20例膀胱肿瘤超声诊断分析

本组20例,男14例,女6例,男女比值为2.3∶1,最大年龄73岁,最小13岁。我院使用仪器为东芝88A8型线阵实时超声诊断仪.探头频率4.0MHz。病人取仰卧位,膀胱充盈,沿耻骨上做腹壁常规扫查,探头做前后扇形侧动多切面扫查,并随时做灵     

线粒体基因突变对氧化磷酸化的影响及其在阿尔茨海默病发病中的意义

近年研究发现，阿尔茨海默病(AD)患者线粒体细胞色素氧化酶(COX)活性选择性降低，部分患者特异性存在线粒体DNA(mtDNA)COX基因突变。我们于2000～2002年以AD胞质杂交细胞(cybrid)为实验模型，观察mtDNA基因突变对线粒体氧化磷酸化(OXPHOS)及β-淀粉样蛋白(AB)产生、神经原纤维缠结(NFT)形成和神经元凋亡的影响，探讨mtDNA基因突变在AD发病中的意义。     

人骨髓基质细胞冻存技术的初步研究

目的　探索适合于人骨髓基质细胞 - 196℃冷冻保存条件和方法。方法　以人髂骨区骨髓为材料进行体外人骨髓基质细胞培养 ,传代后以不同浓度二甲亚砜 (DMSO)的冻存液及不同的细胞浓度在液氮中保存 ,2个月后复苏接种培养 ,对其存活率、贴壁率和体外成骨能力进行检测。结果　不同DMSO浓度保存细胞复苏后细胞的存活率从高到低依次为 10 %DMSO组、5 %DMSO组、15 %DMSO组、2 0 %DMSO组 ;在条件培养液中 2周形成多层结构 ,并出现细胞结节 ,碱性磷酸酶染色阳性 ;冻存时细胞浓度为每毫升 (5 .0～ 8.0 )× 10 6个细胞组复苏后细胞存活率高于每毫升 (1.0～2 .5 )× 10 6个细胞组。结论　 5 % - 10 %DMSO浓度适合于骨髓基质细胞的长期保存 ,高浓度组骨髓基质细胞的冻存效果优于低浓度组。     

人胚胎肝细胞的体外培养及其生物学特性

报道人胚胎肝细胞体外培养的方法及所培养肝细胞的生物学特性。用胰蛋白酶消化人胚胎肝组织小块，可获７０％以上具有正常代谢活性的肝细胞。分离的肝细胞在ＤＭＥＭ培养基中生长良好，传代６次，历时５个月。将第２、３代细胞冻在于液氮中，３个月后复苏，６０％的细胞仍具有活性，能贴壁生长。收集培养物上清液作白蛋白和甲胎蛋白（ＡＦＰ）测定。结果显示：此种培养细胞具有分泌白蛋白和ＡＦＰ的功能，随着培养时间的延长和传次代数的增加ＡＦＰ含量逐渐减少。本研究为进一步探讨肝细胞的生物学特性及癌变机制提供了实验模型。     

血清CA125、CA199对肝硬化和肝癌的诊断价值

CA125为分子量在200—1000KD的大分子糖蛋白，大量临床研究证实：CA125在卵巢癌的诊断、良恶性鉴别、复发预报、疗效监测以及预后判断等方面有效大的实用价值。CA199是Koprouski等1979年从人结肠癌细胞株中提取出来的一种糖蛋白．主要在胎儿的小肠黏膜杯状细胞、胰胆管上皮细胞及成人胰腺癌、胃癌、结肠癌时合成，主要用于胰腺癌的早期诊断，     

人参单体Rh2对肺腺癌耐药细胞促凋亡作用的研究

目的探讨人参单体Rh2对肺腺癌耐药A5 49DDP细胞的促凋亡作用。方法用MTT法分别检测顺铂和Rh2对A5 49细胞、A5 49DDP细胞的抑制率(IC)。将Rh2作用于A5 49DDP细胞,Hoechst3 3 2 5 8染色荧光显微镜下观察细胞核形态,流式细胞仪检测细胞跨膜电位(Δψ)。结果顺铂对A5 49细胞、A5 49DDP细胞的IC50 分别为2 4 μmol/L、32 5 μmol/L ,耐药指数为13.5 4。Rh2 >10 μmol/L时,对A5 4 9DDP细胞有明显抑制作用,且与Rh2的浓度有一定的依赖关系。Rh2作用后A5 4 9DDP细胞核缩小或变形,荧光成团块分布,有凋亡小体形成;细胞线粒体跨膜电位显著性降低(P <0 .0 1)。结论Rh2能促使A5 4 9DDP细胞凋亡,其可能是通过降低细胞的线粒体跨膜电位来诱导细胞凋亡。     

兔骨髓基质细胞培养及其体外成骨能力

目的观察兔骨髓基质细胞在体外的培养条件及其成骨过程，为研制骨组织工程材料选择种子细胞奠定一定实验基础。方法取兔长管骨骨髓为材料进行体外培养，传代后改用条件培养基进行培养，通过倒置显微镜观察、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)染色、Ⅰ型胶原免疫组化染色等方法进行检测。结果传代细胞培养3、4d后融合成单层，培养12d细胞形成多层结构，并聚集成多个散在的黑色结节，细胞富含碱性磷酸酶活性，Ⅰ型胶原染色阳性，这与典型成骨细胞的生物学特性相似。结论体外培养的兔骨髓基质细胞具有成骨能力，可作为骨组织工程学研究的种子细胞。     

99Tcm-MIBI在癌组织中的摄取与跨膜电位或肺耐药蛋白相关性

目的探讨99Tcm-MIBI检测肺腺癌A549DDP细胞的耐药性的机制.方法用MTT法检测顺铂对敏感A549细胞的IC50及有或无顺铂再处理后的A549DDP细胞的IC50.将上述细胞注入裸鼠皮下建立模型后,用99Tcm-MIBI进行SPECT显像,以免疫组化方法检测移植瘤细胞的LRP蛋白表达,流式细胞仪检测癌细胞的跨膜电位.结果顺铂对A549细胞、A549DDP细胞的IC50分别为24、325、182 μM.A549裸鼠99Tcm-MIBI 显像可见瘤块放射性浓聚影,A549DDP裸鼠亦可见瘤块的放射性浓聚影,其放射性浓度较前者明显减淡(P<0.05).A549移植瘤细胞LRP蛋白呈阴性,无顺铂再处理的A549DDP移植瘤细胞LRP蛋白表达呈阳性,顺铂再处理的A549DDP移植瘤细胞LRP蛋白表达呈强阳性,三者间有显著性差异(P＜0.01).各组细胞的LRP蛋白的表达与99Tcm-MIBI摄取值呈弱的负相关(r＝-0.59,P＜0.05).三种细胞跨膜电位有显著性差异,跨膜电位与99Tcm-MIBI 摄取值呈较强的负相关(r＝-0.71,P＝0.005).结论 99Tcm-MIBI检测肺腺癌耐药的A549DDP细胞的耐药性与细胞的跨膜电位关系密切,能在某种程度上反映肺癌LRP蛋白的表达.     

人胃肠间质瘤细胞系的建立及其生物学特性

目的：从切除的人小肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumors, GIST)组织建立一株间质瘤细胞系,初步鉴定其生物学特性。方法：取人小肠间质瘤组织切成小块,置于含10%胎牛血清、青霉素、链霉素和庆大霉素的RPMI 1640培养基中进行培养,待细胞长满90%汇合面后消化传代培养,并进行形态学、生长动力学、免疫组织化学（免疫组化）及致瘤性等生物学特性研究。结果：成功建立GIST细胞系,命名为GIST-H1 细胞系。该细胞系已在体外培养生存1年,传60余代。免疫组织化学分析显示该细胞CD117（+）,SMA（+）,dog-1（+）,CD34（-）及S-100（-）;该细胞系体外生长的倍增时间为47.5 h;软琼脂集落形成率为24.8%;透射电镜下可观察到该细胞富含线粒体和内质网,多数细胞表面无绒毛,胞核呈卵圆形;染色体核型分析为非整倍体,众数为60~98条;该细胞接种至裸鼠皮下后致瘤性为100%。结论：间质瘤细胞系在体外长期培养后已永生化,形成了可连续传代的细胞系,且具有明显的间质瘤细胞恶性表型特征。     

8株人黑色素瘤细胞系的建立及其生物学特性研究

目的：从人黑色素瘤组织建立一系列黑色素瘤细胞系，命名为黑色素瘤细胞系1-8号（HME1-8），并研究鉴定其体外细胞生物学与免疫学特性。方法：取黑色素瘤组织进行组织块培养法，待长满90%汇合面后消化传代培养，并进行形态学、生长动力学、免疫学及致瘤性等生物学特性研究。结果：该系列黑色素瘤细胞系已在体外培养生存1-2年，传60-100余代，其生物学特性显示：①这些细胞系体外生长的倍增时间为34.2-59.5h；②软琼脂集落形成率平均值在8.6%-26.2%之间；③接种至裸鼠后具有较高的致瘤性；④染色体核型分析为非整倍体，众数为64-117条；⑤ 透射电镜下可观察到细胞含丰富的核糖体及黑色素颗粒；⑥免疫组化分析显示细胞浆内含大量阳性棕色黑色素颗粒；⑦肿瘤抗原检测显示8株黑色素瘤细胞系的Melan-A抗原阳性率为75%, MAGE-1阳性率为50%, MAGE-2阳性率为37.5%，MAGE-3阳性率为62.5%。结论：8株黑色素瘤细胞系经体外长期培养后已永生化，形成了连续传代细胞系，具有明显的黑色素瘤细胞恶性表型特征。