棉酚对精子乳酸脱氢酶—X(LDH—X)的影响

我们对10例服用棉酚的男性,在服药前后各时期的精子,作 LDH—X 的组织化学观察和电泳研究,根据精子特异性酶(LDH—X)的增减、消长,反映能量代谢的改变。为提高临床疗效,减少毒付作用,提供简便、特异的判断精子质量的敏感指标。在服药前、服药后30天、50天、100天及150天采取新鲜精液,严格控制离体和离心的间隔,离体20分钟后立即经3,000转/分/离心,弃去精浆,取出少量沉渣涂片示     

棉酚对大鼠精子细胞碱性核蛋白合成与更新的影响

大鼠喂服棉酚(30毫克/公斤体重/日)3周、4周和6周后,用特异显示精氨酸的坂口反应及显示富于赖氨酸碱性蛋白的肝素-阿尔新蓝(HAB)染色法,结合并合~3H-精氮酸液闪测定,对棉酚影响精子细胞核蛋白在合成与代谢上的改变,进行分析。结果表明: 1.正常大鼠14期以后的晚期精子细胞核坂口反应阳性,HAB染色阴性。相反,精原细胞、精母细胞及14期以前的精子细胞坂口反应为阴性,而HAB染色较深,表明14期前后精子细胞核蛋白有精蛋白合成的转换过程。 2.服棉酚后,部分曲细精管中14期以后的精子细胞及游离精子坂口反应变弱,并能为HAB染色。这是甲绿-焦宁染色异常的原因。也提示棉酚对晚期精子细胞核蛋白转变可能有干扰作用。 3.睾内注射~3H-精氨酸的活体实验和分离后的精子细胞与同位素温育的体外实验,均未见对照组和实验组之间有明显差异。对精子细胞变态过程中核蛋白合成上的转换的细胞化学显示方法,棉酚对这一转换过程的干扰作用的可能性及其意义予以讨论。     

棉酚对大鼠血睾屏障影响的研究

本实验采用辣根过氧化物酶、硝酸镧和氯化锂示踪观察成年大鼠灌服棉酚后血睾屏障的变化。成年雄性大鼠连续灌服醋酸棉酚30毫克/公斤/日2周、4周和6周后,血管内分别灌流0.75M 氯化锂溶液、2%硝酸镧溶液和睾丸内注射辣根过氧化物酶。结果表明,大鼠灌服棉酚达抗生育效果时,并未显示血睾屏障通透性损伤。因此,可以排除棉酚作用于支持细胞或血睾屏障继而间接影响生精细胞的可能性。     

大鼠精子细胞分化过程中核碱性蛋白的研究

大鼠精子细胞分化过程中核碱性蛋白的研究（中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所，北京１０００５０，中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所费仁仁，纪林，陈晖，刘平，陈啸梅，章静波）精子发生可分为精原细胞、精母细胞及精子细胞阶段。在精子细胞分化过...     

棉酚抗生育作用机理、体内分布、代谢及毒性毒理的研究(摘要)

棉酚是我国首创的抗精子药物。本研究对大鼠、雄猴及临床志愿服药者采用细胞生物学、生物化学、电镜及同位素示踪定位、定量等方法,在棉酚抗生育作用机     

Studies on Expression of P1 Protamine Gene in Rat and Mouse Testis

Protamine is a kind small,basic protein rich in arginine residues and found to be complexed with DNA in spermatozoa. We have cloned a 150 bp cDNA encoding the rat protamine (rP) by RT-PCR technique.Dig-labelled cDNA for rP was used for Northern blot analysis to study the expression of P1 protamine gene in rat and mouse.P1 protamine mRNA was detected only in rat testis,no hybridization signals were de-tected in rat brain and lever.In addition,the presence of P1 protamine mRNA was detected not only in rat testis,but also in mouse testis.Dig-labelled cDNA for mouse protamine 1 (mP1) was used to study the expression of mP1 gene during the process of sexual maturation of mouse.7-8 d after birth,no mP1 mRNA could be detected.At d 24-26,mP1 mRNA was detectable migrating as a homogeneous band at 580 nu-cleotides,whereas in sexually mature animals,a heterogeneous mixture of RNAs ranging from 450-580 bases in length was observed.Histological studies revealed that in the testis of 7-8-day-old mouse, spermatogenesis has developed to the sperma-tocyte stage, whereas round spermatids (Rs) were present in the testis of the mice with 24-26 d age and elongating spermatids(Es)were present in the testis of sexually mature animals. Electrophoresis of total nuclear basic proteins(TNBP)revealed that the Rs could possess the somatic histones,while Es was found to have protamine and less histone.These results indicate that the P1 protamine gene is tissues-specifically ex-pressed and the P1 protamine is showing to be conservative in evolution.During the process of sexual maturation,along with morphological changes,mP1 gene was tran-scribed in Rs and translated in Es.The mechanism of protamine gene expression was discussed.     

棉酚对雄猴心肌及心肌乳酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶影响的电子显微镜观察

本文报道了口服醋酸棉酚(4毫克/公斤/日)两年的成年雄性恒河猴3只及对照猴2只的心肌超微结构、心肌 LDH 和 SDH 的电镜组化的观察,初步结果如下:1.猴心肌肌原纤维Ⅰ带 Z 线两侧各出现一条由电子密度较大的颗粒组成的细线,称 N线。服棉酚后 N 线的电子密度较对照组为低,同时Ⅰ带的宽度相应加大,提示棉酚有加深心肌纤维松弛状态的可能性。其它超微结构的改变如溶酶体数量增多,内质网扩张,局部地区的线粒体异常堆集、排列紊乱、数量明显增多,部分线粒体呈现轻度肿胀。2.组化方面,定位于心肌细胞线粒体和内质网中与心肌无氧糖酵解有关的 LDH 以及定位于线粒体的 SDH 活性均于服棉酚后增强。我们初步分析和讨论了以上结果与心肌纤维的松弛和收缩可能有关。     

棉酚对人精子乳酸脱氢酶-X 的影响

对10例服棉酚者的精子作LDH同功酶组织化学检查和电泳观察,结果:①精子颈体部的组化反应形成的沉淀主要是LDH-X,服药后沉淀变粗,数量减少以至消失;LDH-X占总LDH的平均含量百分率为42.6％,服药30、50和100天后则分别为31.1,26.3和10.2％,下降显著,提示棉酚可干扰精子的能量代谢。②LDH-X的变化程度因个体对棉酚的敏感性不同而有差异。LDH-X组化检查法简便、特异,可作为判断精子质量的敏感指标。     

在GMA包埋的半薄切片上显示几种酶的活性

1960年,Rosenberg等首先使用水溶性塑料包埋剂一乙二醇甲基丙烯酸酯(Glycol methac-rylate,缩写为GMA)作为电镜包埋剂以后,GMA的使用价值逐步受到重视,并从电镜的应用,推广到光学显微镜、组织化学等各个领域。GMA包埋的组织块,很少收缩,切成1-3μ的半薄切片后,在光镜下,几乎无细胞重叠现象,物质的分布与酶的定位清晰可见,克服了石蜡切片的收缩假象与新鲜冰冻切片质量不易保证等缺点。Feder等在应用塑料包埋技术于组织化学方面,做了许多工作。尤其是Higuchi(1979)和Namba(1983)等,在GMA包埋的切片上,进行了较详细酶活性的观察。近年来,国内也开展了GMA包埋的切片技术,张承志等做了粘多糖的     

雷公藤单体T_4、T_7、T_（15）及雷公藤内酯醇对大鼠精子核蛋白组型的影响

大鼠喂服雷公藤单体Ｔ_４、Ｔ_７、Ｔ_（１５）及雷公藤内酯醇（甲素）７周后，取附睾精子，用超声法分离精子核，从核提取总碱性蛋白（ＴＮＢＰ）。经电泳扫描分析，发现精子ＴＮＢＰ含量下降，总组蛋白（ＴＨ）／精核蛋白（ｐｒｏｔａｒｍｉｎｅ）比值升高，精核蛋白含量下降，提示以上雷公藤单体和甲素使精子细胞核蛋白组型转换受阻是导致大鼠不育的重要原因之一。