FAM83B对肝癌细胞的作用及机制研究

目的 探讨具有序列相似性的家族83成员B（FAM83B）对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）、Western blotting、免疫组织化学法检测肝癌组织、癌旁正常组织、人类肝癌细胞系（HepG2、Hep3B）、正常人类肝细胞系（LO2）中FAM83B mRNA和蛋白的表达。采用靶向siRNA敲低HepG2细胞系中FAM83B作为si-FAM83B组,HepG2细胞转染si-NC慢病毒载体作为si-NC组。分别用PBS、40 ng/mL胰岛素样生长因子1（IGF-1）处理si-FAM83B组细胞48 h,并将细胞分为si-FAM83B+PBS组和si-FAM83B+IGF-1组,分析敲低FAM83B对肝癌细胞增殖、侵袭、细胞周期和凋亡的影响,并研究敲低FAM83B对磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素哺乳动物靶蛋白（PI3K/Akt/mTOR）信号通路的影响。结果 肝癌组织FAM83B mRNA和蛋白相对表达量高于癌旁正常组织（P <0.05）。HepG2、Hep3B细胞FAM83B mRNA和蛋白相对表达量高于LO2细胞（P <0.05）。si-FAM83B组FAM83B mRNA和蛋白相对表达量低于si-NC组（P <0.05）。si-NC组与si-FAM83B组24 h、48 h、72 h、96 h的OD值比较,采用重复测量设计的方差分析,结果 ①不同时间点OD值有差异（F =773.510,P =0.001）;②si-NC组与si-FAM83B组的OD值有差异（F =516.980,P =0.000）,si-FAM83B组OD值较低;③两组OD值变化趋势有差异（F =820.782,P =0.000）。si-FAM83B组细胞凋亡率高于si-NC组,侵袭细胞数低于si-NC组（P <0.05）。si-FAM83B组PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达量低于si-NC组（P <0.05）,LC3-Ⅱ高于si-NC组（P <0.05）。si-NC组与si-FAM83B组Akt、mTOR蛋白相对表达量比较,差异均无统计学意义（P >0.05）。si-FAM83B+IGF-1组PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白相对表达量高于si-FAM83B+PBS组（P <0.05）,LC3-Ⅱ低于si-FAM83B+PBS组（P <0.05）。si-FAM83B+PBS组与si-FAM83B+IGF-1组Akt、mTOR蛋白相对表达量比较,差异均无统计学意义（P >0.05）。si-FAM83B+PBS组与si-FAM83B+IGF-1组24 h、48 h、72 h、96 h的OD值比较,采用重复测量设计的方差分析,结果 ①不同时间点OD值有差异（F =5211.626,P =0.000）;②si-FAM83B+PBS组与si-FAM83B+IGF-1组OD值有差异（F =453.499,P =0.000）,si-FAM83B+IGF-1组OD值较高;③两组OD值变化趋势有差异（F =384.347,P =0.000）。si-FAM83B+IGF-1组细胞凋亡率低于si-FAM83B+PBS组（P <0.05）,侵袭细胞数高于si-FAM83B+PBS组（P <0.05）。结论 敲低FAM83B可通过沉默PI3K/Akt/mTOR通路抑制肝癌细胞生长,并促进肿瘤细胞自噬。     

绿原酸对颞下颌关节软骨细胞增殖、凋亡和炎症因子释放的影响及作用机制研究

目的探讨绿原酸对颞下颌关节骨关节炎的保护作用机制。方法采用10ng/ml的白细胞介素1β（IL-1茁）诱导大鼠颞下颌关节软骨细胞损伤,同时使用不同浓度绿原酸对软骨细胞进行干预。采用CCK-8法检测软骨细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,qRT-PCR法检测软骨细胞中肿瘤坏死因子琢（TNF-琢）、IL-6、基质金属蛋白酶3（MMP-3）、MMP-13、Wnt-5A和Ror2mRNA的表达水平,Westernblot法检测Wnt-5A和Ror2蛋白的表达水平。结果不同浓度绿原酸干预IL-1β诱导的颞下颌关节软骨细胞损伤后,绿原酸能够促进软骨细胞增殖,抑制软骨细胞凋亡,抑制TNF-琢、IL-6、MMP-3和MMP-13mRNA的表达水平,同时抑制Wnt-5A/Ror2信号通路中Wnt-5A和Ror2的表达。结论绿原酸或通过抑制Wnt-5A/Ror2信号通路调控IL-1茁诱导损伤的颞下颌关节软骨细胞增殖、凋亡和炎症因子释放。绿原酸或可作为治疗颞下颌关节骨关节炎的药物。