基于网络药理学和分子对接技术芩苏胶囊干预新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的潜在药效物质预测分析

目的运用网络药理学和分子对接技术探究芩苏胶囊防治新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的潜在药效物质。方法采用中药系统药理学分析平台(TCMSP)检索出芩苏胶囊中4味药材(黄芩、紫苏子、苦参和丹参)所含有效成分与作用靶点;通过UniProt、GeneCards和OMIM数据库,筛选出COVID-19相关靶点,得到与芩苏胶囊有效成分作用的共同靶点,采用String数据库构建PPI网络;借助Cytoscape3.7.2构建"中药-化合物-靶点"网络;运用DAVID数据库对相关靶点进行GO功能和KEGG通路的富集分析;通过分子对接技术评价"中药-成分-靶点"网络中核心成分与COVID-19的3CL水解酶及血管紧张素转化酶Ⅱ(ACE2)的结合作用。结果芩苏胶囊"中药-成分-靶点"网络121个化合物和274个相关靶点,包含14个核心化合物和33个核心靶点。GO功能富集分析得到527个条目,主要涉及药物应答、炎症反应、RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控等。KEGG路富集共得到111条信号通路,筛选得到20条信号通路,涉及乙型肝炎、甲型流感、肺结核等与病毒感染相关的通路。分子对接表明,芩苏胶囊中14个核心成分与COVID-19的3CL水解酶和ACE2的亲和作用较好。质谱指认出芩苏胶囊中5个成分可能是防治COVID-19的核心成分。黄芩素、汉黄芩素、隐丹参酮、丹参酮ⅡA和木犀草素是芩苏胶囊治疗COVID-19的核心药效物质。结论芩苏胶囊可能通过多成分结合SARS-CoV-2 3CL水解酶及ACE2作用于IL-6、TNF和TP53等关键靶点调节多条信号通路,从而对COVID-19起到治疗作用。     

基于有效基准特征图谱质量表征模式的中药紫苏叶质量评价研究

目的建立基于紫苏叶有效基准特征图谱的质量表征模式、方法与质量评价应用,以精准、有效地评价紫苏叶饮片质量。方法以确定具有调节血脂活性的紫苏叶饮片作为饮片基准,以有效特征指标性成分作为质量表征基准点,采用HPLC-PDA法建立有效基准特征图谱,并以有效基准特征图谱的质量表征信息作为评价紫苏叶饮片质量的标尺,同时对其准确性进行佐证。结果以野黄芩苷为基准点(保留时间:30.342 min;饮片含量:0.573 4%;检测溶液浓度:0.057 34 g/L),表征紫苏叶有效饮片基准(S1)特征图谱质量信息:14个特征峰保留时间、峰面积、相对保留时间、相对峰面积,6个特征指标性成分(咖啡酸、木犀草素-7-氧-二葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7-氧-二葡萄糖醛酸苷、野黄芩苷、迷迭香酸、齐墩果酸)含量、相对含量及含量换算系数,其涵盖了酚酸类、黄酮类及三萜类药学架构主要化学类型。同时以野黄芩苷对照品模拟基准点(保留时间:29.759 min;检测溶液浓度:0.057 3 g/L)表征质量信息,二者相吻合佐证了检测方法可行性及检测结果的准确性。14批待评价紫苏叶饮片色谱图中均含有此14个特征峰,6个特征指标性成分换算含量与实测含量相吻合;以有效基准质量表征信息为标尺评价14批紫苏叶饮片质量,综合得出编号S8、S7、S12、S9、S13饮片优良度居前。结论建立的基于紫苏叶有效基准特征图谱的质量表征模式、方法,可简易、准确、整体地表征紫苏叶饮片质量;构建的紫苏叶质量评价模式可有效、精准地评价紫苏叶饮片质量。     

一测多评法测定复方白芷止痛胶囊中4种指标成分

目的以欧前胡素为内标物,建立测定复方白芷止痛胶囊中阿魏酸、绿原酸、异欧前胡素多种指标性成分含量的一测多评方法。方法采用HPLC,色谱柱为Thermo Hypersil GOLD(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.2%甲酸为流动相,梯度洗脱,柱温30℃,检测波长分别为320 nm(绿原酸、阿魏酸)和300 nm(欧前胡素、异欧前胡素),流速为1 mL/min进行测定。以欧前胡素为内标物,建立复方白芷止痛胶囊中阿魏酸、绿原酸、异欧前胡素的相对校正因子。结果复方白芷止痛胶囊中阿魏酸、绿原酸、异欧前胡素的相对校正因子重现性良好,分别为1.16、2.00、1.00,一测多评法测定结果与外标法比较无显著差异。结论以欧前胡素为内标物建立复方白芷止痛胶囊多种指标性成分的一测多评法结果准确性良好,方法可行,可作为复方白芷止痛胶囊的质量控制方法。     

基于特征图谱的金银花与山银花(灰毡毛忍冬)质量表征比较研究

目的阐明金银花与山银花药学质量表征的共性与特性。方法采用HPLC-DAD法,Waters XBridge C18分析柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.4%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长为211 nm,柱温30℃,建立金银花和山银花特征图谱质量表征方法;基于特征图谱中的特征峰的所属化学类型及代表性成分的峰面积和含量对15批金银花和10批山银花饮片进行药学质量表征,并对二者的药学质量特点进行比较分析。结果(1)建立的金银花和山银花的特征图谱及质量表征方法表征了二者质量表征特征值:特征峰、相对保留时间、相对峰面积、代表性成分含量及其相对含量。(2)金银花和山银花均具有特征峰30个,其药学架构涵盖4种化学类型,其中金银花/山银花各类型特征峰数目分别为:环烯醚萜类16/6,酚酸类8/11,黄酮类4/5,三萜皂苷类2/8个。(3)二者具有共有特征峰15个,其中环烯醚萜类6个、酚酸类6个、黄酮类2个、三萜皂苷类1个。(4)在金银花/山银花特征峰中指认了11个代表性成分:环烯醚萜类3/2、酚酸类6/6、黄酮类1/1、三萜皂苷类1/2;其代表性成分含量(mg/g)分别为:断氧化马钱子苷(21.756~29.826)/(6.936~14.643)、獐芽菜苦苷(12.204~30.139)/(26.109~31.608)、当药苷(13.806~23.27/(-),绿原酸(24.686~36.595)/(36.796~42.979)、异绿原酸A(14.010~20.452)/(50.544~58.013)、异绿原酸C(2.896~4.681)/(6.986~7.960)、异绿原酸B(0.935~1.260)/(1.389~1.738)、新绿原酸(0.888~1.560)/(2.025~2.635)、隐绿原酸(0.565~0.852)/(0.947~1.122),木犀草苷(0.579~0.690)/(0.527~0.642),灰毡毛忍冬皂苷乙(14.471~20.243)/(35.487~54.576)、川续断皂苷乙(-)/(31.191~35.731)。结论建立的特征图谱质量表征方法可准确地表征金银花与山银花的药学质量,二者质量表征共性为:具有相同的药学架构及部分共有特征成分;又具有明显的特性:金银花环烯醚萜类特征峰较多,当药苷为其特有环烯醚萜类成分,断氧化马钱子苷和木犀草苷的含量高于山银花;而山银花酚酸类和三萜皂苷类特征峰较多,川续断皂苷乙为其特有三萜皂苷类成分,异绿原酸A、灰毡毛忍冬皂苷乙、绿原酸、獐芽菜苦苷、异绿原酸C、新绿原酸、异绿原酸B和隐绿原酸的含量均高于金银花。研究结果可为金银花与山银花的质量控制及合理应用提供科学依据。     

桂枝茯苓胶囊中白芍牡丹皮共有成分大孔树脂纯化工艺研究

目的:考察白芍、牡丹皮共有成分芍药苷的大孔树脂纯化工艺。方法:以芍药苷为指标,考察了树脂型号、洗脱溶媒以及树脂重复使用对其吸附、解吸的影响。结果:选用D101大孔吸附树脂,30%乙醇洗脱,洗脱率达到90.07%。树脂可重复使用18次后,再彻底进行活化再生。结论:D101大孔吸附树脂适用于白芍、牡丹皮共有成分芍药苷的富集。     

砂仁酚类特征成分含量测定及其特征图谱质量表征关联分析研究

目的:建立砂仁酚类特征指标性成分的含量测定及酚类特征图谱的质量表征关联分析方法,应用此方法和评价模式,有效精准地评价砂仁质量。方法:采用HPLC-PDA法同时测定砂仁饮片中5个特征指标性成分(原儿茶酸、香草酸、儿茶素、表儿茶素、槲皮苷)的含量,并建立砂仁饮片酚类特征图谱,基于特征图谱中特征峰的数量及其所属化学类型对11批砂仁饮片进行质的表征;基于特征图谱中特征指标性成分及黄酮类(以儿茶素表征)成分的含量和峰面积分别对11批砂仁饮片进行量的表征,并基于基准参比饮片将11批砂仁饮片质与量的表征结果进行关联性分析。结果:测定的5个特征指标性成分均具有良好的线性关系,方法学考察均符合定量测定要求;综合基于特征性成分、类型成分的含量、相对含量、峰面积及相对峰面积的质量表征,以批号5的样品为基准,批号11、1、4、2、8、10的总体含量高,批号8、6、7、10、4、3的关联性最高,整体得出:11、1、4、2、8、10、6、7等批号的饮片质量较好。结论:建立的含量测定方法简便、准确,可用于砂仁饮片特征指标性成分含量测定;构建的质量表征关联分析模式可用于分析砂仁质量整体性与应用有效性,为砂仁饮片的质量控制及评价提供可靠方法学依据。     

基于灰色关联度和偏最小二乘回归分析的芩苏胶囊抑菌谱效关系研究

目的 基于灰色关联度法和偏最小二乘法研究芩苏胶囊抑菌作用的谱效关系。方法 使用高效液相色谱(HPLC)法建立10批芩苏胶囊的指纹图谱,采用管碟法测定芩苏胶囊(0.3 g·mL^-1)对5种常见致病菌(金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、肺炎链球菌)的抑菌活性,使用灰色关联度分析法结合偏最小二乘法构建谱效关系。结果 10批样品指纹图谱中有37个共有峰,芩苏胶囊对5种致病菌均具有一定的抑菌作用,对金黄色葡萄球菌有较好的抑菌作用。6、10(迷迭香酸)、14、17(丹酚酸B)号峰为芩苏胶囊抑制金黄色葡萄球菌的主要成分;10(迷迭香酸)、17(丹酚酸B)、35(苦参碱)、37(氧化苦参碱)号峰为抑制大肠埃希菌的主要成分;6、7、8、9、10(迷迭香酸)、14、17(丹酚酸B)、27、31(丹参酮Ⅰ)、37(氧化苦参碱)号峰为抑制铜绿假单胞菌的主要成分;8、9、10(迷迭香酸)、14、17(丹酚酸B)、37(氧化苦参碱)为抑制肺炎克雷伯菌的主要成分;5、23(汉黄芩素)、27、30、31(丹参酮Ⅰ)、32、33(丹参酮Ⅱ_A)、34(槐果碱)、36(氧化槐定碱)、37(氧化苦参碱)号峰为抑制肺炎链球菌的主要成分。结论 通过谱效关系研究明确了芩苏胶囊抑菌药效作用是多种成分共同作用的结果,可为芩苏胶囊的药效物质基础研究与质量控制提供参考。     

桂枝茯苓胶囊中白芍牡丹皮共有成分大孔树脂纯化工艺研究

目的:考察白芍、牡丹皮共有成分芍药苷的大孔树脂纯化工艺.方法:以芍药苷为指标,考察了树脂型号、洗脱溶媒以及树脂重复使用对其吸附、解吸的影响.结果:选用D101大孔吸附树脂,30%乙醇洗脱,洗脱率达到90.07%.树脂可重复使用18次后,再彻底进行活化再生.结论:D101大孔吸附树脂适用于白芍、牡丹皮共有成分芍药苷的富集.