顺铂诱导颗粒细胞损伤及二仙汤含药血清保护颗粒细胞的作用机制

目的:探讨顺铂对卵巢颗粒细胞的影响及二仙汤含药血清改善大鼠卵巢颗粒细胞损伤的作用机制。方法:选取大鼠原代卵巢颗粒细胞体外培养及顺铂处理的方法,将顺铂处理后卵巢颗粒细胞随机分为:c DDP组、c DDP+雌二醇组、c DDP+二仙汤组,另设正常组,加入相应药理血清连续培养48 h。采用Western Blotting法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞bcl-2、bax蛋白表达; RT-PCR法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞bcl-2、bax mRNA表达。结果:与正常对照组比较,c DDP组bax mRNA及蛋白表达上调,差异有统计学意义(P 0. 05)。与c DDP组比较,CDDP+雌二醇组及c DDP+二仙汤组Bax mRNA及蛋白表达均下调,差异有统计学意义(P 0. 05)。与正常组比较,c DDP组bcl-2 mRNA水平及蛋白表达下调,差异有统计学意义(P 0. 05)。与c DDP组比较,CDDP+雌二醇组及c DDP+二仙汤组bcl-2 mRNA转录及蛋白表达上调,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:二仙汤能够抑制c DDP诱导的卵巢颗粒细胞损伤,其作用机制可能与调节bcl-2/bax平衡有关。     

紫草素抗雌激素对人乳腺癌MCF-7细胞周期蛋白D1表达的影响

目的 探讨紫草素(shikonin,SK)在雌激素作用下对人乳腺癌MCF-7细胞周期蛋白(cyclin D1)表达的影响。方法 体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,不同浓度的紫草素及在雌激素干预下作用于细胞后,通过免疫组织化学技术、Western blot法检测cyclin D1蛋白的表达变化。结果 与空白对照组比较,雌二醇组cyclin D1表达量显著增多,SK各组表达含量显著降低,且cyclin D1蛋白表达量随SK浓度升高逐渐被抑制(P<0.05);雌二醇干预后,SK对cyclin D1蛋白量的表达同样具有抑制作用(P<0.05)。结论 SK能降低MCF-7细胞中cyclin D1蛋白水平表达,具有浓度依赖性,并且对雌激素上调cyclin D1表达具有明显的抑制作用。     

卵巢早衰颗粒细胞凋亡调控机制的研究进展

卵巢早衰是妇科疾病中常见病之一,近年来其发生率呈逐年增加的趋势,且低龄化趋向愈益明显。卵巢早衰发生的主要机制是卵泡细胞闭锁进程的加速,而其进程加速主要是由于颗粒细胞的凋亡,所以颗粒细胞在评判卵母细胞是否健康,胚胎生长状态是否良好这两方面起到了举足轻重的作用。因此对于总结研究近年来颗粒细胞凋亡调控机制相关文献十分必要。本文总结归纳了相关文献,根据具体机制的不同,分为3个角度,调控颗粒细胞凋亡的相关基因,介入颗粒细胞凋亡过程的细胞因子和调节颗粒细胞的相关激素,从这几方面进行了综述。     

紫草素对宫颈癌SiHa细胞增殖周期的影响

目的观察紫草素(Shikonin,SK)对人宫颈癌SiHa细胞增殖周期的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养人宫颈癌SiHa细胞,不同浓度SK作用于细胞后,流式细胞术检测细胞增殖指数和周期分布;细胞水平免疫组织化学法观察SiHa细胞G蛋白偶联雌激素受体(GPER)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达。结果作用48小时后,与空白对照组相比,雌二醇组SiHa细胞增殖指数升高,1×10~(-5)、1×10~(-6)、1×10~(-7)、1×10~(-8)mol/L SK各组SiHa细胞增殖指数下降(P0.05),同时G0/G1期细胞增多,S期细胞减少(P0.01);与空白对照组相比,雌二醇组GPER、Cyclin D1蛋白表达增加,1×10~(-5)、1×10~(-6)、1×10~(-7)、1×10~(-8)mol/L SK各组GPER、Cyclin D1蛋白表达水平显著降低(P0.05),且呈浓度依赖性(P0.05)。结论紫草素能够抑制人宫颈癌鳞癌SiHa细胞增殖,其诱导G0/G1期阻滞的分子机制可能与GPER、Cyclin D1蛋白相关。     

牛建昭教授治疗青春期子宫内膜异位症经验

牛建昭教授从事妇科临床、教学、科研近50年,擅长治疗各种妇科疑难杂症,其经验丰富且独到,尤其在治疗子宫内膜异位症方面亦颇有建树。子宫内膜异位症是由于各种病理因素导致有活性的内膜组织(包括腺体和间质),不仅生长在宫腔而且还附着在子宫内膜以外的其他部位,这些异常生长的内膜组织会引起女性经期痛经,严重者可引发不孕。中医学认为子宫内膜异位症的基本病机是"瘀阻胞宫冲任",牛建昭教授在辨证论治、四诊合参的基础上,结合患者临床症状,认为青春期子宫内膜异位症的核心病机为"肾虚瘀结",在治疗时注重"西医辨病,中医分型,中西结合,个性化治疗"的诊治思路,根据月经周期遣方用药,强调审因论治,注重情志调节。此外,对青春期女性确立了调经促卵、理气止痛、温补肾阳的治疗原则。根据患者个体差异随症加减,临床疗效显著。     

二仙汤含药血清通过AKT途径介导顺铂所致卵巢颗粒细胞凋亡的作用机制

目的：探讨二仙汤含药血清通过AKT途径介导顺铂所致卵巢颗粒细胞凋亡的防护作用及分子机制。方法本实验采用大鼠原代卵巢颗粒细胞体外培养及顺铂造模的方法。通过选取22-24 d的SD大鼠提取 原代卵巢颗粒细胞,进行细胞培养并建立顺铂致卵巢颗粒细胞凋亡模型,将成模卵巢颗粒细胞随机分为：模型组、阳性对照组、二仙汤组,加入相应药理血清连续培养48 h后,用TUNEL法检测各组颗粒细胞凋亡情况;蛋白印迹法检测各组akt、p-akt蛋白的表达情况;RT-PCR检测各组akt基因表达情况。结果：通过TUNEL法对各实验组卵巢颗粒细胞凋亡形态学观察发现：与正常组相比,模型组凋亡情况十分明显。阳性对照组与模型组相比凋亡情况改善;二仙汤组与模型组相比较凋亡情况也得到了缓解。蛋白印迹分析显示：akt、p-akt蛋白表达量总体趋势走向、强度、结果相似。顺铂造模后的各实验组中的akt、p-akt蛋白表达量均减少,模型组akt、p-akt蛋 白表达量最少;和模型组比较,各治疗组均akt、p-akt蛋白表达量表达增多,其中二仙汤组akt、p-akt蛋白表达量 略低于补佳乐组akt、p-akt蛋白表达量。RT-PCR检测akt基因表达情况,与蛋白表达大体一致。结论二仙汤 能明显减轻顺铂引起的卵巢颗粒细胞凋亡,其作用机制与激活AKT信号通路有关。