上海部分区域人乳头瘤状病毒基因分型及感染状况

目的对上海市浦东高桥地区妇女人乳头瘤状病毒(HPV)的基因型分布及感染状况进行分析,为上海市浦东高桥区域内宫颈癌的预防提供指导。方法收集本院妇女宫颈脱落细胞样本9 843例进行HPV基因的分型检测。结果 9 843例妇女样本中,HPV总感染率为16.64%(1 638/9 843),HPV阳性的患者中,以高危型为主,占76.86%(1 259/1 638)。HPV感染类型中,以单一感染为主,占73.50%(1 204/1 638),其次为双重感染占18.38%(301/1 638),双重以上感染合计占8.12%(1 33/1 638)。21种基因亚型均被检出,低危型感染中常见亚型为HPV81(CP8304),检出率为1.7%(63/9 843)。高危型感染中常见亚型为HPV52、16、58、51,检出率依次为3.28%(323/9 843)、2.3%(235/9 843)、1.99%(196/9 843)、1.97%(194/9 843)。不同年龄组妇女感染率各不相同,差异有统计学意义(P0.01)。≤20岁和51~60岁2年龄组感染率较高,分别为26.78%(49/183)、22.89%(168/734)。各年龄组别妇女常见HPV亚型分布各不相同。结论上海市浦东高桥地区女性HPV感染主要以高危型、单一感染为主,常见HPV亚型为52、16、58、51、81(CP8304),各年龄段妇女感染HPV亚型分布各不相同。     

肺泡灌洗液同时查见超鞭毛虫及泡沫样巨噬细胞形态学分析

肺泡灌洗液中查见超鞭毛虫或泡沫样巨噬细胞甚为少见．两者同时查见更为罕见。现通过临床资料及实验室检查，特别对其形态学特点与同行一起进行分析探讨。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药基因分布情况及其同源性探讨

目的：了解对碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯杆菌（CR-KP）中碳青霉烯酶的主要类型及流行情况。方法：收集我院2016 年1月至2017年12月对厄他培南、亚胺培南或美罗培南药敏试验结果不敏感的CR-KP共34 株,根据CLSI M100S-27th文件的改良碳青霉烯灭活试验确证其是否为产酶菌株,通过PCR方法扩增5种碳青霉烯酶基因（bla KPC、bla IMP、bla OXA-48、bla VIM、bla NDM）,PCR扩增产物进行测序明确基因型;通过脉冲场凝胶电泳对肺炎克雷伯菌进行同源性分析。结果：34株肺炎克雷伯菌经改良碳青霉烯灭活试验确证均为产酶菌株,PCR检测显示均为KPC-2型酶。脉冲场凝胶电泳（PFGE）结果显示34株菌可分为5组,其中1、2、4组为主要流行菌株。结论：院内存在以KPC-2为主要耐药基因的CR-KP克隆株的流行,且主要以重症医学科耐药株流行,34株菌间存在不同程度的亲缘关系。     

老年人尿路感染病原菌分布及耐药性分析

目的:分析老年人尿路感染的病原菌分布及耐药状况,指导临床合理应用抗生素。方法:用ATB—ex-pression半自动细菌分析鉴定仪对285例尿路感染的老年患者分离出的病原菌进行鉴定,用微量稀释法进行药敏试验。结果:共检出病原菌312株,其中革兰阴性杆菌占64.4%,主要为大肠埃希菌(44.2%)、肺炎克雷伯菌(7.1%)、铜绿假单胞菌(6.0%)、变形杆菌(4.5%),对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星耐药率低(0%~29%),革兰阳性球菌占22.4%,对万古霉素、替考拉宁耐药率为0。真菌占12.2%,对两性霉素B、5-氟胞嘧啶耐药率为0。结论:老年人尿路感染病原菌耐药性严重,持续耐药监测是十分重要的。     

项目导向教学法在医学检验实习生临床实习中的应用

目的探讨项目导向教学法在检验医学专业实习生临床实习的教学效果。方法通过将我院检验本科专业48名学生随机均等分为实验组和对照组两组,实验组和对照组分别采用项目导向教学法和传统面授教学方法进行教学,教学人员及教学内容相同,课程结束后分别对两组实习同学进行相同的理论知识及实践技能操作等方面的测评。结果实验组学生理论知识成绩、实践技能操作成绩均高于对照组,差异具有统计学意义(P 0.05);通过对学生的匿名问卷调查显示,项目导向教学法可以有效的提升学生实习效果,同时在提升学生团队协作项目上有显著作用。结论项目导向教学法明显提高了医学检验专业实习生的各项能力;提升了临床带教效果。     

肺泡灌洗液同时查见超鞭毛虫及泡沫样巨噬细胞形态学分析

肺泡灌洗液中查见超鞭毛虫或泡沫样巨噬细胞甚为少见．两者同时查见更为罕见。现通过临床资料及实验室检查，特别对其形态学特点与同行一起进行分析探讨。     

慢性乙型肝炎病毒感染患者外周血CD8~+ T淋巴细胞表面淋巴细胞活化基因3水平升高

目的观察慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染处于不同自然史患者外周血T淋巴细胞表面淋巴细胞活化基因3(LAG-3)表达的变化,探讨抑制性受体LAG-3在T细胞的表达变化与处于不同自然史慢性HBV感染者血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乙型肝炎病毒(HBV)e抗原(HBe Ag)和HBV DNA水平的关系。方法选取处于慢性HBV感染自然史为免疫耐受期(IT)患者24例、免疫清除期(IC)32例和非活动或低复制期(LR)患者31例,健康体检者30例为正常对照(HC)。应用流式细胞术检测外周血CD8+T细胞和CD4+T细胞表达LAG-3的比例;免疫分析法、生化分析法和PCR分别检测患者肝脏功能、HBV血清学标志物和HBV DNA水平。采用Mann-Whitney U检验分析各组间T细胞LAG-3表达率的差异;Spearman等级相关性分析各期慢性HBV感染患者外周血T细胞LAG-3表达阳性率与血清ALT、HBV DNA和HBe Ag水平的相关性。结果慢性HBV感染者外周血LAG-3+CD8+T细胞的比例较HC组显著增高,且处于IT期的患者外周血LAG-3+CD8+T细胞的比例明显高于IC期或LR期患者及HC组。处于IC期患者外周血LAG-3+CD8+T细胞和LAG-3+CD4+T细胞比例与患者血清中ALT水平呈显著负相关;IT组患者外周血LAG-3+CD8+T细胞和LAG-3+CD4+T细胞比例与血清中HBe Ag呈正相关。然而,不同自然史慢性HBV感染患者外周血LAG-3+CD4+T细胞比例和LAG-3+CD8+T细胞比例与血清HBV DNA水平无相关性。结论 LAG-3在慢性HBV感染患者外周血CD8+T细胞高表达,尤其是IT期患者CD8+T细胞高表达,可能是造成CD8+T细胞功能低下、HBV在肝脏长期复制的重要因素之一。     

自建两轮PCR法对低载量HBV DNA S区基因的扩增及实验条件优化

目的 探究低载量HBV DNA S区基因扩增的可行性并对实验条件进行优化,为隐匿性HBV感染(OBI)患者HBV DNA S区基因突变检测提供依据.方法 采用传统巢式PCR和自建两轮PCR方法扩增6例低HBV DNA载量(100～200 IU/mL)和22例更低HBV DNA载量(20～99 IU/mL)的血清样本中HBV DNA S区基因,并对引物序列、引物量、PCR产物模板稀释倍数、退火温度、PCR反应循环数、PCR总反应体系等条件进行优化.PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,切割目的条带凝胶进行克隆测序,然后对克隆测序结果进行核酸序列BLAST比对确认.结果 设计3对巢式PCR引物(P1～P3),扩增产物理论上包含整个HBV DNA S区基因.经过PCR扩增条件优化后,6例低HBV DNA载量的血清样本中仅2例经巢式PCR扩增出HBV DNA S区基因特异性靶序列,22例更低HBV DNA载量样本无一例扩增成功.自建两轮PCR法设计了P4～P15共12对引物,扩增产物理论上包含整个HBV DNA S区基因.经过PCR扩增条件优化并筛选出P13为最佳引物后,6例低HBV DNA载量的血清样本全部扩增出HBV DNA S区基因特异性靶序列;15例(15/22,68.18％)更低HBV DNA载量的样本扩增出HBV DNA S区基因特异性靶序列,经PCR产物克隆测序均证实为HBV DNA S区基因,该15例样本中HBV DNA载量最低为20.1 IU/mL.结论 基于引物P13自建的两轮PCR法更适用于低载量HBV DNA S区基因的扩增,扩增效率和特异性均优于传统巢式PCR;扩增产物可进一步应用于OBI者HBV DNA S区基因序列突变分析.     

146株流感嗜血杆菌的生物学分型及耐药性分析

目的 了解引起呼吸道感染的流感嗜血杆菌主要生物型及其对常用抗生素的耐药性.方法 收集上海市第七人民医院2005年1月～2009年4月146株流感嗜血杆菌临床分离株,采用API NH细菌鉴定并进行生物学分型,头孢硝噻吩纸片法进行β-内酰胺酶试验,微量稀释法进行药物敏感试验.结果 流感嗜血杆菌Ⅰ型分离率最高为39.0%,其次为Ⅰ型29.5%.Ⅰ型27.4%,Ⅳ～Ⅶ型4.1%.产β-内酰胺酶菌株占49.3%,其中Ⅱ型、Ⅲ型产酶率高分别为66.7%和62.8%,Ⅰ型产酶率仅为17.5%,其它生物型中未检出.流感嗜血杆菌对氨苄西林、复方磺胺耐药率高,分别为46.6%,41.1%,对阿莫西林/克拉维酸、左氧氟沙星、头孢噻肟耐药率为0.结论 呼吸道流感嗜血杆菌感染的主要生物型是Ⅰ型,菌株产β-内酰胺酶严重,含酶抑制剂抗生素、氟喹诺酮类、三代头孢菌素可作为产酶菌株的首选药物.