秦皮乙素对肾透明细胞癌增殖、周期和凋亡的影响

目的:探讨秦皮乙素对肾透明细胞癌增殖、周期和凋亡的作用。方法:选取肾透明细胞癌786-O和SN12-PM6细胞,分别给予秦皮乙素(0、12.5、25、50、100、200、400、800μg/mL),培养24 h或48 h后,通过MTS和平板克隆形成实验检测秦皮乙素对786-O和SN12-PM6细胞增殖能力的影响,通过流式细胞技术检测秦皮乙素对786-O和SN12-PM6细胞周期、凋亡的影响,通过Western Blot检测周期、凋亡相关蛋白表达情况。结果:秦皮乙素能够抑制肾透明细胞癌786-O和SN12-PM6细胞的增殖(P0.05),且呈浓度和时间依赖性,与空白组(0μg/mL)相比,秦皮乙素处理组(100、200μg/mL)S期比例明显减少,G_0/G_1期和G_2/M期比例明显增加,凋亡率也明显增加(P0.05,P0.01),与空白组(0μg/mL)相比,秦皮乙素处理组(100、200μg/mL)Cyclin D1、CDK4、CDK6、c-Myc表达明显减少,Caspase 3表达无明显差异,Cleaved Caspase 3表达明显增多(P0.05,P0.01)。结论:秦皮乙素可有效抑制肾透明细胞癌786-O和SN12-PM6细胞增殖,并抑制细胞周期及诱导凋亡。     

腹腔镜根治性膀胱切除及原位尿流改道

膀胱尿路上皮癌是最常见的泌尿系肿瘤,根治性膀胱切除是肌层浸润性膀胱癌的标准治疗方法。经过二十多年的发展,开放根治性膀胱切除（openradicalcystectomy,0RC）及原位尿流改道已成为主要的手术方式。随着技术和设备的不断完善,腹腔镜手术在泌尿外科的应用已得到了广泛的拓展,在腹腔镜下根治性膀胱切除（1aparoscopicradicalcystectomy,LRC）、原位尿流改道方面已取得了较大的进步。然而,由于手术的步骤较多、操作复杂、手术时间长,该手术是否能成为常规的手术方式一直存在着争议。     

醛固酮诱导大鼠主动脉平滑肌细胞凋亡

目的 观察醛固酮在体内能否诱导主动脉平滑肌细胞凋亡.方法 将24只SD大鼠随机分为3组,每组8只:(1)空白溶剂设为对照组;(2)醛固酮组;(3)醛固酮+血管扩张剂组.渗透泵内分别注入醛固酮(1 μg/h)或空白溶剂,然后埋于大鼠背部皮下.肼苯哒嗪[25 mg/(kg·d)]溶于引用水,每日灌胃1次.8周后脱氧核苷酸末端转移介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测凋亡的主动脉平滑肌细胞.结果 醛固酮组和醛固酮+血管扩张剂组大鼠主动脉TUNEL阳性的平滑肌细胞分别占(18.0±1.5)％和(16.5±2.0)％,与对照组(4.7±1.0)％比较,差异有统计学意义(P＜0,05);后两组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 醛固酮在体内可以直接诱导主动脉平滑肌细胞凋亡.     

Fibulin-5真核表达载体的构建及稳定转染人膀胱癌细胞的研究

目的 构建Fibulin-5真核表达载体并转染人膀胱癌5637细胞.方法 经聚合酶链反应(PCR)扩增Fibulin-5 cDNA,然后将其与pMD-19T载体连接.pMD-19T-Fibulin-5重组体经过限制性内切酶Xho Ⅰ和EcoR Ⅰ的消化后产生Xho Ⅰ-Fibulin5-EcoR Ⅰ片段.将该片段插入增强型绿色荧光蛋白载体(p-EGFP N1)质粒的相似位点并最终合成p-EGFP-F5质粒重组体,并通过BgⅢ单酶切鉴定.通过脂质体介导法将p-EGFP-F5质粒转染至人膀胱癌5637细胞株内.结果 PCR扩增片段长度为1429 bp.Xho Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切的片段经DNA测序显示Fibulin-5 cDNA插入正确.p-EG-FP-F5质粒重组体经BgⅢ单酶切出一约450 bp的条带.转染48 h后,pEGFP-Fibulin-5和pEGFP-N1转染成功的细胞均有不同程度的绿色荧光表达.结论 成功构建Fibulin-5绿色荧光蛋白真核表达载体并转染至人膀胱癌细胞内.     

三种检查方式对输尿管结石所致急性肾绞痛诊断价值的比较

目的 比较超声、泌尿系平片(KUB)和螺旋CT平扫对输尿管结石所致急性肾绞痛诊断的价值,为临床诊断提供一种高效、无创的检查方法.方法 选取2011年1月至2013年8月在昆明医科大学第二附属医院泌尿外科确诊为输尿管结石的患者194例,其中9例为双侧输尿管结石,共203侧.所有患者均行超声、KUB和螺旋CT平扫检查,将3种检查结果与金标准进行对比研究.结果 于多层螺旋CT平扫诊断符合率100％,KUB诊断符合率为79.31％,超声检查诊断符合率为73.40％.螺旋CT平扫诊断符合率明显高于KUB及超声,统计学分析,差异有统计学意义(P＜0.01).KUB及超声对输尿管结石的诊断符合率统计学分析差异无统计学意义(P＞0.05).结论 非增强螺旋CT平扫对输尿管结石所致急性肾绞痛的诊断价值优于超声和KUB,是一种高效、准确的检查方法.     

经皮肾镜钬激光联合超声碎石治疗鹿角形肾结石:附36例报告

目的探讨经皮肾镜取石术(PCNL)钬激光联合超声碎石治疗鹿角形肾结石的可行性和疗效。方法 2010年4月至2011年5月,我院共对36例鹿角形肾结石实施了PCNL钬激光联合超声碎石治疗。首先建立22F的手术通道,钬激光快速将结石击碎为10mm内碎石,再通过超声碎石将结石清除,对于需要建立的的其他通道均采用18F或16F的微通道。结果手术均取得成功,单通道取石29例,双通道取石7例,平均手术时间105min。一次手术取净结石26例(72.2%),二次手术联合体外冲击波碎石取石术(ESWL)治疗7例。术后随访1～3个月,总无石率91.7%,无严重并发症发生。结论 PCNL联合钬激光和超声碎石治疗鹿角形肾结石具有清石效率高、手术时间短、无石率高、并发症少等优点。     

后腹腔镜下根治性肾切除术及其应用解剖学研究

目的 总结后腹腔镜下根治性肾切除术,并对镜下肾周区域相关解剖结构进行研究.方法 2006年1月至2008年3月行后腹腔镜下根治性肾切除术85例.肿瘤位于左肾38例,右肾47例;肿瘤直径2.5～10.5 cm,平均(5.5±1.7)cm;T1N0Mo 74例,T2:N0M0 11例.根据肾筋膜外切除原则,在"两个间隙、上下两极间"分离切除患肾,腹侧为肾旁前间隙(后腹膜与肾前筋膜之间),背侧为腰肌前间隙(肾后筋膜与腰肌筋膜之间),上极达膈下,下方到髂窝.术中辨认重要的解剖结构:后腹膜及其返折、肾前筋膜、侧锥筋膜、肾后筋膜、腰大肌及重要血管. 结果 除1例因与周围粘连严重中转开放手术外,其余均获得成功.手术时间50～165 min,中位数65 min.估计失血量25～600ml,中位数58 ml.术中腹膜破裂5例,肾蒂周围小血管损伤出血6例,无重要脏器及大血管损伤.术后平均随访10(2～25)个月,均无瘤生存,无局部复发或发生穿刺通道种植转移. 结论 后腹腔镜下根治性肾切除术时,熟悉重要的镜下解剖结构有利于提高手术安全性、减少副损伤.     

醛固酮腺瘤模型大鼠主动脉平滑肌细胞增殖与mdm2和p53的表达

目的 初步探讨肾上腺醛固酮腺瘤血管重构的机制.方法 将微量渗透泵植入大鼠皮下,随机分为对照组、腺瘤组、腺瘤+依普利酮组和腺瘤+肼苯哒嗪组.8周后检测主动脉平滑肌细胞的增殖状态和mdm2、p53的表达.结果 ①成功建立大鼠醛固酮腺瘤模型;②与对照组相比,腺瘤组大鼠主动脉平滑肌细胞增生活跃(P＜0.05);MDM2 mRNA和蛋白表达上调(P＜0.05);而p53只在蛋白水平增加(P＜0.05);③相较于肼苯哒嗪,依普利酮能抑制醛固酮的作用(P＜0.05).结论 醛固酮通过诱导mdm2表达而逆转p53的细胞周期阻滞作用,促使平滑肌细胞增殖,可能是醛固酮腺瘤血管重构的原因之一.     

解剖性后腹腔镜下肾上腺切除术的阶段性培训方法

目的 建立解剖性后腹腔镜下肾上腺切除术(ARA)的培训方法,评估其安全性和有效性. 方法 5名无开放性肾上腺手术经验的青年医师接受3个阶段腹腔镜培训:①模拟箱训练定向转移、切割及缝合,共300 h;②动物模型训练辨认和游离组织、切割止血及精细缝合打结,共120 h;③临床实践:初期仅为导师扶持腹腔镜,再独立完成简单的腹腔镜手术如肾囊肿去顶术,最后在导师指导下独立完成30例ARA.学员作ARA病例的选择由导师负责,与导师最初的选择一致(除外肾上腺嗜铬细胞瘤).记录患者术前资料包括性别、年龄、体质量指数、肿瘤位置、肿瘤大小、肿瘤病理类型,记录5名学员共完成150例ARA(学员组)总的中转开放率、手术时间、估计出血量、平均住院时间、手术并发症,并与导师最初完成30例ARA(导师组)的相应参数进行比较.采用SPSS 12.0软件进行数据处理,计数、计量资料分别采用x2和t检验(除手术时间为偏态分布,采用非参数检验).结果学员完成ARA患者的术前资料均与导师组患者资料相匹配(P值均>0.05).每名学员都成功实施了30例ARA,无中转开放手术者.学员组150例平均手术时间为82(59～133)min,短于导师组30例的手术时间132(73～230)min(P<0.01).学员组150例ARA的估计出血量为(62.2±22.0)ml,平均住院时间(4.8±1.3)d,与导师组30例ARA的估计出血量(63.9±21.1)ml和平均住院时间(4.5±1.4)d比较,差异无统计学意义(P>0.05).学员组与导师组围手术期并发症发生率比较差异无统计学意义(8.0%和13.3%,P>0.05),但学员组术中轻微并发症发生率(1.3%)低于导师组(10.0%,P<0.05). 结论 阶段性培训方法能安全、有效地使青年泌尿外科医师掌握ARA.     

血管紧张素Ⅱ受体在肾上腺产醛固酮腺瘤中的表达研究

目的：研究血管紧张素Ⅱ受体AT1R和AT2R在肾上腺产醛固酮腺瘤（APA）中的表达.方法：通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测50例APA及瘤旁组织和12例正常肾上腺组织中AT1R和AT2R mR-NA表达,采用免疫组织化学染色方法检测组织石蜡切片中AT1R和AT2R蛋白表达情况.结果：AT1R在腺瘤、瘤旁及正常肾上腺组织中的表达无明显差异.AT2R在APA组织中的表达低于正常肾上腺组织（P〈0.05）.将AT2R mRNA表达量与患者临床数据作相关性分析,提示AT2R的表达与患者血浆醛固酮浓度负相关（r=-0.467,P〈0.05）,与血浆肾素活性正相关（r＝0.604,P〈0.05）.结论：AT2R表达下调可能与肾上腺产醛崮酮腺瘤原发性醛固酮增多症的发病相关.