菝葜皂甙元对红细胞Na~ 泵的抑制

据Edelman提出的细胞产热的Na~ 泵假说,机体产热的增加,在很大程度上与细胞膜Na~ 泵活性的升高有关。阴虚和阳虚患者产热异常的表现,就可能伴有Na~ 泵活性的改变。中药知母是一种滋阴泻火药,对阴虚患者具有良好的清热效果。菝葜皂甙元是知母提取物中的一个有效成份,已经证实它是Na~ 、K~ -ATP酶的一种抑制剂,并且知母的清热作用的机理可能与菝葜皂甙元对Na~ 、K~ -ATP酶的抑制有关。     

浅蓝菌素对人结肠癌裸鼠移植瘤bcl-2及bax基因表达水平的影响

目的 :通过观察人结肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤bcl 2及bax基因表达水平 ,探讨脂肪酸合酶抑制剂浅蓝菌素选择性的抑瘤途径和机制。方法 :建立人结肠癌裸鼠移植瘤模型 ,浅蓝菌素每公斤体重 160mg腹腔注射 ,1次·d-1,连续10d ,第 17天处死并解剖动物 ,瘤组织作免疫组织化学检测bcl 2及bax基因表达水平。结果 :浅蓝菌素处理组结肠癌LoVo细胞移植瘤bcl 2基因蛋白表达率为 68.5 % ;对照组bcl 2蛋白阳性表达率为 87.8% ,阳性细胞弥漫分布。两组间有显著性差异 (P <0 .0 1)。bax基因蛋白在浅蓝菌素组移植瘤组织阳性表达率为 75 .4% ,主要呈强阳性表达 ;对照组阳性表达率为 9.5 %。两组间比较有统计学差异 (P <0 .0 1)。结论 :浅蓝菌素可使结肠癌LoVo细胞移植瘤的bcl 2基因表达下调 ,bax基因表达增强 ,提示bcl 2及bax基因在浅蓝菌素诱导的人结肠癌LoVo细胞凋亡中可能起着重要的调控作用。     

用套式RT-PCR法检测肝细胞癌中丙型肝炎病毒基因型

目的　检测人肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型。方法　用ＲＴＰＣＲ法常规检测ＨＣＣ组织和部分患者血清ＨＣＶ,再以巢式ＲＴＰＣＲ法对ＨＣＶ阳性标本中５种ＨＣＶ基因型进行鉴别。对多数标本中ＨＢｓＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ也进行了免疫组化和原位杂交检测。结果　ＨＣＣ组织中ＨＣＶ阳性率为５０％（３９／７８）,与ＨＢＶ者（６４．４％）差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５）,两者重叠感染率３４％（２０／５９）。在１０例血清ＨＣＶ阴性ＨＣＣ患者中,３例ＨＣＣ冰冻组织检出ＨＣＶＲＮＡ。在ＨＣＣ组织中共检出３种ＨＣＶ基因型,其中２ａ、１ｂ、３ａ和混合型分别为１７例（４３．６％）、９例（２３．１％）、４例（１０．３％）和２例（５．１％）,各基因型间差异有极显著性意义（Ｐ＜０．０１）,但２ａ型与１ｂ型间差异无显著性（Ｐ＞０．０５）,２ａ型与ＨＢＶ的重叠感染明显较其他ＨＣＶ基因型者常见（Ｐ＜０．０５）。结论　２ａ型ＨＣＶ是ＨＣＣ组织中最常见的基因型并易与ＨＢＶ重叠感染率,ＨＣＣ患者血清ＨＣＶ检测不一定能准确反映ＨＣＣ组织中的ＨＣＶ感染率,其所示基因型也有所不同。     

肝细胞癌中丙型肝炎病毒的原位检测

目的了解丙型肝炎病毒在本地区肝细胞癌中存在的频度.方法66例首次住院手术肝癌标本(含癌及癌旁组织),其固定、包埋、切片均经无RNase处理.应用地高辛标记HCVcDNA重组基因探针进行原位杂交,检测HCV病毒核酸.免疫组化SABC法检测HCV不同基因区抗原,HCV-CP10,HCV-NS3,HCV-NS5在HCC中的表达.结果66例HCC中HCVRNA阳性50例,阳性率为75.8%,阳性信号大部分存在于胞质中,偶有核阳性,或核浆混合型.HCVCP10阳性42例,阳性率63.6%.HCVCP10的阳性表达定位于胞质,少数病例有明显的围核分布现象,未见明确的核阳性.HCVNS3阳性33例,阳性率50%.HCVNS3阳性信号以胞质型为主,少数为核、浆混合型.HCVNS5阳性48例,阳性率72.8%.HCVNS5阳性信号以胞质型为主,部分呈膜型,少数为核、浆混合型.HCVRNA及三种抗原在癌周组织中的表达明显强于癌组织者.阳性细胞在癌组织呈散在分布,少数呈灶性分布,偶尔呈弥漫分布.在癌周组织大部分呈灶性、弥漫性分布,也可呈散在分布.经x2检验原位杂交检测HCVRNA一般比免疫组化检测HCV不同基因区抗原阳性率高,敏感(HCVRNA与HCVCP10相比,x2=4.083,P<0.05;与HCVNS3相比,x2=13.479,P<0.005;与HCVNS5相比,x2=0.1,P>0.5).两种检测方法的结果又有联系(HCVRNA与HCVCP10之间,x2=21.038,P<0.005;与HCVNS3之间,x2=13.942,P<0.005;与HCVNS5之间,x2=29.838,P<0.005).结论原位杂交结合免疫组化更能准确反映HCC中HCV的感染情况.     

HCV相关HCC中伴随HBV感染的意义

目的了解HCV相关HCC中伴随HBV感染的意义,初步探讨HCV和HBV在HCC的发生中的独立作用或相互作用的机制.方法原位杂交检测HCC中c-myc,H-ras,N-ras和nm23H1的mRNA表达,观察它们在伴随HBV感染组(n=44)与单纯HCV感染组(n=10)之间的差异.结果 H-ras和nm23H1在两组的表达强度有差别,H-ras在C+B组的表达强于C组(P=0.0254),而nm23H1的表达C组强于C+B组(P=0.0158).结论 HBV与HCV能协同影响H-ras的表达;单纯HCV相关HCC组之nm23H1 mRNA表达高于伴随HBV感染组,可能是HCV相关HCC低转移率的机制之一.     

罗丹明-6GDN在体外的正常细胞和肿瘤细胞中潴留效应比较

对荧光染料罗丹明-6GDN(Rhodamine-6GDN,Rh-6GDN)在细胞中潴留效应的研究表明,正常细胞与肿瘤细胞对Rh-6GDN的摄取无明显差别,但肿瘤细胞保留Rh-6GDN的能力显著强于正常细胞,肿瘤细胞能保留染料达5d以上,而正常细胞在24h内将染料完全排出,二者之间的差异为Rh-6GDN在肿瘤诊断上的应用提供了可能性。     

肝细胞癌癌组织三维形态学观察——共聚焦激光扫描显微镜的应用

目的 应用CLSM对肝细胞癌标本的石蜡切片进行三维重建,显示立体形态特点,探讨CLSM在肿瘤病理学中的应用.方法 30μm石蜡切片,YOYO-1碘化物DNA荧光探针标记细胞核,CLSM连续光学切片、三维重建,观察肝细胞癌、不典型增生及正常肝组织的三维形态特点.结果 肝癌细胞核排列紊乱、积堆,体积增大、大小不等、明显多形;核表面不规则、凹凸不平、荧光强度不均;核内染色质分布不均、结构粗糙、多浓集于核膜下.结论 CLSM的断层扫描和三维重建功能提供了高精密度的三维图象和丰富信息,有助于准确诊断.     

大鼠肝细胞GSH转运体系在非洲爪蟾卵中的表达

探讨大鼠肝细胞ＧＳＨ转运体系在非洲爪蟾卵中表达的可能性。用大鼠肝细胞ｍＲＮＡ注射蛙卵，检测蛙卵转运ＧＳＨ的活性。结果：注射大鼠肝细胞ｍＲＮＡ的蛙卵，３ｄ后能表达摄取和释放ＧＳＨ的转运活性，而注射水的蛙卵则不显示这种转运活性。将大鼠肝细胞ｍＲＮＡ进一步分段离心后分别注射蛙卵，发现大鼠肝细胞的两类ＧＳＨ转运蛋白分别由分子大小为２．０～３．０ｋｂ和４．０～５．０ｋｂ的ｍＲＮＡ所编码。结论：非洲爪蟾卵可用于检测和克隆大鼠肝细胞ＧＳＨ的转运蛋白。     

雌二醇和地塞米松调节乙型肝炎病毒抗原的表达

对雌二醇和地塞米松调节乙肝病毒表面抗原(HBsAg)和乙肝病毒θ抗原(HBeAg)表达的研究结果表明,10~(-6)mol/L雌二醇和10~(-6) mol/L地塞米松都能增加乙型肝炎病毒-DNA转染人体肝癌细胞株2·2·15细胞分泌HBsAg和HBeAg,雌二醇的作用明显强于地塞米松。未发现该两类激素之间有协同或拮抗作用。作者对乙型肝炎(乙肝)发病与性激素的关系及乙肝疫苗生产途径的设想进行了讨论。