1例复发重症心肌炎治疗体会

1临床资料 患者女性,21岁。2＋年前在＂感冒＂后4天反复出现意识丧失,入院时体温36.0℃,血压80/50mmHg,心率55次/分,呼吸18次/分,人院后查心肌酶学CK873U/L,CK-MB103U/L,     

原发性高血压患者单核细胞趋化蛋白-1基因多态性对尼索地平疗效的影响

目的探究并分析原发性高血压(高血压)患者单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)基因多态性与尼索地平疗效及血清整合素β3、血清细胞间黏附分子(serum intercellular adhesion molecule,sICAM)-1浓度的相关性。方法选取2017年3月至2018年3月成都市温江区人民医院收治的高血压患者100例(基因型为-2076A/T或者-2518G/A),根据患者基因检测结果分为观察组(基因型-2076A/T)及对照组(基因型-2518G/A)。两组患者均给予尼索地平治疗,观察并记录两组患者治疗前,治疗后1个月,治疗后3个月血压控制情况以及血清整合素β3、sICAM-1浓度。结果两组患者性别、年龄、体质量、病程、用药等比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组患者血压、整合素β3浓度、sICAM-1浓度均较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),但观察组患者血压、整合素β3浓度、sICAM-1浓度降低程度显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者总有效率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用尼索地平治疗后,MCP-1基因型为-2076A/T的高血压患者的疗效及血清整合素β3、sICAM-1浓度降低程度显著高于MCP-1基因型为-2518G/A的高血压患者。     

赖型钩体毒力相关基因OmpL17表达纯化及其产物的趋化作用

目的研究钩体017株外膜蛋白新基因ompl17与钩体肺大出血的相关性。方法提取钩端螺旋体017株基因组DNA，扩增出ompL17基因，与表达载体pGEX-4T-1重组，诱导表达OMPL17蛋白，然后纯化得到活性表达产物，并建血管基底膜，分析该产物的趋化活性。结果SDS-PAGE和Western-blot分析证实诱导表达并纯化得到OMPL17蛋白，趋化作用分析证明该基因表达产物具有趋化活性。结论成功表达纯化出ompL17基因的蛋白，观察到该基因表达产物具有趋化活性，为赖型钩体的分子机制的进一步阐明奠定了基础。     

赖型钩端螺旋体Loa22重组质粒的蛋白表达和对巨噬细胞的毒性作用

目的对赖型钩端螺旋体Loa22基因进行表达和功能研究。方法构建赖型钩端螺旋体Loa22成熟肽重组质粒,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)对重组质粒进行蛋白诱导表达,SDS-PAGE和Western Blotting检测目标蛋白表达情况。经亲和层析获得目标蛋白并作用于小鼠巨噬细胞ANA-1,检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力、四氮唑复合物(XTT)吸光度值和细胞凋亡率以评价其细胞毒性。结果成功构建Loa22成熟肽原核表达质粒,通过鉴定并纯化得到Loa22成熟肽,该蛋白使培养ANA-1细胞上清液中LDH活力升高,XTT吸光度值下降,细胞凋亡率增加。结论Loa22对ANA-1具有明显的毒性效性,该基因可能是致病钩体的一个重要毒力相关基因。     

他汀联合依折麦布对STEMI合并非透析依赖的CKD患者调脂治疗的有效性和安全性

目的 探讨他汀联合依折麦布对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)合并非透析依赖的慢性肾脏病(CKD)患者调脂治疗的有效性和安全性.方法 选取2017年2月至2019年4月在该院住院的29例使用阿托伐他汀联合依折麦布调脂治疗的STEMI合并非透析依赖的CKD患者作为观察组,以同期性别、年龄和临床资料匹配的38例单用阿托伐他汀的STEMI合并非透析依赖的CKD患者作为对照组,观察治疗3～6个月后两组血脂的达标率及安全性.结果 两组患者年龄、性别、既往病史、冠状动脉病变特征、心功能和主要药物治疗无明显差异(P>0.05).两组患者治疗后低密度脂蛋白(LDL)水平较治疗前均明显降低(P<0.05),且观察组低于对照组[(2.0±0.6)mmol/L vs.(2.3±0.4)mmol/L,P<0.05].观察组LDL达标率明显高于对照组(58.6％v s.18.4％,P=0.001).两组各有1例转氨酶升高,肌酐水平在治疗前后无明显差异(P>0.05).两组患者随访6个月主要心血管不良事件发生率无明显差异(P>0.05).结论 STEMI合并非透析依赖的CKD患者他汀联合依折麦布调脂治疗较单用他汀能显著降低LDL水平,提高LDL达标率,且相对安全,对心血管事件的影响需进一步随访评估.     

赖型钩体毒力相关基因ompL17的克隆表达及产物的体内分布

[目的] 观察ompL17基因表达产物的免疫原性以及该表达蛋白在动物模型中的分布情况.[方法] 提取钩端螺旋体017株基因组DNA,扩增出ompL17基因,与表达载体pGEX-4T-1重组,诱导表达OMPL17蛋白,免疫动物获得相应抗体,通过免疫组织化学技术观察该蛋白在动物模型组织当中的分布.[结果] PCR和酶切分析证实构建成功了表达载体,SDS-PAGE和Western-blot分析证实诱导表达出OMPL17蛋白,通过免疫组织化学技术观察到了该蛋白在动物模型中的分布情况. [结论] 成功表达出ompL17基因的蛋白,观察到豚鼠动物模型中该蛋白的分布情况,为赖型钩体的分子机制的阐明奠定了基础.     

心房颤动伴或不伴心力衰竭患者的死亡危险因素分析

目的 :探讨心房颤动(房颤)伴或不伴心力衰竭(心衰)患者的死亡危险因素。方法:2008-11至2011-10在全国20家医院连续入选急诊的房颤患者2 015例,根据是否伴有心衰将患者分为伴心衰组(n=753)和不伴心衰组(n=1 263)。记录患者的基线资料及院内治疗情况。对所有患者进行1年随访,记录全因死亡事件。使用多因素Cox回归模型分析死亡的危险因素。结果 :与不伴心衰组比,伴心衰组男性少,心率慢,体重指数(BMI)低,既往高血压史及甲状腺功能亢进史患者比例低,钙拮抗剂及胺碘酮使用率低,CHADS2积分高,既往心肌梗死、冠心病、先天性心脏病、瓣膜性心脏病、风湿性心脏病、左心室肥厚、吸烟史、左心室功能障碍、痴呆/认知功能障碍、肺气肿/慢性阻塞性肺疾病(COPD)、瓣膜手术及大出血史患者比例高,利尿剂、血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)、地高辛、阿司匹林及华法林的使用率高,差异均有统计学意义(P均0.05)。1 991例随访成功,随访期间,与不伴心衰组比,伴心衰组节律控制药物及氯吡格雷使用率低,室率控制药物及华法林使用率高,死亡及大出血发生率高(P均0.05)。Cox回归分析显示,心衰是房颤患者1年死亡事件的危险因素(HR=1.50,95%CI:1.17~1.92,P=0.001)。多因素回归分析发现,不伴心衰组中,年龄(HR=1.09,95%CI:1.07~1.11,P0.001)、心率(HR=1.011,95%CI:1.005~1.017,P0.001)、房颤作为入院次要诊断(HR=1.63,95%CI:1.13~2.35,P=0.01)及合并COPD(HR=2.18,95%CI:1.47~3.22,P0.001)与1年死亡率呈正相关;而在伴心衰组中,年龄(HR=1.05,95%CI:1.03~1.07,P0.001)、BMI(HR=0.92,95%CI:0.88~0.96,P0.001)、收缩压(HR=0.991,95%CI:0.984~0.998,P=0.012)及房颤作为入院次要诊断(HR=2.50,95%CI:1.48~4.21,P=0.001)与1年死亡率呈正相关。结论 :伴或不伴有心衰的房颤患者在基线资料及院内治疗方面存在差异,心衰是房颤患者1年死亡事件的危险因素,两组患者1年死亡事件的危险因素不相同。     

赖型钩端螺旋体溶血素HlyX基因的克隆、表达及其细胞毒效应

目的：克隆、表达HlyX基因并研究其细胞毒性效应。 方法:从赖型钩端螺旋体017株全基因组中用PCR方法扩增出目的基因，双酶切构建重组质粒，转化E.coliJM109，诱导表达HlyX；将表达的目的蛋白免疫新西兰大白兔，制备多克隆抗体，Western blotting鉴定其免疫原性；将目的蛋白纯化、复性后作用于ECV304细胞，通过检测ECV304细胞乳酸脱氢酶（LDH）和一氧化氮（NO）的释放量研究目的蛋白的细胞毒性效应。 结果:扩增出1 179 bp的目的基因HlyX，重组质粒经双酶切、PCR鉴定，测序结果表明重组质粒构建成功。经IPTG诱导表达的融合蛋白约64 kD，主要以包涵体的形式表达，经免疫动物得到多克隆抗体，ELISA检测效价达1∶〖KG-*2〗64 000； Western blotting鉴定在目的蛋白的位置处有特异性阳性条带。经过HlyX融合蛋白作用的ECV304细胞LDH和NO释放量明显高于对照组（P<0.01）。 结论:HlyX能在大肠杆菌中表达，表达的目的蛋白对细胞有毒性效应。     

结核杆菌Rv0901基因真核表达质粒的构建及在细胞内的表达与鉴定

目的构建结核杆菌Rv0901基因的真核表达质粒并进行表达,为研究Rv0901基因的功能提供材料。方法以结核杆菌基因组DNA为模板PCR扩增Rv0901基因序列,将Rv0901基因定向克隆到真核表达质粒pcDNA3.1（＋）获得重组表达质粒,体外转染Cos7细胞,RT-PCR检测转染的情况,并提取转染细胞总蛋白和收集细胞培养液上清检测蛋白的表达,Western-blotting检测蛋白表达的特异性。结果成功扩增出Rv0901基因序列,成功构建重组真核表达质粒pcDNA3.1-Rv0901,重组质粒转染细胞后的RT-PCR能扩增出Rv0901基因序列,转染细胞总蛋白和细胞培养液上清均能特异表达Rv0901基因蛋白。结论成功构建Rv0901基因真核表达质粒并在真核细胞内进行了良好表达,为研究该基因功能打下了坚实基础。     

主动脉夹层分子机制的研究进展

主动脉夹层是致死性很高的大血管疾病,其典型的组织学特征是主动脉中层退行性变。由于对主动脉壁退行性变的分子机制尚未阐明,目前尚缺乏有效预防主动脉夹层形成、进展和破裂的措施。近年来由于分子生物学和基因敲除动物的广泛应用,使主动脉夹层的分子机制取得较大进展。本文就近年来主动脉夹层分子机制的进展作简要综述。