外源性硫化氢通过抑制阴茎海绵体平滑肌细胞凋亡改善海绵体神经损伤大鼠勃起功能障碍

目的 观察外源性硫化氢对双侧海绵体神经损伤（BCNI）大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞（CCSMC）凋亡及勃起功能障碍的影响。方法 将24只SD雄性大鼠随机分为3组（n=8只/组）：假手术组、双侧海绵体神经损伤组（BCNI组）、硫化氢干预组（BCNI+NaHS组）。通过钳夹损伤双侧海绵体神经构建BCNI模型。BCNI+NaHS组每天腹腔注射100 μmol/kg的NaHS溶液;BCNI组每日腹腔注射等量生理盐水。治疗4周后检测海绵体内压（ICP）和平均动脉压（MAP）,并通过Western blot检测胱硫醚-β-合成酶（CBS）和胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）,α-SMA,Collagen-Ⅰ,Caspase-3、Bax、Bcl-2表达水平,通过免疫组化检测CBS、CSE表达情况,Masson’s Trichrome染色检测海绵体平滑肌/胶原比值,以及 TUNEL+α-SMA组织免疫荧光双染检测CCSMC凋亡水平。结果 治疗4周后,BCNI+NaHS组ICP/MAP比值高于BCNI组（P<0.05）;Masson’s Trichrome染色结果显示,BCNI+NaHS组海绵体平滑肌/胶原比值较 BCNI 组显著升高（P<0.05）;Western blot 结果显示 BCNI+NaHS 组α-SMA 蛋白表达高于 BCNI 组（P<0.05）,同时 Collagen-Ⅰ蛋白表达低于 BCNI组（P<0.05）;TUNEL+α-SMA组织免疫荧光双染结果显示,BCNI+NaHS组CCSMC凋亡数较BCNI组降低（P<0.05）。与BCNI组相比,BCNI+NaHS组Caspase-3、Bax蛋白表达降低（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达、Bcl-2/Bax比值升高（P<0.05）。BCNI组CBS、CSE表达较其余两组显著降低（P<0.05）。结论 外源性硫化氢可提高经典的抗凋亡蛋白Bcl-2及抑制CCSMC凋亡,进而改善BCNI大鼠勃起功能。     

经腹腔与经腹膜外途径腹腔镜前列腺癌根治术疗效比较的Meta分析

目的:用Meta分析评价经腹腔入路腹腔镜前列腺癌根治术(TLRP)与经腹膜外入路腹腔镜前列腺癌根治术(ELRP)治疗局限性前列腺癌的疗效和安全性。方法:通过计算机检索Medline、Cochrane临床对照试验中心数据库、中国学术期刊全文数据库、万方数据库和中国生物医学文献数据库,按纳入和排除标准,两位研究员独立进行文献筛查、质量评价和数据提取,交叉核对,并用Stata12.0软件进行Meta分析评价手术时间、术中出血量、术后尿管留置天数、肠功能恢复时间、术后住院天数等相关指标。结果:共纳入9篇文献,共942例患者,其中行TLRP患者492例,行ELRP患者450例。Meta分析结果显示:TLRP与ELRP两者在手术时间[SMD=0.60,95%CI(-0.06,1.26)]、术中出血量[SMD=0.01,95%CI(-0.35,0.36)]、术后留置尿管时间[SMD=0.10,95%CI(-0.21,0.40)]、术后住院天数[SMD=0.45,95%CI(-0.01,0.91)]方面无统计学差异,在肠功能恢复时间[SMD=1.18,95%CI(0.26,2.10)]有显著性差异。结论:TLRP和ELRP在治疗局限性前列腺癌在手术时间、术中出血量、留置尿管时间、术后住院天数方面无统计学差异,在肠功能恢复时间上,ELRP比TLRP更具有优势。     

血小板源性生长因子-BB对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞增殖、迁移及表型转化的影响

目的了解血小板源性生长因子-BB（PDGFBBB）对大鼠阴茎海绵体平滑肌（CCSM）细胞增殖、迁移及表型转化的影响并
初步探讨其作用机制。方法采用改良的组织块培养法培养Wistar大鼠CCSM细胞,并用细胞免疫荧光法鉴定。利用CCK-8法
检测不同浓度的PDGFBB对培养的大鼠CCSM细胞增殖的影响,并筛选出最适PDGFBB作用浓度。分别用0 ng/mL PDGFBB
与最适浓度PDGFBB处理CCSM细胞,利用划痕实验检测PDGFBB对CCSM细胞迁移的影响,24 h和48 h时利用qRT-PCR检
测细胞中转录因子myocardin及收缩型表型标志物α-SMA、SMMHC mRNA表达水平;用最适浓度PDGFBB处理CCSM 细胞
0、24 和48 h 后,利用western blotting 检测细胞中myocardin 的蛋白表达水平。结果原代培养的CCSM 细胞中α-SMA 和
smoothelin 阳性率分别约为96.5%和96%;不同浓度的PDGFBB均能明显促进CCSM细胞增殖,其最适浓度为12.5 ng/mL。
PDGFBB（12.5 ng/mL）能促进CCSM细胞迁移,下调CCSM细胞中myocardin、α-SMA和SMMHC mRNA表达水平（P均<0.01）;
在48 h内myocardin蛋白质的表达水平随着PDGFBB作用时间增加而降低。结论改良的组织块培养法可获得高纯的CCSM
细胞;PDGFBB可促进CCSM细胞增殖、迁移,使细胞从收缩型向合成型转化,其机制可能是通过下调myocardin。
     

糖尿病大鼠膀胱平滑肌的表型转化

目的检测链脲佐菌素造模后9周的糖尿病SD大鼠膀胱平滑肌收缩型标志物和关键调控基因myocardin的表达水平,了 解糖尿病大鼠膀胱平滑肌是否发生表型转化。方法32只体质量200~220 g的8周龄雄性SD大鼠随机平均分为糖尿病（DM）组 和非糖尿病（NDM）组,9周后取膀胱组织行HE和Masson三色染色观察膀胱组织病理变化,qRT-PCR、Western blotting分别检 测膀胱组织平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、平滑肌肌球蛋白重链收缩型平滑肌标志物及myocardin 基因的mRNA和蛋白表达水 平。结果DM组大鼠较NDM组明显消瘦（286.25±71.20 g vs 412.71±102.74 g,P=0.001）,多饮、多尿,膀胱中胶原纤维组织增多 （P<0.001）,myocardin、α-SMA、平滑肌肌球蛋白重链的mRNA和蛋白水平均显著下降（P均<0.05）。结论糖尿病大鼠膀胱平滑 肌在造模9周时发生表型转化,引起膀胱平滑肌舒缩障碍,可能在糖尿病膀胱病理变化过程中起重要作用。