平滑肌细胞移植对心肌梗死后早期心肌基质金属蛋白酶2、9和抑制因子3含量的影响

目的评价平滑肌细胞移植对心肌梗死后早期心肌间质重构的影响。方法选用48只雌性Wistar大鼠,采用随机数字表法分成对照组(n=24)和平滑肌细胞移植组(n=24),经左冠状动脉远端结扎后建立心肌梗死动物模型,立即对梗死区边缘行室壁注射含有1×106个平滑肌细胞或不含细胞的磷酸盐缓冲液(PBS)0.5ml。在移植后1周,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫杂交观察大鼠心肌内基质金属蛋白酶2、9(MMP-2、MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)的信使核糖核酸(mRNA)和蛋白变化。结果植入的平滑肌细胞能够存活;平滑肌细胞移植组大鼠缺血区TIMP-3mRNA(1.06±0.22vs.0.81±0.19,t=-2.358,P=0.033)及其蛋白含量(3.33±0.53vs.1.63±0.47,t=-6.802,P0.001)明显高于对照组;平滑肌细胞移植组大鼠缺血区MMP-2、MMP-9mRNA(0.49±0.12vs.1.16±0.18,t=8.453,P0.001;0.45±0.12vs.0.80±0.11,t=5.884,P0.001)及其蛋白含量(3.98±1.08vs.6.05±0.91,t=4.139,P=0.001;0.39±0.14vs.0.57±0.17,t=2.409,P=0.031)明显低于对照组。结论移植的平滑肌细胞可在心肌梗死区及其周围存活,并且增加梗死后心肌中TIMP-3mRNA和蛋白的含量,降低MMP-2、MMP-9mRNA和蛋白含量,抑制心肌不良重构。     

大鼠子宫肌层平滑肌细胞诱导血管生长与孕激素的相关性

目的 评价子宫肌层平滑肌细胞(myometrial smooth muscle cell,MSMC)诱导血管生成能力与孕激素的相关性.方法 由大鼠子宫分离培养MSMC用于:①体外研究:受到不同孕激素浓度( 10-13、10-11、10-9和10-7 mol/L)作用的MSMC内VEGF水平;受到孕激素刺激的MSMC内孕...     

自体心房肌细胞移植改善缺血后心脏功能的研究

细胞移植是治疗损伤心脏的潜在疗法。本研究旨在探讨自体心房肌细胞移植对心脏功能的影响,现将结果报道如下。 一、材料和方法 1.麻醉及术后处理:雄性成年Lewis大鼠16只,随机分为实验组、对照组各8只。用成巴比妥钠(30 mg/kg体重)、盐酸氯胺酮(22mg/kg体重)腹腔注射麻醉。气管插管,呼吸机正压呼吸,频率为60次/min,氧流量2 L/min,潮气量3 ml。     

盐酸罗哌卡因在人工全膝关节表面置换术中的应用

目的探讨盐酸罗哌卡因腰硬联合麻醉在人工全膝关节表面置换术中的应用。方法择期人工全膝关节表面置换术60例,随机分为A、B、C组,每组20例。分别利用0．3％、0．4％、0．5％盐酸罗哌卡因进行腰硬联合麻醉,观察术毕时运动阻滞效果、止血带反应及麻醉不良反应,进行麻醉效果评级。结果三组麻醉结束时运动阻滞效果差异有统计学意义（P〈0．05）;B、C组感觉和运动阻滞恢复慢（P〈0．05）,麻醉效果满意。结论0．5％盐酸罗哌卡因适用于人工全膝关节表面置换术,麻醉效果确切,不良反应低。     

TIMP-3-pcDNA3.0转染平滑肌细胞及其在大鼠心肌梗死瘢痕中的存活与表达

目的 探讨基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)基因转染平滑肌细胞的效果及移植的转染细胞能否在大鼠心梗瘢痕中存活并表达目的 蛋白.方法 植块法培养大鼠主动脉中层平滑肌细胞并鉴定;脂质体介导法以"TIMP-3基因质粒转染平滑肌细胞;RT-PCR和Western blot检测转染细胞的基因水平和蛋白表达;通过BrdU移植检测移植细胞的存活与增殖情况.实验大鼠随机分成单纯PBS注射、单纯平滑肌细胞移植和转染平滑肌细胞移植3组(每组7只实验大鼠),将移植物注射人(五点法)心梗大鼠的室壁内.1周后,提取其左心室组织mRNA和蛋白,分别进行RT-PCR和Western blot检测,鉴定其.TIMP-3基闪含量和表达情况.结论 植块法培养可以获得高纯度的平滑肌细胞;脂质体介导法可以使TIMP-3基因转染平滑肌细胞并获得TIMP-3蛋白的表达;移植的转染细胞能够在心梗缀痕中存活并增殖;转染细胞组大鼠左心室组织中TIMP-3 mRNA含量明显多于单纯平滑肌细胞移植组(P<0.01)及单纯PBS注射组(P<0.01);转染细胞移植组大鼠左心室组织中TIMP-3蛋白含量明显多于平滑肌细胞移植组(P<0.01)及单纯PBS注射组(P<0.01).结论TIMP-3基因可以通过脂质体介导法转染平滑肌细胞,且转染细胞可以在大鼠梗死心肌中存活、增殖并表达TIMP-3蛋白.     

大鼠子宫肌层细胞诱导血管生成能力的研究

目的 评价子宫肌层细胞(MC)诱导血管生成能力.方法 由大鼠分离培养MC、主动脉平滑肌细胞(SMC)和血管内皮细胞(VEC)用于在体Matrigel结节试验,对比诱导血管生成能力:MC与SMC、VEC比较;MC、SMC及VEC与相应热坏死细胞比较;不同细胞数量MC比较;BrdU染色追踪MC在结节内转归(各组n=10)....     

利用人骨髓基质干细胞构建组织工程心脏瓣膜的体外实验

背景：目前临床应用的人工瓣膜,无论机械瓣还是生物瓣都存在着诸如易感染、出血和血栓形成并发症,因瓣口狭窄需再手术等自身难以克服的缺陷。理论上具有生物活性的组织工程心脏瓣膜可克服上述缺点,但种子细胞和瓣膜支架的选取尚存在争议。目的：探讨应用人骨髓基质干细胞及脱细胞猪主动脉瓣支架体外构建组织工程瓣膜的可行性。方法：采用去垢剂一核酸酶消化法处理,去除猪主动脉瓣叶细胞成分,获取施行简单先心病修补患者胸骨来源的骨髓基质干细胞,将其种植于脱细胞猪主动脉瓣支架共培养5d。结果与结论：流式细胞技术证实接种的种子细胞的表面抗原符合人骨髓基质干细胞的特征;光镜及电镜检查证实,猪主动脉瓣膜中的细胞成分可完全去除,获得完整无细胞的纤维网状支架;瓣叶去细胞前后的生物力学性能无明显变化;种植的人骨髓基质干细胞可在脱细胞猪主动脉瓣支架表面形成一层连续的细胞层;接种的人骨髓基质干细胞有向成纤维细胞分化的趋势。以上结果提示种植人骨髓基质干细胞于脱细胞猪主动脉瓣支架上,可构建出组织工程心脏瓣膜。     

TIMP-3基因瞬时转染平滑肌细胞及其在大鼠心梗瘢痕中的存活与表达

我们建立转染TIMP-3基因的平滑肌细胞群(TIMP-3-SMC),证明其能够在心梗瘢痕处存活并稳定表达基因产物,为进一步研究其对缺血性心力衰竭的治疗作用提供依据.     

金属盐诱发V_(79)细胞姊妹单体互换

中国地鼠V_(79)细胞具有生长速度快、接种效率高、染色体数目少及核型稳定等优点,已成为常用的检测方法,但用于金属元素的遗传毒性鉴定资料还很少。本实验以姊妹单体互换(SCE)为指标,检测铬、铅、镉、锰和锌的毒性。