青心酮对猪肺动脉平滑肌细胞增生的抑制作用

在培养的肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）内加入青心酮（３．４－ＤＨＡＰ）（６．２５×１０－５Ｍ－１０－３Ｍ／Ｌ）注射液，用结晶紫染色法，３Ｈ－ＴｄＲ掺入以及用ＳＰ免疫细胞化学检测ＰＣＮＡ表达，观察对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响，结果表明青心酮对１０％小牛血清引起的ＰＡＳＭＣ增生的作用与异搏定（６．２５×１０－６－１０－４Ｍ／Ｌ）相似，呈剂量依赖性抑制细胞增殖。提示青心酮可用于慢性肺动脉高压肺血管改建的防治。     

内毒素上调血管内皮细胞肾上腺髓质基因及其机制探讨

目的探讨内毒素对血管内皮细胞肾上腺髓质素(ADM)mRNA的影响,以及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)在其中所起的作用.方法应用逆转录-巢式聚合酶链反应,测定血管内皮细胞株ECV304在不同剂量内毒素作用时ADM mRNA的量以及采用p38 MAPK特异性抑制剂SB20358(10 mmol/L)抑制p38 MAPK后ADM mR-NA的量.结果内毒素0.1、1.0、10、50、100μg/L与ECV 304共培养24h后ADM mRNA/β-actin mRNA均不同程度高于正常培养水平,而SB203580抑制p38 MAPK后可部分抑制内毒素引起的ADM mRNA水平增高.结论内毒素可诱导ADM基因转录增强,激活p38 MAPK可能是一种重要机制.     

阿尔茨海默病患者神经细丝蛋白的过度磷酸化和聚集

细胞骨架蛋白ｔａｕ的异常修饰在阿尔茨海默病 (ＡＤ)的发病中起重要作用。神经细丝 (ＮＦ)也是重要的细胞骨架 ,由轻 (ＮＦ -Ｌ) ,中 (ＮＦ -Ｍ)和重 (ＮＦ -Ｈ)三种亚基组成。ＮＦ的正常功能是维持神经细胞的构架和轴突的口径。在ＡＤ患者 ,ＮＦ结构消失 ,被神经原纤维缠结所取代 ,然而 ,关于ＮＦ在ＡＤ发病中的作用尚不清楚。本研究应用一系列特异性识别磷酸化和非磷酸化ＮＦ亚基的单克隆抗体 (ＳＭＩ31 ,ＳＭＩ32 ,ＳＭＩ33,ＳＭＩ34和ＮＲ4)以及定量放免印迹技术 ,发现ＡＤ患者大脑灰质中ＮＦ -Ｈ和ＮＦ -Ｍ的磷酸化程度比年龄匹配的神…     

一氧化氮、一氧化碳对大鼠微血管急性缺氧反应的影响

采用微循环实验方法,研究一氧化氮(NO)、一氧化碳(CO)对大鼠软脑膜和提睾肌微血管急性缺氧反应的影响。结果显示,内源CO生成阻断剂ZnPPⅨ对软脑膜血管的基础管径及缺氧脑微动脉扩张反应均无影响,10~(-4)mol/L ZnPPⅨ可使提睾肌微动脉收缩(7.55±3.55)％,并可使提睾肌微动脉缺氧收缩反应由(10.84±3.07)％增强至(15.48±4.94)％。10~(-4)mol/L内源NO生成阻断剂L-NNA使脑和提睾肌微动脉基础口径分别缩小(7.94±1.99)％和(10.75±3.90)％,并可使脑微动脉缺氧扩张反应由(28.16±13.20)％减弱至(20.35±8.35)％;却对提睾肌微动脉缺氧收缩反应无显著影响。而外源给CO使基础脑和提睾肌微动脉收缩,并使其缺氧反应减弱。外源给NO可轻微扩张脑微动脉和提睾肌微动脉,但对其缺氧反应无影响。     

蛋白磷酸酶抑制剂对人成神经细胞瘤细胞钙瞬态的影响

应用荧光倒置显微镜系统,分别检测了蛋白磷酸酶ＰＰ－２Ａ和ＰＰ－１抑制剂岗田酸（Ｏｋａｄａｉｃ ａｃｉｄ,ＯＡ）和ＰＰ－２Ｂ抑制剂三氟吡拉嗪（Ｔｒｉｆｌｕｏｐｅｒａｚｉｎｅ,Ｔｒｉ）处理的人成神经细胞瘤细胞（ＳＨ－ＳＹ５Ｙ）胞浆钙瞬态变化。结果：１ｎｍｏｌ／ＬＯＡ抑制ＰＰ－２Ａ时,胞浆游离Ｃａ＾２＋浓度（Ｃａ＾２＋）ｉ）瞬时波动明显增强,（Ｃａ＾２＋）ｉ在２０ｍｉｎ内逐步轻微升高,后逐渐回复;而用１     

一氧化碳、一氧化氮对大鼠微血管急性缺氧反应的影响

一氧化碳、一氧化氮对大鼠微血管急性缺氧反应的影响同济医科大学病理生理学教研室（武汉４３００３０）夏若寒刘声远王迪浔一氧化碳（ＣＯ）、一氧化氮（ＮＯ））可能是新的信息分子。本实验采用微循环实验方法研究了ＣＯ、ＮＯ对大鼠软脑膜和提睾肌微血管急性缺氧反应的...     

蛋白磷酸酶抑制剂对人成神经细胞瘤细胞钙瞬态的影响

应用荧光倒置显微镜系统,分别检测了蛋白磷酸酶ＰＰ－２Ａ和ＰＰ－１抑制剂岗田酸（Ｏｋａｄａｉｃａｃｉｄ,ＯＡ）和ＰＰ－２Ｂ抑制剂三氟吡拉嗪（Ｔｒｉｆｌｕｏｐｅｒａｚｉｎｅ,Ｔｒｉ）处理的人成神经细胞瘤细胞（ＳＨ－ＳＹ５Ｙ）胞浆钙瞬态变化。结果发现：１ｎｍｏｌ／ＬＯＡ抑制ＰＰ－２Ａ时,胞浆游离Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）瞬时波动明显增强,［Ｃａ２＋］ｉ在２０ｍｉｎ内逐步轻微升高,后逐渐回复;而用１００ｎｍｏｌ／ＬＯＡ同时抑制ＰＰ－２Ａ和ＰＰ－１时,则引起［Ｃａ２＋］ｉ即刻持续升高,并同时伴有［Ｃａ２＋］ｉ瞬时波动明显增强;用１００μｍｏｌ／ＬＴｒｉ抑制ＰＰ－２Ｂ时,则引起［Ｃａ２＋］ｉ即刻持续升高,［Ｃａ２＋］ｉ瞬时波动没有明显变化。提示：蛋白磷酸酶降低可能通过钙瞬态变化而参与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病（ＡＤ）的发病过程。     

拟除虫菊酯对大鼠中枢谷氨酸和γ-氨基丁酸递质影响的免疫组织化学研究

目的　探讨拟除虫菊酯类农药对大鼠中枢神经系统谷氨酸（Ｇｌｕ）和γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）免疫阳性神经细胞的影响及机制。方法　雄性ＳＤ大鼠经氯氰菊酯（７ ｍ ｇ／ｋｇ）或氯菊酯（７０ｍ ｇ／ｋｇ）连续腹腔注射染毒后,通过免疫组织化学和显微图像分析技术检测Ｇｌｕ 及ＧＡＢＡ阳性神经细胞分布和阳性细胞中递质含量。结果　氯氰菊酯或氯菊酯染毒组大鼠大脑皮层、海马Ｇｌｕ 免疫反应阳性细胞数目和阳性细胞面积比减少,阳性细胞积分吸光度降低,阳性细胞突起减少;而ＧＡＢＡ免疫阳性神经细胞数目和面积比增加,阳性细胞积分吸光度升高;在相同条件下,氯氰菊酯作用明显强于氯菊酯。结论　拟除虫菊酯引起中枢神经系统Ｇｌｕ 及ＧＡＢＡ平衡失调可能是其导致兴奋性神经毒性作用机制之一。     

Alzheimer病实验模型的研究

目的 :Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病 (Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｄｉｓｅａｓｅ ,ＡＤ)的主要脑病理改变是神经原纤维缠结 (ｎｅｕｒｏｆｉｂｒｉｌｌａｒｙｔｈａｎｇｌｅｓ,ＮＦＴ)和老年斑 (ｓｅｎｉｌｅｐｌａｑｕｅｓ,ＳＰ) ,且前者与ＡＤ临床痴呆症状呈相关关系。ＮＦＴ的主要成分是以双螺旋丝 (ｐａｉｒｅｄｈｅｌｉｃａｌｆｉｌａｍｅｎｔ,ＰＨＦ)形成聚集的异常磷酸化的ｔａｕ蛋白 ,大量体外研究资料显示 :蛋白激酶和蛋白磷酸酯酶调节失衡是ｔａｕ蛋白异常磷酸化的基础。方法 :采用蛋白激酶激活剂和 /或蛋白磷酸酯酶抑制剂从动物整体和细胞水平…     

抑制磷酸酶和tau过度磷酸化诱导神经细胞凋亡

目的探讨磷酸酶活性抑制、tau蛋白异常磷酸化与神经细胞变性死亡的关系.方法磷酸酶(PP)-2A/PP-1抑制剂岗田酸(okadaicacid,OA)10nmol/L与成神经细胞瘤细胞(SH-SY5Y)共培养,DNA-梯带和末端转移酶标记技术.结果用10nmol/LOA与SY5Y细胞共培养24h和48h均可引起DNA-梯带出现,此时末端转移酶标记显示阳性细胞数由2.16%±0.94%分别增多至18.05%±3.57%(P＜0.01)和22.52%±4.78%(P＜0.01).结论由于上述检测指标均与细胞凋亡有关,提示抑制PP-2A和部分抑制PP-1引起tau蛋白异常磷酸化可能通过神经细胞凋亡而引起AD患者神经细胞丢失.