膈下逐瘀汤加减方对气滞血瘀型输卵管炎性不孕模型大鼠DA、NE表达的影响

目的:通过观察膈下逐瘀汤加减方(GD)对模型大鼠中医证候评分、血流变、去甲肾上腺素(Norepinephrine, NE)和多巴胺(Dopamine, DA)的表达水平、输卵管病理表现及输卵管组织形态,来探讨GD治疗气滞血瘀型输卵管炎性不孕症的作用机制。方法:将100只SD大鼠随机分为空白组(K)、病证结合组(B)、膈下逐瘀汤高剂量组(H)、膈下逐瘀汤中剂量组(M)、膈下逐瘀汤低剂量组(L),每组20只。除K组外,余雌性大鼠,先于输卵管接种金黄色葡萄球菌制备成输卵管炎症模型,后进行声、光、电+夹尾复合刺激。气滞血瘀型慢性输卵管炎大鼠模型制备成功后,从实验第29天开始,H、M、L三组分别给予相应浓度的GD液灌胃,B组用等体积蒸馏水代替,持续给药28 d。于末次给药后的第二天,每组随机选取12只大鼠行腹主动脉取血,测定血流变学指标,Elisa法检测大鼠血清中DA、NE的含量;取模型大鼠双侧输卵管组织,行HE染色制备病理切片及进行电镜观察输卵管组织形态。结果:与K组相比,B组的中医证候积分、血液流变学指标以及血清DA、NE的表达均有极为显著的变化(P<0.01)。与B组相比较,经过高、中剂量GD治疗的大鼠血液流变学指标及DA、NE的表达有显著性差异,具有统计学意义(P<0.05)。病理结果显示:B组模型大鼠输卵管病理表现最为严重,治疗后的H、M、L组病理表现均减轻,其中H组最优。电镜下观察输卵管组织形态显示:B组模型大鼠输卵管的病态组织形态最重,表明模型制备成功,经治疗后,H、M、L组输卵管组织形态均有不同程度的改善作用。结论:GD可以明显改善模型大鼠中医证候积分、血液流变学指标、DA、NE的表水达平、病理表现及输卵管组织形态,对气滞血瘀型输卵管炎不孕症起到积极的治疗作用。     

乙肝表面抗原阳性病人的术中管理

手术病人乙肝表面抗原阳性临床特别多见,而乙肝的传播途径最主要的是血液传播,带菌者千分之一滴血就可经过伤口、黏膜直接传播给他人。所以手术室工作人员必须做好乙肝表面抗原阳性病人术中、术后一系列处理工作,以防再感染,造成医源性感染。     

应用局部皮瓣修复上睑全层缺损一例报告

目的探讨局部皮瓣修复上睑全层缺损的价值。方法2007年3月,对一例狗咬伤所致的右侧上睑全层缺损进行急诊局部皮瓣修复手术。结果术后随访45d,右侧上睑外形满意,功能良好。结论应用局部皮瓣急诊修复眼睑全层缺损,术后效果满意,可避免Ⅱ期手术和睑缘缝合。     

齿槽裂修复方法的研究进展

目的 探讨齿槽裂修复治疗的目的、方法以及治疗时机的选择。方法 查阅1950年至2006年有关齿槽裂修复的文献，归纳文献中报道的不同方法，并评价其各自的优缺点。结果 齿槽裂修复的主要目的：关闭口鼻瘘；建立稳定、连续的上颌骨牙弓；为牙齿萌出提供基础；为上唇和鼻底提供稳定支架。主要治疗方法：植骨术；牵引成骨技术；组织工程骨和生长因子应用；引导骨再生技术。患者最佳的手术治疗时机是9～11岁时混合牙列期。结论 在9～11岁混合牙列期手术，以髂骨松质骨为移植材料被认为是修复齿槽裂的主要手段。牵引成骨技术、组织工程技术和引导骨再生技术，将是齿槽裂修复的新方向。     

组织工程骨血管化的研究进展

近几年,组织工程领域已取得了很多的研究进展,为修复各种原因造成的组织缺损展示了一条新的治疗途径,但由于种种原因仍无法应用于临床。就骨组织工程而言,骨的血管化问题就是导致组织工程化骨组织无法应用于临床的重要原因之一。以往的研究已经证实,种子细胞的存活范围在血供弥散的150～200μm内[1]。如果血管化不能解决,具有较大体积的组织工程化骨组织就难以构建。因此,血管化已是骨组织构建中面临的重要问题。1新生血管形成新生血管形成有两种机制[2]:血管生成(Vasculogenesis)及血管再生(Angiogenesis)。血管生成是血管祖细胞的原位聚…     

贴心护理在手术室中的应用

目的：提倡做好贴心护理。使患者在生理、心理上达到愉快的状态,或降低不愉快的程度,提高治愈率。方法：将贴心护理运用到手术患者中,观察其疗效分析其可行性。结果：患者对手术充满信心,在心理上获得满足感和安全感,从而加快疾病的治愈。结论：贴心护理是保证病人安全,使手术顺利进行的有效护理措施。     

人羊水来源干细胞与生物可降解材料体内外复合培养构建组织工程膀胱平滑肌

目的 探讨体外高效地诱导人羊水来源干细胞向平滑肌样细胞的分化,评估细胞与聚羟基乙酸(PGA)支架复合物的生物相容性,由此探讨该复合物用于组织工程膀胱平滑肌重建的可行性.方法 孕中期B超引导下穿刺抽取羊水,体外分离挑选原代人羊水来源的干细胞(hAFCESs),取第三代细胞用肌源性生长因子(PDGF-BB)和转化生长因子β1(TGF-β1)和左旋维生素C(L-AA)在体外分别诱导分化3周、4周和5周,然后光镜下观察诱导后细胞生长的形态变化,免疫荧光细胞染色和RT-PCR检测平滑肌细胞的标志物.取第四代人羊水来源干细胞种植到非编织PGA材料上,体外诱导培养4周后移植到裸鼠背部皮下,4周后取材进行体内外种植效果的评价.结果 hAVESCs体外增殖能力强,RT-PCR、免疫荧光细胞染色显示经诱导的hAFCSCs表达平滑肌细胞的标志物平滑肌肌动蛋白(α-SMA),肌钙蛋白(CALP),平滑肌22α(SM22α)和肌球蛋白重链(MHC).PGA支架上的hAFCSCs在种植4 h后开始正常贴附、生长和增殖,细胞形态良好.扫描电镜显示hAFCSCs紧密贴附到PGA支架材料上并分泌细胞外基质.冰冻切片免疫荧光染色显示组织块中表达平滑肌细胞的标志物.结论 hAFCSCs能在肌源性生长因子(PDGF-BB和TGF-β1)和左旋维生素C(LAA)的诱导作用下高效地分化为平滑肌样细胞.复合hAFCSCs的PGA支架体外具有良好的生物相容性及体内较好的组织相容性,表明以hAFCSCs为种子细胞、PGA为支架构建组织工程膀胱平滑肌具有可行性.

Abstract：

Objective To investigate the potential of human amniotic fluid colony-derived stem cells (hAFCSCs) efficiently differentiating into smooth musle cells,and evaluate the biocompatibility of cell-PGA composite scaffolds and the fesibility of reconstraction of bladder smooth muscle tissue in vitro and in vivo . Methods hAFCSCs were obtained from second trimester amniotic fluid by ultrasound-guided amniocentesis performed on pregnant women. After expended in vitro, the 3rd generation hAFCSCs were induced in myogenic differentiation medium supplemented by myogenic growth factors (PDGF-BB and TGF-(31) and L-Ascorbic acid(L-AA) for 3 weeks,4 weeks and 5 weeks,and the differentiated cells were identified morphologically and the myogenic phenotype were detected by gross observation,RT-PCR and immunofluorescence staining. The 4th generation hAFCSCs cells were seeded onto polyglycolic acid (PGA) unwoven fiber scaffolds and cultured for 4 weeks in vitro in myogenic differentiation medium, then PGA-cell composite scaffolds and pure scaffolds were separately implanted into subcutaneous pockets of nude mice. After 4weeks of implantation, the specimens were harvested and examined. Results The hAFCSCs expended rapidly in vitro. After induction with myogenic growth factors and L-AA,RT-PCR and immunofluorescence staining demonstrated that a-smooth muscle actin(α-SMA), calpommCALP ) smooth muscle 22a (SM22α) and myosin heavy chain(MHC) were expressed. The adhesion and proliferation of hAFCSCs on PGA fiber scaffolds were observed after 4 h.. As polymer degradation degraded, the hAFCSCs kept proliferation and converged. Microscopic and scanning electron microscope (SEM) observations showed that hAFCSCs spreaded over the PGA fibers with secreted extracellular matrices filling the space among the fibers. . Conclusions hAFCSCs derived from second trimester amniotic fluid can be efficiently induced into smooth muscle cells by myogenic growth factors (PDGF-BB and TGF-β1) and L-AA in vitro. The PGA possesses good biocompatibility and histocompatibility with hAFCSCs in vitro and in vivo. This preliminary work indicates the feasibility to generate urinary bladder smooth muscle tissue with tissue engineering technique.     

羊水来源OCT-4阳性胎儿间充质干细胞向血管内皮细胞的体外诱导分化

背景:已证实将血管内皮细胞与具有良好组织相容性的生物材料复合,并移入体内后可增殖分化形成血管.但由于获取内皮细胞时创伤较大,所以细胞来源是一个急需解决的问题.目的:探讨羊水来源OCT-4阳性胎儿间充质干细胞分化为内皮细胞的可行性.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-06/2009-03在上海交通大学医学院附属新华医院科研中心完成.材料:羊水标本来自孕16-22周行产前诊断的孕妇,在超声引导下行羊膜腔穿刺取得60 mL羊水.方法:采用免疫磁珠细胞分选法去除人羊水细胞中CD44和SSEA-4阳性细胞,使OCT-4阳性胎儿间充质干细胞间接得到分离,并在体外进行培养扩增.取第3代羊水来源OCT-阳性胎儿间充质干细胞,诱导组换用含体积分数为15%胎牛血清的内皮细胞生长培养液,对照组持续用原培养液培养细胞.主要观察指标:倒置相差显微镜观察诱导过程中细胞形态变化,采用间接细胞免疫荧光法、内皮细胞吞噬Dil-acLDL法检测诱导效果.结果:诱导30 d后,镜下观察细胞集落相互连接,呈典型的"鹅卵石"样外观,经诱导的羊水来源OCT-4阳性胎儿间充质干细胞可在体外保持良好的增殖活力.诱导后的贴壁细胞eNOS和、vWF呈阳性表达,细胞胞浆内可见发出红色荧光的Dil阳性细胞;对照组细胞免疫荧光染色eNOS和vWF均呈阴性,且无红色荧光细胞出现.结论:羊水来源的OCT-4阳性的胎儿间充质干细胞在适当的体外微环境下,可诱导分化为血管内皮细胞.     

膨体聚四氟乙烯在鼻整形术中的应用

目的 探讨应用膨体聚四氟乙烯在鼻整形中应用价值.方法 局部麻醉下应用膨体聚四氟乙烯假体或复合自体耳甲腔软骨进行隆鼻手术.结果 本组20例患者术后随访鼻外形均良好,无免疫排斥反应、假体外露、假体摆动等情况发生.结论 膨体聚四氟乙烯在鼻整形中效果良好;假体复合自体耳甲腔软骨能有效延长鼻长度,抬高鼻尖.     

改良的大鱼际皮瓣修复指端缺损

目的:探讨一种改良的修复指端缺损的大鱼际皮瓣设计方法,以尽量减少大鱼际区瘢痕。方法:在大鱼际区邻近拇指掌指关节横纹处设计大鱼际皮瓣,将切口尽量隐藏于拇指掌指横纹与大鱼际区皮肤横纹里。结果:皮瓣血供良好,创面修复,手指外形良好,大鱼际区瘢痕不明显。结论:经改良后的大鱼际皮瓣,可以明显减少大鱼际区瘢痕,适合示、中指单指的指端缺损。