FAM83B对肝癌细胞的作用及机制研究

目的 探讨具有序列相似性的家族83成员B（FAM83B）对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）、Western blotting、免疫组织化学法检测肝癌组织、癌旁正常组织、人类肝癌细胞系（HepG2、Hep3B）、正常人类肝细胞系（LO2）中FAM83B mRNA和蛋白的表达。采用靶向siRNA敲低HepG2细胞系中FAM83B作为si-FAM83B组，HepG2细胞转染si-NC慢病毒载体作为si-NC组。分别用PBS、40 ng/mL胰岛素样生长因子1（IGF-1）处理si-FAM83B组细胞48 h，并将细胞分为si-FAM83B+PBS组和si-FAM83B+IGF-1组，分析敲低FAM83B对肝癌细胞增殖、侵袭、细胞周期和凋亡的影响，并研究敲低FAM83B对磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素哺乳动物靶蛋白（PI3K/Akt/mTOR）信号通路的影响。结果 肝癌组织FAM83B mRNA和蛋白相对表达量高于癌旁正常组织（P <0.05）。HepG2、Hep3B细胞FAM83B mRNA和蛋白相对表达量高于LO2细胞（P <0.05）。si-FAM83B组FAM83B mRNA和蛋白相对表达量低于si-NC组（P <0.05）。si-NC组与si-FAM83B组24 h、48 h、72 h、96 h的OD值比较，采用重复测量设计的方差分析，结果 ①不同时间点OD值有差异（F =773.510，P =0.001）；②si-NC组与si-FAM83B组的OD值有差异（F =516.980，P =0.000），si-FAM83B组OD值较低；③两组OD值变化趋势有差异（F =820.782，P =0.000）。si-FAM83B组细胞凋亡率高于si-NC组，侵袭细胞数低于si-NC组（P <0.05）。si-FAM83B组PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达量低于si-NC组（P <0.05），LC3-Ⅱ高于si-NC组（P <0.05）。si-NC组与si-FAM83B组Akt、mTOR蛋白相对表达量比较，差异均无统计学意义（P >0.05）。si-FAM83B+IGF-1组PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白相对表达量高于si-FAM83B+PBS组（P <0.05），LC3-Ⅱ低于si-FAM83B+PBS组（P <0.05）。si-FAM83B+PBS组与si-FAM83B+IGF-1组Akt、mTOR蛋白相对表达量比较，差异均无统计学意义（P >0.05）。si-FAM83B+PBS组与si-FAM83B+IGF-1组24 h、48 h、72 h、96 h的OD值比较，采用重复测量设计的方差分析，结果 ①不同时间点OD值有差异（F =5211.626，P =0.000）；②si-FAM83B+PBS组与si-FAM83B+IGF-1组OD值有差异（F =453.499，P =0.000），si-FAM83B+IGF-1组OD值较高；③两组OD值变化趋势有差异（F =384.347，P =0.000）。si-FAM83B+IGF-1组细胞凋亡率低于si-FAM83B+PBS组（P <0.05），侵袭细胞数高于si-FAM83B+PBS组（P <0.05）。结论 敲低FAM83B可通过沉默PI3K/Akt/mTOR通路抑制肝癌细胞生长，并促进肿瘤细胞自噬。

Effect of FAM83B on hepatocellular carcinoma cells and its mechanism