分支则更短。上述结果都与形态学鉴定结果一致。这些研究结果表明, DNA条形码技术对于本研究中所涉及的蚊种具有较好的区分效果,可以作为一种有效的工具在蚊虫鉴定中进行应用。     

中哈边境阿拉山口口岸小型兽类感染巴尔通体调查研究

为研究阿拉山口口岸小型兽类巴尔通体感染情况,对捕获的75只小型兽类进行形态学鉴定后,提取肝脏和脾脏核酸扩增巴尔通体Bartonella枸橼酸合酶基因(gltA),通过阳性序列的比对进行巴尔通体分子鉴定和序列分析。结果显示,阿拉山口口岸小型兽类巴尔通体感染率为9.33%(7/75),分别为大沙鼠3只、小家鼠2只、红尾沙鼠1只、小林姬鼠1只。经测序,7份阳性样本获得的巴尔通体分属于伊丽莎白巴尔通体、格拉汉姆巴尔通体、抚远巴尔通体和泰勒巴尔通体4种,其中3个阳性为伊丽莎白巴尔通体,各鼠种巴尔通体感染率无显著性差异。伊丽莎白巴尔通体和格拉汉姆巴尔通体为鼠传人类致病性巴尔通体,应通过灭鼠、灭蚤以降低巴尔通体自然宿主或传播媒介的密度,防止巴尔通体在国境口岸的传入传出。     

广西凭祥地区莱姆病螺旋体检测和基因分型研究

目的 调查广西凭祥地区莱姆病感染情况和基因型别.方法 2011年7月从广西凭祥地区采集蜱、啮齿动物和野鸟标本,分别采取煮沸法和Qiagen试剂盒提取蜱、啮齿动物脾脏以及鸟脾脏中莱姆病螺旋体基因组DNA;采用巢式PCR扩增莱姆病螺旋体5S～23S rRNA基因间隔区;对PCR扩增产物进行测序,并将序列结果与GenBank中莱姆病螺旋体5S～23SrRNA基因问隔区序列比对分析.结果 从3份啮齿动物标本中检测到莱姆病螺旋体5S～23SrRNA基因间隔区片段,啮齿动物的感染率为5.66％(3/53).其中一个序列与GenBank中Borrelia valaisiana基因型莱姆病螺旋体(序列号:HM100125.1,AB091455.1,AB091454.1,AB091453.1)同源性为100％;蜱和鸟标本中未检测到莱姆病螺旋体.结论 广西凭祥地区啮齿动物中存在莱姆病螺旋体B.valaisiana基因型感染.     

凭祥口岸鼠形动物调查报告

目的了解凭祥口岸鼠形动物的种群构成、季节消长和体表寄生虫(蚤、蜱、螨)携带情况,为进一步做好口岸传染病监测和口岸灭鼠工作提供科学依据。方法采用捕鼠笼法,每月中旬连续3d,连续12个月。结果本次调查共捕获鼠形动物756只,经分类鉴定隶属2目4科7属14种,蚤508只,蜱764只,螨44只;鼠类以褐家鼠为优势种,占鼠形动物总数的63.49%,该口岸鼠密度为7.13%,密度变化呈双峰,春、秋各有1个高峰,3月份为11.65%,10月份为9.48%。成幼比为7.69:1,雌雄比为1.28:1,妊娠率为12.65%;鼠体染蚤率为19.71%,总染蚤指数为0.67;鼠体染螨率为18.25%,总染螨指数为1.01;鼠体染蜱率为2.11%,总染蜱指数为0.06。结论凭祥口岸鼠密度较高,离无鼠害口岸的标准(<1%)差距较大,应大力开展防鼠灭鼠工作,防止有关传染病的发生和流行。     

应用实时荧光定量PCR检测鼠类生境样本鼠疫耶尔森氏菌的研究

目的评价应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测鼠类生境样本中鼠疫耶尔森氏菌的可行性和有效性。方法优选、评价鼠类生境样本DNA提取方法,提取疫区鼠类洞穴土壤、粪便等生境样本中DNA,应用RT-PCR试剂盒检测鼠疫耶尔森氏菌特异性pla基因。结果柱式土壤DNAout法提取DNA效果最好,回收率是24.54%。联合应用柱式土壤DNAout法和RT-PCR法检测鼠类生境样本,鼠疫耶尔森氏菌pla基因的阳性率为3.44%(10/291)。结论应用柱式土壤DNAout法提取鼠类生境样本DNA,RT-PCR法可以检测到鼠类生境中鼠疫耶尔森氏菌pla基因。     

鼠疫耶尔森氏菌三色荧光定量PCR检测方法的建立

目的建立一种三色荧光定量PCR检测鼠疫耶尔森氏菌的方法。方法根据鼠疫耶尔森氏菌pPCP1质粒上的pla基因、编码F1抗原在pMT1质粒上的ca f1基因以及菌体染色体上的3a基因序列,设计特异性的引物和不同荧光标记的Taqman荧光探针,优化反应体系和扩增条件,考察该方法检测的敏感度、特异性、重复性和稳定性,最终建立三色荧光定量PCR检测方法。结果本研究所建立的方法对鼠疫耶尔森氏菌DNA的扩增效率高,最低检出限为1×102copies/ml,特异性高,重复性的变异系数在合理范围内,稳定性好。结论建立了一种同时检测鼠疫耶尔森氏菌pla、ca f1和3a基因的三色荧光定量PCR方法,该方法敏感度和特异性高,能够实现快速检测的目的。