紫杉醇影响TGF⁃β1诱导的原代人肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化

目的：研究紫杉醇（paclitaxel,PTX）对重组人转化生长因子?β1（recombinant human transform growth factor?β1,rhTGF?β1）诱导人肺成纤维细胞（human lung fibroblasts,HLFs）向肌成纤维细胞转化的影响及其相关机制。方法：培养HLFs,药物处理分为对照组、TGF?β1组（5 ng/mL）、TGF?β1+PTX（0.01 nmol/L）组、TGF?β1+ PTX（0.1 nmol/L）组、TGF?β1+ PTX（1 nmol/L）组、PTX组（1 nmol/L）。采用CCK8法测定细胞活性;显微镜下观察并分析细胞形态学变化;Transwell实验检测细胞迁移能力;免疫荧光观察细胞内α?平滑肌肌动蛋白（α?SMA）表达及分布情况;real?time PCR和Western blot检测各组α?SMA、纤连蛋白（fibronectin）、Ⅰ型胶原蛋白（collagen Ⅰ）、Ⅲ型胶原蛋白（collagen Ⅲ）mRNA水平及蛋白含量;Western blot检测各组细胞内p?Smad3、Smad3、p?p38和p38蛋白含量。结果：CCK8结果显示,1 nmol/L PTX对细胞无毒性作用,0.01 nmol/L PTX不能抑制TGF?β1诱导的HLFs活性增加,0.1和1.0 nmol/L PTX可以抑制TGF?β1诱导的HLFs活性增加;细胞形态学结果显示,0.01 nmol/L PTX不能抑制TGF?β1诱导的HLFs胞体宽度增加,0.1、1.0 nmol/L PTX可以抑制TGF?β1诱导的HLFs胞体宽度增加;Transwell实验结果显示,0.01 nmol/L PTX不能抑制TGF?β1诱导的HLFs迁移,0.1、1.0 nmol/L PTX可以抑制TGF?β1诱导的HLFs迁移;免疫荧光结果显示,0.01 nmol/L PTX不能降低TGF?β1诱导的HLFs内α?SMA荧光强度,0.1、1.0 nmol/L PTX可以降低TGF?β1诱导的HLFs内α?SMA荧光强度;real?time PCR和Western blot结果显示,0.01 nmol/L PTX不能降低TGF?β1诱导的HLFs表型转化标志物α?SMA、fibronectin、collagenⅠ、collagenⅢ含量及p38的磷酸化水平,0.1、1.0 nmol/L PTX可以降低TGF?β1诱导的HLFs表型转化标志物α?SMA、fibronectin、collagenⅠ、collagen Ⅲ含量以及Smad3和p38的磷酸化水平。结论：紫杉醇可以抑制TGF?β1诱导原代HLFs向肌成纤维细胞表型转化,这种作用可能与抑制TGF?β/Smad/MAPK信号通路激活有关。     

7.0T心脏MR成像在肺高压大鼠模型右心功能评估中的作用

［摘 要］目的：基于7.0T心脏磁共振成像（cardiac magnetic resonance,CMR）观察肺高压（pulmonary artery hypertension, PAH）大鼠肺动脉径线和心脏功能的变化。方法：选用36只雄性SD大鼠（随机分为6组,每组6只）采用低氧建立PAH大鼠模型。于未缺氧时（基线）及缺氧后第1、2、3、4、5周利用MR（Bruker BioSpec 7.0T）进行心脏成像,分别测量主肺动脉（main pulmonary artery,MPA）、右肺动脉（right pulmonary artery,RPA）、左肺动脉（left pulmonary artery,LPA）直径,并计算其与同层面升主动脉（ascending aorta,AA）直径之比（MPA/AA;RPA/AA;LPA/AA）;四腔心位右室舒张末期最大径线（right ventricular end-diastolic maximum diameter,dRVmax）与左室舒张末期最大径线（left ventricular end-diastolic maximum diameter,dLVmax）之比（dRVmax/dLVmax）,右室舒张末容积 (right ventricular end diastolic volume,RVEDV), 右室收缩末容积(right ventricular end systolic volume,RVESV),进而计算右室射血分数 (right ventricular ejection fraction,RVEF);每只大鼠均行右心导管术获取右室收缩压（right ventricular systolic pressure,RVSP）。采用SPSS 24.0统计软件,应用独立样本t检验及ANOVA分析比较不同时间点上述各参数的差异,采用Pearson相关性分析评价各参数与RVSP的相关性。结果：造模后第1周大鼠RVSP即较基线升高（29.92±1.94mmHg vs. 41.55±3.14 mmHg,P＜0.01）,后每周均逐步升高（P＜0.01这里统计方法用的什么？ANOVA,获得总的p值,然后是否又继续比较了每周之间的差异？hostoc？）,MPA、dRVmax/dLVmax及RVESV、RVEDV逐渐增大（P＜0.01）,RVEF在缺氧第2周显著降低（P＜0.01）。MPA/AA、dRVmax/dLVmax、RVEF与RVSP具有较好的相关性（分别为r=0.573,r=0.700,r=-0.760,P＜0.01）。结论：7.0T CMR可敏感地观察到PAH大鼠病程进展中肺动脉及右心形态功能的改变,为研究PAH的演变机制打下基础。     

7.0T心脏MR成像在肺动脉高压大鼠模型右心功能评估中的作用

目的：基于7.0T心脏磁共振成像（cardiac magnetic resonance,CMR）观察肺动脉高压（pulmonary artery hypertension,PAH）大鼠肺动脉径线和心脏功能的变化。方法：选用36只雄性SD大鼠（随机分为6组,每组6只）采用低氧建立PAH大鼠模型。于未缺氧时（基线）及缺氧后第1、2、3、4、5周利用MR（Bruker BioSpec 7.0T）进行心脏成像,分别测量主肺动脉（main pulmonary artery,MPA）、右肺动脉（right pulmonary artery,RPA）、左肺动脉（left pulmonary artery,LPA）直径,并计算其与同层面升主动脉（ascending aorta,AA）直径之比（MPA/AA、RPA/AA、LPA/AA）;四腔心位右室舒张末期最大径线（right ventricular end?diastolic maximum diameter,dRVmax）与左室舒张末期最大径线（left ventricular end?diastolic maximum diameter,dLVmax）之比（dRVmax/dLVmax）,右室舒张末容积（right ventricular end diastolic volume,RVEDV）,右室收缩末容积（right ventricular end systolic volume,RVESV）,进而计算右室射血分数（right ventricular ejection fraction,RVEF）;每只大鼠均行右心导管术获取右室收缩压（right ventricular systolic pressure,RVSP）。采用SPSS 24.0统计软件,应用独立样本t检验及ANOVA分析比较不同时间点上述各参数的差异,采用Pearson相关性分析评价各参数与RVSP的相关性。结果：造模后第1周大鼠RVSP即较基线升高［（29.92 ± 1.94）mmHg vs.（41.55 ± 3.14）mmHg,P＜0.01］,后每周逐步升高,MPA、dRVmax/dLVmax及RVESV、RVEDV逐渐增大（P＜0.01）,RVEF在缺氧第2周显著降低（P＜0.01）。MPA/AA、dRVmax/dLVmax、RVEF与RVSP具有较好的相关性（r分别为0.573、0.700、-0.760,P均＜0.01）。结论：7.0T CMR可敏感地观察到PAH大鼠病程进展中肺动脉及右心形态功能的改变,为研究PAH的演变机制打下基础。     

利拉鲁肽对博来霉素诱导大鼠肺纤维化的作用及其机制研究

目的：研究利拉鲁肽（liraglutide,Li）对博来霉素（bleomycin,BLM）诱导大鼠肺纤维化的影响及其机制。方法：将SD大鼠随机分为4组：对照组（Con）、BLM组、BLM+Li组、Li组。气管内一次性注入BLM（4 U/kg）后,BLM+Li组、Li组大鼠予以每日皮下注射Li（0.2 mg/kg）。28 d后处死大鼠,采用HE、Masson三色染色法评估肺组织病理情况;甲苯胺蓝染色法评估肥大细胞浸润情况;碱水解法测定肺组织羟脯胺酸水平;RTq PCR法检测肺组织I型胶原蛋白α1、Ⅱ型胶原蛋白α1、Ⅲ型胶原蛋白α1、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）?α、白介素（interleukin,IL）?6、IL?1β、转化生长因子β1（transforming growth factor β1,TGF?β1）mRNA水平;ELISA法检测肺组织TNF?α、IL?6、IL?1β含量;免疫荧光法检测上皮细胞钙连蛋白（E?cadherin）、α?平滑肌肌动蛋白（α?smooth muscle actin,α?SMA）的表达;Western blot法检测E?cadherin、紧密连接蛋白1（zonaoccluden?1,ZO?1）、闭合蛋白（Occludin）、α?SMA、TGF?β1的表达。结果：与BLM组相比,BLM+Li组肺组织炎症细胞浸润、肺泡结构破坏及纤维化程度减轻,羟脯胺酸及胶原含量显著降低。Li能抑制BLM诱导的肺组织TNF?α、IL?6、IL?1β、TGF?β1表达上调,并抑制上皮细胞标志物E?cadherin、ZO?1、Occludin下调及间质细胞标志物α?SMA的上调。结论：Li可减轻BLM诱导的大鼠肺纤维化,这种保护作用与其减轻肺内炎症反应、降低TGF?β1的表达及抑制上皮细胞间质转化有关。Li有望成为未来治疗肺纤维化的候选药物之一。