烟台地区病毒性脑炎病毒分离与病原学分析

目的了解烟台地区病毒性脑炎病原谱及其基因特征。方法采集烟台地区病毒性脑炎患者脑脊液46份及粪便标本10份,通过细胞培养分离病毒,RT-PCR扩增肠道病毒VP1区并测序,进行基因序列分析。结果从46例病毒性脑炎患者脑脊液标本中分离到11株病毒,分离率为23.91%,10份粪便标本中分离病毒5株。16株病毒经鉴定7株为肠道病毒,其中EV71型4株。EV71与其他地区流行株VP1区序列差异较小。结论烟台市病毒性脑炎以肠道病毒为主,有EV71型流行,与其他地区流行株相比,EV71型VP1区基因变异较小。     

烟台沿海地区人源和猪源戊型肝炎病毒基因型别的研究

目的 调查烟台市沿海地区人源与猪源戊型肝炎病毒(HEV)基因型别的相关性.方法 应用逆转录一巢式聚合酶联反应( RT-nPCR)方法对当地急性散发戊型肝炎患者、正常人群中抗HEV-IgM阳性者和当地养猪场的猪进行HEV RNA检测,并对HEV RNA阳性标本进行克隆测序和序列分析.结果 16例急性散发戊型肝炎患者中有7例粪便标本HEV RNA阳性;51份lgM阳性正常人群血清标本中有1份HEV RNA阳性;34份猪胆汁标本中有1份HEV RNA阳性.序列分析发现该地区HEV人株与猪株在ORF2部分区域的核苷酸序列同源性为87％～ 98.1％.7株患者的戊肝病毒基因型和1株猪的戊肝病毒基因型均为Ⅳ型,基因序列同源性在87％ ～ 98.1％之间;其中有6例患者和猪的基因序列同源性在93.9％ ～98.1％之间,为Ⅳ型a亚型;1例患者和猪的基因序列同源性为87％,为Ⅳ型d亚型.正常人群的1例戊肝病毒基因型为Ⅰ型d亚型.该地区人与猪HEV的ORF2的部分基因片段与HEV Ⅰ～Ⅳ型的代表株进行比较,核苷酸序列同源性分别是82.5％～100％,81.7％ ～92.9％,81.4％ ～93.9％,84.9％ ～ 100％.结论 该地区人群中流行的HEV存在2个基因型3个亚型,主要以基因Ⅳa型为主,与猪群中流行的HEV基因Ⅳa型同源性较高;HEV Ⅰ型在人群中散在存在.     

烟台市手足口病合并脑炎病毒分离及基因序列分析

目的 了解烟台地区手足口病合并脑炎病原谱及其基因学特征.方法 采集烟台地区手足口病合并脑炎患者粪便及脑脊液标本,通过细胞培养分离病毒,实时荧光PCR鉴定病毒型别,RT-PCR扩增VP1区基因部分序列并测序,进行序列分析.结果 10份粪便标本分离病毒3株,均为EV71.与C4a型代表株核苷酸同源性为98％～99％,氨基酸同源性98.90％～99.45％.系统发生树中,烟台分离株与C4亚型C4a簇代表株位于同一分支.结论 烟台地区手足口病合并脑炎病原主要为EV71,属于C4亚型C4a簇.     

烟台市1999～2003年麻疹资料分析

[目的]了解烟台市麻疹流行病学特征,预测麻疹的流行趋势,为防治工作提供科学依据。[方法]我们对烟台市1999~2003年麻疹发病资料进行分析。[结果]5年共发病130例,年发病率为 0 40/10 万,发病高峰主要集中在 3、4月份,以>20岁的大年龄人群为主,发病 54 例,占总病例的 41 54%; < 8 个月的小年龄人群发病 9 例,占总病例的6 92%。63 08%的病例无麻疹疫苗接种史或接种史不详。[结论]烟台市麻疹流行特征有所变化,对<8 月龄和>20 岁的成人发病不容忽视。在做好麻疹疫苗免疫的同时,应加强麻疹监测。     

IL-2联合MP方案腹腔灌注治疗恶性腹腔积液临床观察

 目的 观察重组白细胞介素-2（IL-2）联合MP方案（丝裂霉素+顺铂）腹腔灌注治疗恶性腹腔积液的疗效和毒副反应。方法 104例恶性腹腔积液患者被随机分为两组，治疗组58例，采用IL-2联合MP方案腹腔灌注；对照组46例，单用顺铂（DDP）腹腔灌注。结果：治疗组CR28例，PR25例，总有效率91 %；对照组CR15例，PR12例，总有效率60 %。两组差异有统计学意义（P＜0.01）。两组毒副反应比较无统计学意义（P＞0.05）。结论 IL-2联合MP方案治疗恶性腹腔积液疗效明显。     

混合菌种质量控制检验方法探讨

对混合菌种质量控制检验,结果其分别为出血性大肠埃希菌O157、恶臭假单胞菌和金黄色葡萄球菌。直接分离平板是分离细菌的有效方式,增菌液增菌意义不大。     

山东省烟台地区发热伴血小板减少综合征疑似病例检测分析

目的 调查山东省烟台地区发热伴血小板减少综合征疑似病例新型布尼亚病毒(SFTSV)感染情况。 方法 采用双重探针引物实时荧光定量-聚合酶链反应方法对发热伴血小板减少综合征疑似病例血清进行新型布尼亚病毒特异性核酸检测。 结果 135份疑似病例血清样本中新型布尼亚病毒特异性核酸阳性81份,阳性率60.00%。发病第5～8天核酸检出阳性最高;发病高峰主要集中在5-8月;人群年龄分布在37～87岁之间,以60～70岁年龄组发病数最多,占总病例数的32.10%(26/81);92.59%(75/81)的患者为农民;男女性别比为1.79:1。 结论 烟台地区发热伴血小板减少综合征疑似病例存在新型布尼亚病毒感染。     

幽门螺杆菌hpaA基因在乳酸菌中的表达及免疫原性分析

摘要 目的 在乳酸菌中表达幽门螺杆菌(HP)hpaA基因,口服免疫小鼠后检测其免疫原性。方法 PCR方法从基因组中扩增基因hpaA,将其克隆至表达载体pNICE:sec,将重组质粒转化乳酸菌NZ9000株,筛选鉴定阳性菌落,诱导表达的hpaA蛋白用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。将雌性ICR(CV级)小鼠随机分为4组,分别用PBS、携带空质粒的乳酸菌、携带pNICE:sec-hpaA的乳酸菌、灭活的HP灌胃。免疫7次后检测其特异性IgG和IgA的产生。结果 扩增hpaA基因并构建了重组原核表达质粒pNICE:sec-hpaA,转化乳酸菌NZ9000后经nisin诱导可表达Mr分子量约29KD的重组蛋白,表达量约占菌体总蛋白量的9.3%,Western blot分析其能与幽门螺杆菌抗血清特异性反应,具有良好的免疫原性。携带pNICE:sec-hpaA质粒的乳酸菌刺激产生的IgG水平明显高于携带空质粒组,与灭活HP组没有明显的差异,但其刺激产生的IgA水平明显高于其它组（P<0.05）。结论 表达hpaA蛋白的乳酸菌口服免疫小鼠后,能够刺激小鼠产生特异的IgG和IgA,可作为幽门螺杆菌口服疫苗候选抗原。为乳酸菌作为抗原递送载体的研究和HP口服疫苗的开发提供一定的实验基础。     

血清学方法和实时荧光定量PCR方法在新型布尼亚病毒检测中的应用研究

目的探讨血清学检测方法和实时荧光定量PCR方法在新型布尼亚病毒检测中的应用。方法连续采集烟台地区莱州、蓬莱疑似发热伴血小板减少综合征患者血清,分别用胶体金实验方法、ELISA实验方法检测抗新型布尼亚病毒IgM抗体,实时荧光定量PCR方法检测新型布尼亚病毒核酸,SPSS18．0统计结果。结果胶体金方法和ELISA方法检测结果总符合率为96．67％,一致性KAPPA检验K系数为0．933;胶体金方法和实时荧光定量PCR方法检测结果均受病程影响（两者P值均小于0．05）;实时荧光定量PCR2疗法检测不受年龄、性别影响（P均〉0．05）。结论新型布尼亚病毒检测发病12天以前推荐使用实时荧光定量PCR方法,发病16天以后,可使用血清学方法检测抗新型布尼亚病毒IgM抗体。